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海州常山花粉活力测定及其萌发条件



全 文 :书第 43卷 第 5期 东 北 林 业 大 学 学 报 Vol.43 No.5
2015年 5月 JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY May 2015
1)国家林业公益性行业科研专项(201404109)、江苏高校优势
学科建设工程资助项目。
第一作者简介:林燕青,女,1990 年 2 月生,南京林业大学风景
园林学院,硕士研究生。E-mail:726717454@ qq.com。
通信作者:杨秀莲,南京林业大学风景园林学院,副教授。E-
mail:yangxl339@ sina.com。
收稿日期:2014年 11月 19日。
责任编辑:任 俐。
海州常山花粉活力测定及其萌发条件1)
林燕青 杨秀莲 王良桂
(南京林业大学,南京,210037)
摘 要 选取海州常山(Clerodendrum trichotomum Thumb.)花粉为研究对象,研究了海州常山花粉活力测定的
方法、最佳培养基配方及其最佳培养条件;探究了花期及花粉采集时间对海州常山花粉萌发的影响。结果表明:染
色法及无机酸培养法不适宜于海州常山花粉活力的测定,最佳花粉活力测定法为液体萌发法;海州常山花粉萌发
最佳培养基配方为 150 g·L-1蔗糖+200 mg·L-1硼酸+150 mg·L-1氯化钙;其中硼酸及氯化钙 pH值为 5.5条件下
花粉萌发效果更佳;花粉最适宜培养条件为干燥 9 h,于 25 ℃光照条件下液体培养 8 h;花粉活力最强时间为花后 1~
2 d的 08:00。
关键词 海州常山;花粉;花粉萌发率;花粉活力
分类号 Q945.34;Q949.777.5
Pollen Activity Determination and Germination Conditions of Clerodendrum trichotomum Thumb / /Lin Yanqing,
Yang Xiulian,Wang Lianggui(Nanjing Forestry University,Nanjing210037,P. R. China)/ / Journal of Northeast Forestry
University,2015,43(5):93-96,122.
This experiment was conducted with C. trichotomum pollen to study the method of pollen activity assay,the best cul-
ture medium formula and its optimal culture conditions and the effects of flowering and pollen collecting time on the pollen
germination. The best methods of liquid staining and inorganic acid culture were not suitable for pollen activity assay,and
the best method was liquid culture. The best culture medium formula for pollen germination was 150 g·L-1 sucrose+boric
acid 200 mg·L-1+150 mg·L-1 calcium chloride. The effects of pollen germination would be better,if pH of boric acid
and calcium chloride was 5.5. The appropriate culture conditions was as follows:drying pollen for 9 h,then putting it at 25
℃ with light liquid culture for 8 h. When C. trichotomum was flowering for 1-2 d,the activity of pollen was the strongest.
