全 文 :常生命的重要元素[5],其中 Ca 和 Mg,K,Na 还具有
协同作用,在调节神经肌肉兴奋性、保持心肌的正常
功能上具有重要作用[6]。而肉豆蔻中这些元素炮
制前后各有变化,Mg,Ca,Fe,Na 等元素的含量有所
升高,K 有所降低。
肉豆蔻中 Cu,Zn,Se,Cr,Co,Mn,V,Ni等微量必
需元素含量较高,其中 Mn 元素居首位,其次为 Cu,
Zn。而在这些微量必需元素中 Zn 被称为生命之
花,它在维持人体许多器官和组织生理、免疫功能以
及提高药物效能方面起着重要的作用,人体缺 Zn
时,可影响脑细胞的能量代谢及氧化还原等过程,表
现为食欲减退、味觉异常、皮肤粗糙、侏儒等。缺 Mn
则可引起发育迟缓、多动、动脉硬化、早衰、白发、性
功能下降。Cu 元素参与造血过程,参与形成含铜
蛋白质,是细胞色素氧化酶,血浆铜蓝蛋白、超氧化
物歧化酶等许多酶的重要组成成分。血浆铜蓝蛋白
参与铁的运输和代谢,从而有利于体内贮存铁和食
物中铁的吸收[7]。而肉豆蔻炮制后,这些元素含量
没有明显的变化,仅有元素 V的含量稍升高。
肉豆蔻中潜在有毒元素 Al,Sb,Be 等的含量较
低,经炮制后变化也不大,加之以上对肉豆蔻中其他
元素的分析,可以认为其是一味安全、有效的中药。
参考文献:
[1]张华.微波消解 - ICP-MS法测定多种中成药中的十三种
有害元素[J].首都师范大学学报(自然科学版) ,2007,
28(3) :53 - 57.
[2]《中华本草》编辑委员会. 中华本草(第 7 卷) [M]. 上
海:上海科学技术出版社,1999:1599.
[3]中华人民共和国药典委员会.中国药典[M].北京:中国
医药科技出版社,2010:126.
[4]曹继华,王正益,王勤.中药微量元素与健康[J].广东微
量元素科学,1999,6(10) :10.
[5]王淑云. Zn,Mg对大鼠成骨细胞生成分化的影响[J].中
华创伤杂志,1994,10(2) :561.
[6]邵美贞.缺镁和补镁应引起足够重视[J]. 中国药学杂
志,1992,27(7) :4291.
[7]唐朝忠,唐中伟,温伟业. 9 种补益中药锌铜锰铁含量测
定及其临床意义[J].山西农业大学学报,2000(3) :
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
242.
收稿日期:2011 - 12 - 08
基金项目:2010 年甘肃中医学院中青年基金项目(19)
作者简介:李硕(1981 -) ,讲师,医学硕士。研究方向:中药材鉴定及质量评价。
通讯作者:陈晖(1972 -) ,副教授,理学硕士。研究方向:天然药物化学成分分析。Tel:0931 - 8765440 E-mail:chenhui_lanzhou@ 163. com
·工艺研究·
正交试验优选黄花角蒿生物碱提取工艺研究
李 硕,陈 晖,李成义,王明伟,魏学明,常耀成
(甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000)
摘 要:目的 优选黄花角蒿生物碱的最佳提取工艺。方法 以总生物碱的含量为考察指标,采用正交
试验,考察提取溶媒的浓度、提取时间、液料比因素对提取的影响,确定黄花角蒿的最佳提取工艺。结果 最
佳提取工艺条件是:以 70%乙醇为溶媒,液料比为 15∶ 1,浸提时间 36 h。结论 优选得到的提取工艺得率
高,操作简便易行。
关键词:黄花角蒿;总生物碱;提取工艺;正交试验
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1003 - 8450(2012)03 - 0034 - 04
黄花角蒿(Incarvillea sinensis Lam. var. przewal-
skii)为紫薇科角蒿属植物,是角蒿(Incarvillea sinen-
sis Lam.)的变种,与角蒿极为近似,但花为黄色或
淡黄色,味辛、苦,性寒,有小毒,具有祛风湿、解毒、
杀虫之功效。其资源较丰富,主产于甘肃省天水、陇
南等地区[1],在陕西、青海也有分布[2]。甘肃民间
将其根及根茎用于治疗咽炎,效果良好。角蒿属植
物主要含有生物碱类、黄酮类、环烯醚萜苷类、香豆
