全 文 ：2011 年 11月第 18卷第 31期制剂与技术
中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
飞燕草 （delphinium grandiflorum）为毛茛科翠雀属的多
年生草本植物，又名大花飞燕草、千鸟草、翠雀、萝小花等，分
布于我国各地。 辛，苦，温，有毒，入肺，心，胃三经。 具有止咳
平喘，利水消肿，解痉止痛之功，主治喘息不得卧，水肿胀满，
腹痛，风热牙疼，头虱等症[1]。 主要含有生物碱、皂苷、黄酮等
有效成分，本课题通过前期研究发现飞燕草全草中含有一定
量的黄酮，但未见对其系统性研究，故本课题以飞燕草为原
料，系统研究其所含黄酮类成分，为最终深入了解飞燕草提
供全面的科学依据。
1 仪器与试药
UV-1700 型紫外可见分光光度计（日本岛津），加热套，
水浴锅，真空泵，旋转蒸发仪，以上器材均为北京安捷来科学
仪器设备有限公司生产。
飞燕草（采于吉林省磐石市，经长春中医药大学邓明鲁
教授鉴定为毛茛科翠雀属的多年生草本植物飞燕草）；芦丁
（含量测定用）；其余试剂为分析纯。
2 方法
2.1 飞燕草总黄酮的提取
精确称取飞燕草全草 500 g，加入乙醚 5 000 ml浸泡 3次，
每次 1.5 h，脱脂[2-5]。 残渣挥净乙醚，加入乙醇，采用回流提取
法提取飞燕草全草总黄酮，为了确定乙醇回流提取的最佳提
取条件，本文采用 4 因素 3 水平依正交试验表 L9（34）进行正
交试验。 考察因素：提取溶剂、提取次数、提取时间与溶剂用
量四因素。 因素水平见表 1。
2.2 飞燕草全草总黄酮的含量测定
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品 2.31 mg，置
10 ml 的容量瓶中，加 80%乙醇溶解，定容至刻度，即得对照
品溶液[5-8]。
2.2.2 样品溶液的制备 将正交试验所得各组提取液于 60℃
下减压回收乙醇，浓缩液置水浴锅上蒸干（60℃），干品研细，
过 60 目筛，精确称取干燥细粉 20 mg，置 100 ml 容量瓶中，
加 80％乙醇 70 ml，超声溶解 30 min，放冷后加 80%乙醇定
容至刻度，滤过，续滤液作为样品溶液[5-8]。
2.2.3 显影液的制备 称取 1.0 g硼酸和 1.0 g乙酸钠，置 100 ml
容量瓶中，加 80%乙醇定容至刻度，4℃以下保存备用[5-8]。
2.2.4 测定波长的选择 取对照品溶液和供试品溶液，加 3 ml
显影液，混匀后在 200～500 nm 范围内进行波长扫描，发现在
385 nm 处均有最大吸收峰，故选择 385 nm为测定波长[5-8]。
2.2.5 标准曲线的绘制 精密吸取芦丁对照品溶液 0.1、0.2、
0.3、0.4、0.5 ml，置 10 ml 容量瓶中，加 3 ml显影液，加 80%乙
醇定容至刻度，以 80%乙醇为空白对照，于 385 nm 处测定吸
光度，以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲
线，计算得回归方程 Y=67.56X-0.046 5，r=0.999 8（n=5）。 标
准曲线结果表明芦丁在 2.31～11.55 μg/ml 范围内与吸光度
呈良好的线性关系[5-8]。
2.2.6 样品含量测定 取正交试验所得样品溶液，在 385 nm处
测定吸光度，将吸光度带入标准曲线，直线回归法计算总黄
酮含量[5-8]。
正交试验优化飞燕草总黄酮提取工艺
徐 力
长春中医药大学附属医院药剂科，吉林长春 130021
[摘要] 目的：优选飞燕草总黄酮最佳提取工艺。方法：采用正交试验优化飞燕草乙醇提取工艺条件，并利用紫外分光
光度法测定总黄酮含量。 结果：正交试验确定最优提取条件，80%乙醇提取 3 次，每次 1.5 h，乙醇用量为 10 倍药材
量。 结论：该正交试验优化工艺简便、可行、重现性好。
[关键词] 飞燕草；总黄酮；提取；正交试验
[中图分类号] R943 [文献标识码] C [文章编号] 1674-4721（2011）11（a）-154-02
Orthogonal test for optimization of total flavonoids extracting procedure
from delphinium grandiflorum
XU Li
Affiliated Hospital Pharmacy of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Jilin Province, Changchun
130021, China
[Abstract] Objective: To optimize the extraction process of total flavonoids of delphinium grandiflorum. Methods: Opti-
mized the ethanol extraction process of delphinium grandiflorum, and determined the content with UV spectrophotometetry.