Keywords Clerodendrum trichotomum Thumb;Pollen;Pollen germination rate;Pollen activity
海州常山(Clerodendrum trichotomum Thumb.)为
马鞭草科(Verbenaceae)大青属(Clerodendrum L.)小
乔木或灌木[1]。花序大,花果艳丽,花、花萼、果可
共存于同一树上,白、红、兰 3种颜色交替生辉,观赏
期长达半年,是既可观花,又可冬季观果的优良花
木[2-3]。海州常山还具有较强的抗旱、耐瘠薄、耐盐
碱能力,是一种很有潜力的城市废弃地恢复植物种。
此外,海州常山的茎叶均具有一些重要的药用成
分[4],可以医治肿瘤、高血压等多种疾病,是一种极
具经济价值的野生植物,极具开发潜力。
近年来,有关海州常山的研究多集中在其抗性
机理方面,鲜有海州常山花粉的相关研究。花粉是
植物重要的种质材料,其活力直接影响到植物的遗
传、育种、进化、生殖等的效率和能力[5-7]。花粉活
力的研究对人工授粉和杂交育种,解决花期不遇等
问题具有极其重要的意义。
花粉生活力的测定常用的方法有:花粉直接授
粉、花粉人工萌发和花粉染色法鉴定等[8]。文中对
多种花粉活力测定方法进行了比较研究,筛选出了
最适宜于海州常山花粉活力测定的方法,探究了海
州常山花粉萌发的最佳培养基及最佳培养条件。同
时比较了海州常山花期及花粉采集时间对其花粉萌
发率的影响。旨在探究保持较强海州常山花粉活力
及花粉达到最佳萌发效果所需条件,为海州常山的
种质资源保存及育种提供参考。
1 材料与方法
用于研究花粉活力及萌发条件的材料来自江苏
盐城海州常山基地,研究花粉活力测定方法、花期及
花粉采集时间对花粉萌发影响的材料来自南京林业
大学校园及南京紫金山,采集时间为 2014年 8 月中
下旬。
用移液枪分装 0.1 mL液体培养基于每个双孔凹
玻片孔内,使用牙签将待试花粉均匀点入培养液中,
使其充分混合,将凹玻片放入铺有湿润滤纸的培养皿
中,置于 25 ℃光照人工气候箱中培养 6 h。在 40 倍
电镜下观察统计花粉萌发率,每处理统计 3 个视野,
每个视野花粉粒数不少于 50粒,每试验 3个重复,花
粉萌发以花粉管长度大于花粉粒直径为标准[9-10]。
花粉萌发率=(萌发的花粉粒数 /花粉粒总数)×
100%。
花粉萌发法:设置不同质量浓度糖溶液,包括淀
DOI:10.13759/j.cnki.dlxb.20150522.026
粉、乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖,质量浓度梯度均为
0、50、100、150、200、300 g·L-1,筛选最适宜于海州
常山花粉萌发的糖因子。硼酸质量浓度梯度设置为
0、50、100、200、300、500 mg·L-1,氯化钙质量浓度
梯度设为 0、50、150、250、350、500 mg·L-1,确定最
佳单因子培养基[11]。
将各质量浓度梯度硼酸及氯化钙液体培养基分
别配置其 pH值为 5.5、6.0、6.5,培养海州常山花粉 6
h,观察统计其萌发率,研究比较硼酸及氯化钙的 pH
值与质量浓度对花粉萌发率的交互作用[11]。
在单因子试验的基础上,进行 L25(5
3)正交试
验[11-12],与最佳单因子组合相比较,选取对海州常
山花粉萌发影响最大的培养基组合。
在最佳培养基的基础上,设置以下 4 个方案来
探究海州常山花粉最佳培养条件:于 25、35、45 ℃黑
暗条件下培养花粉 6 h,观察统计花粉萌发率,探究
短时高温对花粉萌发率的影响;将海州常山花粉于
黑暗与光照下培养 6 h,比较花粉萌发状况,研究光
照条件对海州常山花粉萌发率的影响;分别培养花
粉 2、4、6、8、10、12、24 h,确定海州常山花粉最适宜
的培养时间;将同样的花粉均匀分为 6份,分别放置
于铺有玻璃纸的培养皿中,放入烘箱 25 ℃,分别干
燥 1、3、6、9、12、24 h后取出,待其温度达到室温,培
养干燥后的花粉,统计花粉萌发率,确定海州常山花
粉最适宜干燥时间[11-12]。
花粉活力测定方法:花粉活力测定采用染色法
和离体培养法,染色法有碘-碘化钾染色法、TTC染色