素类等成分[3 - 4],具有镇痛、抗氧化、抗衰老、抗炎、
抗癌等活性[5 - 7]。研究结果表明,生物碱是角蒿属
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植物的主要活性成分。
近年来,国内外学者对角蒿属植物的本草考
证[8 - 9]、化学成分、药理作用等方面进行了一些研
究,但仅集中在角蒿一种上,对其他种研究较少。目
前针对角蒿生物碱提取工艺的相关研究很少[10 - 11],
以正交试验法优选黄花角蒿生物碱提取条件的研究
未见报道。为此,本实验以甘肃礼县的野生黄花角
蒿为研究对象,进行理化鉴别;并以总生物碱的含量
为指标,以提取溶媒的浓度、提取时间、液料比为考
察因素,应用酸碱滴定法进行测定,对正交试验结果
进行数据分析,优选黄花角蒿生物碱提取工艺条件,
为黄花角蒿资源的开发利用提供依据。
1 仪器、试剂与材料
1. 1 仪器
Uph - I - 5T型优普超纯水制造系统(上海优普
超片设备公司)、BS 224 S 型电子天平(德国赛多利
斯仪器公司)、KQ -250TDB型高频数控超声波清洗
器(昆山市超声仪器有限公司)、SHZ - C 型循环水
式多用真空泵(河南省巩义市英峪仪器厂)、WFH -
201B紫外透射反射仪(上海精科实业有限公司)。
1. 2 药物与试剂
采集甘肃陇南礼县陈关镇刘沟村的野生品,由
甘肃中医学院李成义教授鉴定为紫薇科角蒿属植物
黄花角蒿(Incarvillea sinensis Lam. var. przewalskii)
的根。硫酸、氢氧化钠标准溶液的配制及标定按
2010年版《中国药典》一部硫酸(0. 01 moL /L)、氢氧
化钠(0. 02 moL /L)标准溶液的配制及标定方法进
行,经过标定,所用硫酸滴定液为 0. 010 20 moL /L,氢
氧化钠滴定液为 0. 018 31 moL /L;乙酸乙酯、浓盐
酸、氯化汞、95%乙醇购自天津化学试剂三厂,碘、碘
化钾、硅钨酸购自北京化工厂,均为分析纯;氨试液、
甲基红 -亚甲基蓝(2 ∶ 1)指示剂为化学纯;蒸馏水
自制。
2 方法与结果
2. 1 理化鉴别
取黄花角蒿粉末约 5 g,加氨试液 5 mL,拌匀,
放置 20 min,加氯仿 50 mL,振摇,放置 1 h,滤过,滤
液置分液漏斗中,加稀盐酸 5 mL,振摇提取。分取
酸液,置 3 支试管中,分别滴加碘化汞钾、碘化铋钾、
碘 -碘化钾试剂,观察现象,结果见表 1。
2. 2 总生物碱提取工艺研究
2. 2. 1 总生物碱提取方法 将药材粉末 5 g 置于
装有不同浓度乙醇溶液的锥形瓶中浸泡,放置过夜,
滤过,合并滤液后,减压回收大部分溶剂,其余少量
低温蒸干,用 1%盐酸溶解,加氨水调 pH 为 10 ~
11,用乙酸乙酯萃取,取上层清液,萃取 4 次,合并萃
取液,放置在水浴锅上蒸干,得到残渣,用定量硫酸
标定液溶解,最后进行含量测定。
表 1 黄花角蒿生物碱理化检识
鉴别成分 试剂 现象 效果
黄花角蒿生物碱
碘化汞钾
碘化铋钾
碘 -碘化钾
类白色沉淀
棕色沉淀
红棕色沉淀
现象较明显
现象明显
现象较明显
2. 2. 2 正交试验设计[12 - 14] 按上述试验的提取工
艺,正交试验设计为:提取溶媒的浓度(A)、液料比
(B)、浸提时间(C)3 个因素,每个因素 3 个水平,每
种处理重复 3 次,以黄花角蒿总生物碱含量为考察
指标,用 L9(3
3)正交表安排试验。提取工艺正交试
验因素水平见表 2。
表 2 提取工艺正交试验因素水平表
水平 A/% B(V / W) C /h
1 70 6∶ 1 12
2 80 10∶ 1 24
3 95 15∶ 1 36
2. 2. 3 总生物碱含量测定 按酸碱滴定(反滴定
法)的方法进行,在 2. 2. 1 中所得残渣中精密加入
经标定的硫酸滴定液 5 mL 与甲基红 -亚甲基蓝指
示剂 2 滴,然后逐滴加入氢氧化钠滴定液观察颜色
变化,颜色由深紫色变为绿色即停止滴定,记录数
值。
2. 2. 4 总生物碱含量测定 因本试验为首次测定
黄花角蒿中总生物碱含量,目前还没有标准物质进
行定量参照,因此总生物碱含量以角蒿特灵酯碱
(C53H82N308)进行定量计算,结果见表 3,方差分析