Results: Orthogonal to determine the optimal extraction conditions of flavonoids, 80% of ethanol, 3 times, 1.5 h, ethanol
was 10 times the amount of medicine. Conclusion: The method is simple, feasible, and reproducible.
[Key words] Delphinium grandiflorum; Total flavonoids; Extract; Orthogonal experiment
表 1 因素水平
1
2
3
50
80
95
2
3
4
1.0
1.5
2.0
6
8
10
水平
A 提取溶剂
（乙醇浓度）（%）
B 提取次数
（次）
C 提取时间
（h）
D 溶剂用量
（药材倍数）
154
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2011 年 11月第 18卷第 31期 制剂与技术
3 结果
3.1 实验结果
飞燕草全草乙醇回流提取法正交试验结果见表 2和表 3。
表 2 飞燕草全草正交实验结果（以总黄酮量为指标）
表 3 飞燕草正交试验方差分析（以总黄酮量为指标）
注：F0.1（2，2）=9.00，F0.05（2，2）=19.00
3.2 结果分析
由正交试验方差分析结果可知，因素 A、B、C 对结果均有
影响，且差异均有统计学意义，最终确定以折合到原药材中
总黄酮含量为指标进行测定时，飞燕草全草总黄酮的最佳提
取工艺为 A2B1C2D3，即：提取溶液浓度为 80%，提取次数为
2 次，提取时间为 1.5 h，溶剂用量为原药材 10 倍量。
4 讨论
本课题采用正交试验法对飞燕草全草总黄酮的乙醇提
取工艺进行了优选，以折合到原药材中总黄酮含量为指标，
实验过程中精确测定每组正交试验所得提取物的出膏率，通
过出膏率的计算将总黄酮含量折合到原药材中，从而使含量
测定结果具有可比性。正交试验结果表明飞燕草全草总黄酮
有效部位的最佳提取工艺为：80%乙醇提取 2 次，每次 1.5 h，
溶剂量为原药材量 10 倍量，按此结果提取飞燕草全草总黄
酮的提取效果最好，且该工艺操作，可节省能源，简便快捷。
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（收稿日期：2011-07-04）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
R
1
1
1
2
2
2
3
3
3
2.153
3.582
2.120
0.487
1
2
3
1
2
3
1
2
3
3.634
1.843
2.378
0.597
1
2
3
2
3
1
3
1
2
2.041
4.032
1.782
0.75
1
2
3
3
1
2
2
3
1
2.580
2.488
2.787
0.099 7
0.851
0.887
0.415
2.060
0.644
0.878
0.723
0.312
1.085
实验号 药材中总黄酮含量（%）
因素
A B C D
A
B
C
D
0.465
0.563
1.010
0.016
2
2
2
2
0.233
0.282
0.505
0.008
29.71
36.04
64.63
1
<0.05
<0.05
<0.05
方差来源 离均差平方和 自由度 方差 F 值 P 值
本刊制剂与技术栏目介绍
介绍普通药物制剂的制备工艺、质量控制、新药剂型研究以及药物传递系统和制剂新技术，包括控缓释与靶向
制剂、经皮给药系统、植入剂与黏膜给药系统、生物药物制剂、中药现代化制剂、制剂新技术（脂质体、微乳与纳米乳、
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