法、联苯胺染色法。离体培养法有无机酸刺激花粉管
伸长的硫酸(质量分数梯度为 7.2%、14.4%、28.0%)
培养法和液体萌发法[13]。
花期及花粉采集时间对花粉萌发率的影响:选
择晴朗的天气,分别采集花蕾期、开花第 1 天 ~第 2
天、开花第 3天、花谢后的海州常山花粉进行液体培
养,统计花粉萌发率,确定采集海州常山花粉的最佳
时期[6]。分别在同一天的 08:00、12:00、16:00 采集
盛花期且生长健壮植株的花粉,收集于聚乙烯离心
管中,迅速带回实验室培养并测定其萌发率,确定海
州常山花粉采集的最适时间。
数据统计分析:测定数据使用 EXCEL 及
SPSS19.0软件进行处理。
2 结果与分析
2.1 海州常山花粉活力测定方法的分析比较
本试验采用 3种染色法(TTC、联苯胺、碘-碘化
钾染色法)和 2种离体培养法(液体培养法、硫酸培
养法)测定海州常山花粉活力。试验结果显示,染
色法测定海州常山花粉活力效果并不明显,海州常
山花粉为深紫色,所以采用染色法无法区分出花粉
是否被染色,不适宜用于海州常山花粉活力的测定。
由表 1显示,经无机酸培养法测定的海州常山花粉
活力极显著低于经液体培养法测定的花粉活力,经
14.4%质量分数硫酸测定的花粉活力为 27.12%,相
对较高;经 7.2%质量分数硫酸测定的花粉活力为
14.23%;经 28.0%质量分数硫酸处理造成了花粉细胞
的质壁分离,萌芽率为 7.84%;试验采用 14.4%质量分
数的硫酸测定花粉的活力。液体培养法(150 g·L-1
蔗糖溶液)测定的海州常山花粉活力为 72.27%,可以
直接观察花粉管的发育情况,能较好地反映花粉的萌
发率。故采用液体培养法可更准确的测定海州常山
花粉的活力。
表 1 液体培养法与硫酸培养法测定海州常山花粉活力比较
活力测定 硫酸质量分数 /% 花粉活力 /%
液体培养法 — (72.27±1.68)aA
7.2 (14.23±0.78)cC
硫酸培养法 14.4 (27.12±0.89)bB
28.0 (7.84±0.78)dD
注:—表示不含硫酸;表中数据为平均值±标准差;同列不同大写
字母表示 1%差异显著水平,不同小写字母表示 5%差异显著水平。
2.2 单因子对海州常山花粉萌发的影响
2.2.1 不同糖因子对花粉萌发率的影响
由表 2显示,5种糖因子中,经质量浓度为 150 g·
L-1蔗糖培养的花粉萌发率最高,达到 22.84%,与经
葡萄糖、淀粉、乳糖及麦芽糖培养的花粉萌发率差异
均显著,可知 150 g·L-1蔗糖可以更加有效地提高
海州常山花粉的萌发率。
表 2 不同质量浓度各种糖因子对海州常山花粉萌发率的影响
质量浓度 /
g·L-1
萌发率 /%
淀粉 乳糖 麦芽糖 葡萄糖 蔗糖
0 (4.35±0.83)a (4.35±0.83)a (4.35±0.83)a (4.35±0.83)a (4.35±0.83)a
50 (12.93±2.02)ab (11.78±0.97)ab (9.27±0.62)b (12.50±0.75)ab (13.11±0.64)a
100 (15.09±3.72)a (13.43±4.75)a (10.82±1.24)a (13.43±1.34)a (14.25±0.98)a
150 (15.68±0.65)dC (16.08±0.96)cB (8.53±0.34)eD (19.97±0.50)bB (22.84±0.82)aA
200 (13.90±1.04)aA (11.73±0.98)bA (8.32±0.69)bB (12.06±0.98)bA (15.25±0.96)aA
300 (13.46±1.82)ac (9.70±0.88)a (6.80±0.49)b (9.87±0.58)a (13.53±1.74)a
注:表中数据为平均值±标准差;同行不同大写字母表示 1%差异显著水平,不同小写字母表示 5%差异显著水平。
49 东 北 林 业 大 学 学 报 第 43卷
2.2.2 单因子对花粉萌发率的影响
硼酸、蔗糖、氯化钙对海州常山花粉萌发均有显
著作用。质量浓度为 200 mg·L-1的硼酸溶液可以
极显著地提高花粉萌发率,达到 20.04%,且与经其
他质量浓度的硼酸溶液培养的花粉萌发率差异均极
显著;经 500 mg·L-1硼酸溶液培养的花粉萌发率