见表 4。由表 3、表 4 数据分析,影响黄花角蒿总生
物碱提取含量的因素排序为:液料比(B) >浸提时
间(C)>提取溶媒的浓度(A)。提取过程中,液料
比和提取时间对黄花角蒿总生物碱的提取效果具有
显著性影响,而浸提溶液的浓度影响较小。从 K1,
K2,K3可以得出,黄花角蒿总生物碱提取的最佳工
艺条件为 A1B3C3,即以 70%乙醇为溶媒,液料比为
15∶ 1,浸提时间 36 h。
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表 3 提取工艺正交试验结果(n =3)
实验号 A B C
总生物碱含量 /(mg /g)
1 2 3
∑Y/% ∑Y2 /%
1 1 1 1 6. 77 6. 41 6. 06 19. 240 0 123. 644 6
2 1 2 2 12. 83 12. 56 12. 12 37. 510 0 469. 256 9
3 1 3 3 14. 61 11. 43 14. 25 40. 290 0 547. 159 5
4 2 1 2 7. 48 8. 55 8. 03 24. 060 0 193. 533 8
5 2 2 3 11. 40 11. 78 12. 12 35. 300 0 415. 622 8
6 2 3 1 12. 11 12. 02 11. 94 36. 070 0 433. 696 1
7 3 1 3 9. 28 8. 55 9. 98 27. 810 0 258. 821 3
8 3 2 1 11. 40 11. 76 12. 11 35. 270 0 414. 909 7
9 3 3 2 12. 82 13. 02 13. 19 39. 030 0 507. 848 9
K1 97. 040 0 71. 110 0 90. 580 0 294. 580 0 3 364. 493 6
K2 95. 430 0 108. 080 0 100. 600 0 10 067. 190 2
K3 102. 110 0 115. 390 0 103. 400 0
R 5. 070 0 44. 280 0 12. 820 0
注:总生物碱含量以角蒿特灵酯碱(C53H82N308)计。
表 4 总生物碱含量方差分析表
来源 SS df S2 F P
A 2. 700 7 2 1. 350 4 2. 773 6 > 0. 01
B 125. 219 8 2 62. 609 9 128. 598 6 < 0. 01
C 10. 096 0 2 5. 048 0 10. 368 4 < 0. 01
SSe 8. 763 5 18 0. 486 9
注:F0. 01(2,18)= 7. 2148。
3 讨论
角蒿属植物具有较强的镇痛、抗氧化活性,其中
生物碱是角蒿属植物的主要活性成分。黄花角蒿资
源在甘肃分布较广,民间用药效果显著。本实验采
用正交试验优选得到的总生物碱提取工艺得率高、
操作简便易行,为黄花角蒿的资源开发与利用奠定
了基础。
参考文献:
[1]赵汝能.甘肃中草药资源志(上册) [M].兰州:甘肃科学
技术出版社,2004:1154 - 1155.
[2]李燕,李兆光,解玮佳.西南高山的角蒿属奇葩[J].植物
杂志,2003(1) :1.
[3]晏永明,董小萍,程永现.角蒿药用植物化学与活性研究
进展[J].亚太传统医药,2010,6(4) :119 - 125.
[4]李钦,沈月毛,张评浒,等. 角蒿中环己乙醇类化学成分
研究[J]. 中山大学学报(自然科学版) ,2008,47(5) :
59 - 62.
[5]吉腾飞,冯孝章.角篙属植物化学成分和药理活性[J].
国外医药·植物药分册,2003,18(4) :154 - 157.
[6]Chi Y M,Yan W M,Li J S. Original botanical statistics and
commercial investigation of Chinese crude drug“Tougucao”
[J]. China J Chin Mater Med,1990,15:262 - 265.
[7]王漩,崔景荣,肖志平,等. 透骨草类药材抗炎镇痛作用
的比较[J].北京医科大学学报,1998,30(2) :145 - 147.
[8]张慧燕,阎文玫.阴行草与角篱的本草考证[J].中国医
药学报,1992,7(5) :38 - 39.
[9]陈修源,陈家峰. 角篙的本草考证[J]. 中药材,1989,12
(3) :43.
[10]迟玉明,赵唏瑛,吉泽丰吉,等.角蒿总生物碱提取工艺
的研究[J].天然产物研究与开发,2005,17(4) :475 -
477.
[11]迟玉明,赵唏瑛,吉泽丰吉,等.离子交换树脂用于角蒿
总生物碱的纯化研究[J].天然产物研究与开发,2005,
17(5) :617 - 621.
[12]刘学湘,陈建伟. 川乌中总生物碱提取工艺优化研
究[J].中华中医药杂志,2009,24(1) :98 - 100.
—63—
第 29 卷 第 3 期
2012 年 6 月
甘肃 中 医 学 院 学 报
J. GANSU COLLEGE OF TCM
Vol. 29 No. 3
June 2012
[13]杜弢,陈红刚,林丽,等.正交试验优化铁棒锤生物碱提
取工艺[J]. 中国实验方剂学杂志,2011,17(3) :20 -
22.
[14]何军,祝林,奉建芳. 附子总生物碱含量测定方法比
较[J].现代中药研究与实践,2003,17(6) :20 - 21.
Orthogonal optimization of extraction process of total alkaloid in Incarvillea
sinensis Lam. var. przewalskii
Li Shuo,Chen Hui,Li Chengyi,Wang Mingwei,Wei Xueming,Chang Yaocheng
(Gansu College of TCM,Lanzhou 730000,China)
Abstract:Objective To optimize the extraction process of total alkaloids in Incarvillea sinensis Lam. var.
przewalskii by orthogonal design. Methods The optimal extraction conditions,such as extraction solvent,extrac-
tion times,and ratio of solvent to material were investigated by orthogonal design and the content of the total alka-
loids was the inspection index. Results The optimal conditions for the extraction process were as follows:took 15
times 70% alcohol as dissolving medium,and the extraction process lasted for 36 hours. Conclusion The extrac-
tion technology developed after optimization was of a high efficiency and easier to operate.
Key words:Incarvillea sinensis Lam. var. przewalskii;total alkaloid;extraction process;
櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄
orthogonal experiment
·临床研究与报道·
收稿日期:2011 - 11 - 29
作者简介:黄美杏(1960 -) ,女,主任医师,教授,硕士研究生导师。研究方向:呼吸系统疾病的诊治。
补肺防喘汤治疗肺气虚型慢性阻塞性肺疾病
稳定期 30 例疗效观察
黄美杏1,王苗蕊2,冯 原1,邱利梅2
(1.广西中医学院附属瑞康医院,广西 南宁 530011;
2.广西中医学院研究生院,广西 南宁 530000)
摘 要:目的 观察补肺防喘汤治疗肺气虚型慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的临床疗效。方
法 将 60 例肺气虚型 COPD稳定期患者随机分为治疗组 30 例和对照组 30 例,2 组均予抗炎、祛痰、止咳及
吸入沙美特罗替卡松等常规综合治疗,治疗组在此基础上加用自拟补肺防喘汤口服。比较 2 组治疗前后的
肺功能、血气分析结果和生存质量评分。结果 2 组治疗后第 1 s用力呼气容积(FEV1)、第 1 s呼气容积占
预计值的百分比(FEV1%)、动脉血氧分压(PaO2)和血氧饱和度(SaO2)均显著升高,动脉血二氧化碳分压
PaCO2 及患者生存质量评分显著降低,与同组治疗前比较,差异均有统计意义(P < 0. 05) ,且治疗组疗效显
著优于对照组(P < 0. 05)。结论 补肺防喘汤治疗肺气虚型 COPD 稳定期患者疗效显著,可明显改善患者
肺功能,提高动脉血氧水平,防止呼吸衰竭的发生,延缓 COPD 病程的发展速度,提高患者的生存质量,值得
临床推广应用。
关键词:慢性阻塞性肺疾病;稳定期;肺气虚型;补肺防喘汤
中图分类号:R259. 633 文献标识码:B 文章编号:1003 - 8450(2012)03 - 0037 - 03
在慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发展过程中,肺
气虚证是 COPD及其并发症中最常见的证型,它直接
影响 COPD的发生、发展,并贯穿于 COPD 的整个病
程。中医历来十分重视机体的抗病能力,认为“邪之
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Vol. 29 No. 3
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