为 8.81%,与对照组(蒸馏水)所培养花粉的萌发
率(4.35%)差异不显著;经其余质量浓度的硼酸培
养的花粉萌发率均与对照组差异呈显著水平。经
150 mg·L-1氯化钙溶液培养下的花粉萌发率达到
22.27%,极显著的高于经 0、50、250、350、500 mg·
L-1氯化钙溶液培养下的花粉萌发率,后五者之间差
异均不显著。150 g·L-1蔗糖溶液可极显著的提高
花粉萌发率,达到 22.84%,与经 0、50、100、200、300
g·L-1蔗糖溶液培养下的花粉萌发率差异均呈极显
著水平。由此可见,适宜浓度的硼酸、氯化钙、蔗糖
溶液均可有效提高花粉萌发率,质量浓度过低或过
高的培养液会抑制花粉的萌发。
2.2.3 不同质量浓度、pH 值硼酸和氯化钙对花粉
萌发率的影响
由表 3 可以看出,当硼酸质量浓度为 50 ~ 200
mg·L-1时,花粉萌发率随着硼酸质量浓度的增大而
逐渐升高,但随着 pH值的升高而降低,可见硼酸质
量浓度为 200 mg·L-1,pH = 5.5 的情况下花粉萌发
率最高。
当氯化钙质量浓度为 150 mg·L-1、pH = 5.5 的
情况下花粉萌发率较显著高于其他两种 pH 值下的
萌发率。结合 2.2.2 的结论,可以得出硼酸及氯化
钙 pH值对花粉萌发率的影响没有其质量浓度对萌
发的影响显著,且硼酸和氯化钙溶液的 pH 值为 5.5
时,更适宜海州常山花粉的萌发。
表 3 不同质量浓度、pH 值硼酸和氯化钙对花粉萌发率的
影响
因子
处理质量浓
度 /mg·L-1
萌发率 /%
pH=5.5 pH=6.0 pH=6.5
硼 酸 50 (16.11±0.60)aA (14.87±2.03)aA (12.59±0.81)aA
100 (16.72±1.17)aA (15.82±0.76)aA (12.94±0.15)aA
200 (20.60±0.78)aA (18.1±0.35)aA (15.10±0.59)bB
300 (14.24±0.29)aA (10.48±0.94)aA (11.48±0.87)aA
氯化钙 50 (13.37±0.34)aA (14.78±0.41)aA (13.56±0.15)aA
150 (24.99±0.45)aA (17.79±0.10)bB (18.95±0.07)bB
250 (14.41±0.10)aA (13.30±0.11)abA (12.23±0.24)bA
350 (12.22±0.24)aA (10.20±0.09)aA (7.66±0.19)bB
注:表中数据为平均值±标准差;同行不同大写字母表示 1%差
异显著水平,不同小写字母表示 5%差异显著水平。
2.3 蔗糖、硼酸、氯化钙三因子正交试验结果
由表 4显示,第 1 到第 25 组为正交试验组合,
第 26组为 2.2.2得出的最佳单因子组合。正交试验
结果显示,海州常山花粉在第 23 组(蔗糖 200 g·
L-1+硼酸 200 mg·L-1+氯化钙 150 mg·L-1)培养基
配方下的花粉萌发率是最高的,达到 22.02%。其次
为第 18组(蔗糖 150 g·L-1 +硼酸 200 mg·L-1 +氯
化钙 50 mg·L-1)培养基配方下的花粉萌发率,为
20.57%。在 2.2.2 试验的基础上,蔗糖、硼酸、氯化
钙最佳单因子的组合(第 26组:蔗糖 150 g·L-1 +硼
酸 200 mg·L-1+氯化钙 150 mg·L-1)培养基配方下
的花粉萌发率达到 28.07%,与正交组合的第 23 组
培养基下花粉萌发率差异不显著外,与其他正交组
合的花粉萌发率均达到极显著差异。
综上所述,海州常山花粉离体培养的最佳液体
培养基配方为最佳单因子组合:蔗糖 150 g·L-1 +硼
酸 200 mg·L-1+氯化钙 150 mg·L-1。
表 4 海州常山花粉正交试验的萌发率
组合
蔗糖质量浓
度 /g·L-1
硼酸质量浓
度 /mg·L-1
氯化钙质量浓
度 /mg·L-1
萌发率 /
%
1 0 0 0 (3.75±0.91)fC
2 0 50 50 (10.57±1.04)cefhC
3 0 100 150 (11.91±1.01)cefghCD
4 0 200 250 (11.88±0.82)cefghCD
5 0 300 350 (10.89±0.85)cefghCD
6 50 0 50 (12.38±1.29)cefghBCD
7 50 50 150 (14.33±0.91)bceBC
8 50 100 250 (15.33±1.56)bcdghBCD
9 50 200 350 (14.92±1.06)bcdeghBCDE
10 50 0 300 (11.58±1.07)cefghCD
11 100 50 250 (15.07±0.85)bcdeghBCD
12 100 100 350 (14.03±0.97)bceghBCD
13 100 0 150 (14.01±1.07)bceghBCD
14 100 200 0 (16.04±1.37)bcdeghBCD
15 100 300 50 (16.92±1.48)bcdeghBCD
16 150 50 350 (15.84±1.08)bcdeghBCD
17 150 100 0 (16.51±1.09)bcdeghBCD
18 150 200 50 (20.57±0.72)bBC
19 150 0 250 (13.78±1.37)bceghBCD
20 150 300 150 (17.70±1.35)bcdegBCD
21 200 50 0 (12.26±0.89)cefC
22 200 100 50 (16.11±1.32)bcdeghBCD
23 200 200 150 (22.02±1.44)abdAC
24 200 300 250 (12.81±1.13)cB
25 200 0 350 (11.37±0.84)cefghCD
26 150 200 150 (28.07±2.63)aA
注:表中数据为平均值±标准差;同列不同大写字母表示 1%差
异显著水平,不同小写字母表示 5%差异显著水平。
2.4 不同培养条件对花粉萌发率的影响
光照条件的选择:在光照及黑暗条件下培养海
州常山花粉,比较其萌发率,探究光照条件对海州常
山萌发的影响。试验结果显示,光照条件下培养的
海州常山花粉萌发率为 24.32%,黑暗培养的海州常
山花粉萌发率为 21.10%,可见光照条件下培养海州
常山花粉萌发率略高于黑暗培养的花粉萌发率。
59第 5期 林燕青,等:海州常山花粉活力测定及其萌发条件
培养时间的选择:海州常山花粉在培养 8 h 后
其萌发率基本不再变化,且出现断芽及模糊现象。
海州常山花粉在培养不同时间段后,花粉萌发率差异
显著。培养 8 h 的花粉萌发率达到最高,为 27.99%,
且极显著地高于培养 2、4 h 后的花粉萌发率,而与
培养 6、10、12、24 h下的花粉萌发率差异均不显著。
可知海州常山花粉培养的最佳时间为 8 h。
培养温度的选择:在高于 25 ℃的高温条件下海
州常山花粉萌发率达到 21.01%,且随着温度的升高
而极显著下降,温度升高为 35、45 ℃时,萌发率分别
下降为 14.06%、10.01%。可见温度太高会对海州常
山花粉活力造成破坏,不利于花粉的萌发。因此,海
州常山花粉萌发的适宜温度为 25 ℃。
最佳含水量的选择:海州常山花粉干燥 1 ~ 9 h
时,花粉萌发率随着干燥时间的延长而不断提高,干
燥 9 h以后花粉萌发率呈下降趋势。干燥 9 h 后花
粉萌发率达到最高,为 25.35%,与干燥 6 h的花粉萌
发率(21.01%)差异不显著外,与其他干燥时间下的
花粉萌发率均达极显著水平。干燥 9 h 后花粉萌发
率与不进行干燥处理的花粉萌发率(16.12%)达显
著水平。由试验结果可得,海州常山花粉在 25 ℃条
件下干燥 9 h较适宜。
2.5 海州常山花期与花粉采集时间对花粉萌发率
的影响
为探究海州常山花粉采集的最佳时间,本试验
在不同花期及一天中不同时间采集海州常山花粉,
进行离体培养,统计其萌发率。试验结果显示,花蕾
期的花粉萌发率为 72.43%,与开花第 1 ~第 2 天花
粉萌发率(79.28%)差异不显著,但均与开花第 3 d
花粉萌发率(56.02%)差异极显著。花谢后其花粉
萌发率(8.70%)与前 3种情况下的花粉萌发率差异
均达极显著水平。可见在花蕾期及开花 2 d 内花粉
活力相对较高,开花第 1~第 2 d时花粉活力最强。
于 08:00采集的海州常山花粉萌发率为 75.20%,
12:00采集的海州常山花粉萌发率为 62.24%,二者
差异不显著,但均与 16:00 采集的海州常山花粉萌
发率(41.73%)有极显著差异。随着 1 d中时间的延
续,花粉萌发率显著下降,从而得出,海州常山花粉
活性在 1 d中的 08:00较高。可知海州常山的花粉
采集及人工野外辅助授粉等作业适宜在 08:00 进
行,此时花粉活力较强。
3 结论与讨论
糖类物质在花粉萌发和花粉管生长中起着重要
的作用,蔗糖起着维持花粉与培养基之间渗透平衡
的作用,也是花粉萌发的营养物质和能量来源[14]。
在花粉萌发过程中,硼酸具有增加糖的吸收、转运和
代谢,帮助形成胞外 Ca2+梯度,促进花粉萌发和花粉
管生长等作用[15]。钙离子主要是在蔗糖和硼酸的
主导作用下起辅助作用,而这种作用对启动花粉萌
发和调节花粉管生长是必须的[16]。由试验得出,空
白对照下海州常山花粉萌发率为 3.75%,150 g·L-1
蔗糖培养下海州常山的花粉萌发率显著提高到
22.84%,200 mg·L-1硼酸下海州常山花粉萌发率达
到 20.04%,与大花蕙兰[17](Cymbidium hybridium)相
同,150 mg·L-1的氯化钙显著提高了花粉萌发率。
试验中,经 150 mg·L-1氯化钙培养下的花粉萌发率
达到 22%,相对于硼酸及氯化钙质量浓度对花粉萌
发率的影响,其 pH 值对海州常山花粉萌发率的影
响并不显著。海州常山花粉在硼酸及氯化钙 pH 值
为 5.5时其萌发率较 pH值为 6.0、6.5的情况下萌发
率高。
正交试验中蔗糖、硼酸、氯化钙之间的交互作用
并不明显,但由单因素试验所选出的最佳质量浓度
单因子组合 150 g·L-1蔗糖+200 mg·L-1硼酸+150
mg·L-1氯化钙则可显著提高花粉萌发率,蔗糖和
硼酸对海州常山花粉的萌发起最主要作用,钙离
子次之。
培养条件不同,海州常山花粉萌发率也达到显
著不同,与黄连木(Pistacia chinensis)[18]、无距虾脊
兰[19]相同,海州常山花粉最适宜萌发温度为 25 ℃,
可见海州常山花粉采集及野外授粉等活动适宜在
25 ℃温度条件下进行。
一定的含水量对花粉的萌发率及低温贮存有重
要的意义,试验中海州常山在烘箱中 25 ℃干燥 9 h
可显著提高花粉萌发率,超过 9 h 其活力显著下降。
由此可见,采集的海州常山花粉不适宜长时间暴露
在外。广玉兰[20]花粉培养 2 h,楸树花粉[21]培养 6
h,其花粉萌发状态最佳,试验中海州常山花粉需
要培养 8 h达最佳萌发状态,可能因为不同植物花
粉的结构与适应性有差异,因此,所需培养时间也
不同。
花粉生活力的测定在育种和种质保存中具有重
要意义[22-23]。本试验中,染色法对海州常山花粉的
染色效果不佳,海州常山花粉自身为深紫色,使用染
色法测定活力很难区分其是否被染色,有效且可快
速测定海州常山花粉活力方法为液体培养法。海州
常山活力的测定较适宜的染色法仍需要进一步的试
验研究。
花粉在不同的发育时期其活力显著不同,试验
得出海州常山在开花第 1~第 2天其(下转 122页)
69 东 北 林 业 大 学 学 报 第 43卷
0.01),说明速度是影响林区冰雪道路驾驶员心生理
反应的一个重要因素,在林区冰雪道路连续行车,车
速的增加直接增大驾驶员的心理紧张程度,速度越
高导致驾驶员心率变异程度增大,速度会影响驾驶
员自主神经系统的调控功能。因此,在林区冰雪道
路环境行车,速度是影响驾驶员心生理反应和安全
行车的一个重要因素,则建议在林区冰雪道路行车
时应注意对驾驶员行车速度的控制与管理,以保证
行车安全。但基于林区冰雪道路环境特殊性,以驾
驶员心生理反应为依据的合理速度还有待于进一步
试验研究。
参 考 文 献
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(上接 96页)花粉萌发率达到最高。1 d 中海州常
山花粉活力也是不同的,在 08:00花粉活力较强,萌
发率较高,随着时间的延续,海州常山花粉活力不断
的降低。因此,收集花粉及人工辅助授粉适宜在花
期 1~2 d完成,于 08:00 进行效果较好。试验中于
南京采集的海州常山花粉萌发率远大于从盐城试验
基地所采集海州常山的花粉萌发率,可知长距离及
长时间的携带对海州常山花粉萌发率影响较大。
参 考 文 献
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