全 文 ：中国民族民间医药
Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy
药 物 研 究
Themedicinestudy
滇南黄草乌内生真菌的分离和初步鉴定 5
李治滢 李绍兰 杨丽源 陈有为 吴少华
云南大学省微生物研究所,云南 昆明 650091
【摘 要】:从滇南黄草乌 Aconitum vilmorimianum Kom.植物的根和茎中分离获得 37株内生真菌,经显微形态观察
进行初步鉴定,归属为 3目、5科、12属,其中镰孢霉属为优势属;且滇南黄草乌不同部位内生真菌的数量、分布和种群
存有差异。
【关键词】:滇南黄草乌 内生真菌 分离 鉴定
【中图分类号】R282.5;R284.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517(2008)07-0010-03
IsolationandidentificationofendophyticfungifromAconitumvilmorimianumKom
LIZhi-ying,LIShao-lan,YANG Li-yuan, CHENYou-wei,WUShao-huao
(YunnanInstituteofMicrobiology,YunnanUniversity,Kunming650091,China)
Abstract:Thirty-sevenstrainsofEndophyticfungiwereisolatedfrom therootandstemofAconitumvilmorimianumKom
plant,andendophyticfungiweremorphologicalyidentifiedtobelongtotwelvegenera,fivefamiliesandthreeorders, Fusarium
weredominantfamilies;andthediversitiesmadeinquantity, composinganddistributingoftheendophyticfungifromAconitum
vilmorimianum.
Keywords:Aconitumvilmorimianum;endophyticfungi;Isolation;identification
黄草乌为毛莨科乌头属植物 (Aconitum vil-
morimianum Kom.)的干燥块根,俗称大草乌。野
生滇南黄草乌是植物卡氏乌头的侧生块根,别名
藤乌、黄草乌、小草乌,属藤本耐寒植物 [1]。黄
草乌,云南素有大补药之称,是云南白药等名贵
中成药的主要原料之一,有搜风、除湿、活血、
止痛等功效。
对滇南黄草乌植物的研究报道主要针对植资
源开发及种植技术、人工驯化和提取植物中化学
成分等,而对该植物内生真菌的发现、种类组成、
数量与分布和种群多样性及其代谢活性物质的研
究报道至今未见。我们对滇南黄草乌植物内生真
菌作了系统的研究,从菌株分离、分类鉴定到代
谢活性产物的分离等,本文首次就滇南黄草乌植
物内生真菌分离和分类鉴定的资源学方面进行研
究报道。对其代谢活性产物的筛选和分离研究将
在以后作陆续报道。
1 材料
1.1 植物样品
活体植物滇南黄草乌Aconitum vilmorimianum
Kom.采自云南省会泽县大海乡中草药种植基地,
海拔高度3150m。
1.2 培养基
分离培养基:PDA培养基 (马铃薯葡萄糖培
养基),临用时每毫升培养基中加 80单位的青霉
素以抑制细菌生长;
鉴定培养基:PDA培养基和促孢培养基
(KH2PO4,MgSO4·7H2O,KNO3,KCl,葡萄糖,蔗
糖)。
2 方法
2.1 内生真菌的分离
2.1.1 样品消毒处理
e 基金项目:国家自然科学基金 (20502021)
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表2 滇南黄草乌植物内生真菌的分布
Tab.2 Thedistributingofendophyticfungifrom
Aconitumvilmorimianum
表1 滇南黄草乌植物内生真菌种群组成
Table.1 Thecomposingofendophyticfungifrom
Aconitumvilmorimianum
首先用自来水冲洗净滇南黄草乌植物的根、茎表
面的泥沙,进行表面消毒 [2]。
2.1.2 分离培养
将消毒好的滇南黄草乌植物在无菌状态下切
成 0.3×0.3cm大小的片段种植在 PDA培养基里,
置于28℃±1℃的温箱中静止培养。培养 3～15d后,
可见有菌丝生长,挑取植物组织周围的菌丝转接
入 PDA试管斜面,经纯化即得滇南黄草乌植物内
生真菌。
2.2 内生真菌的鉴定
采用插片培养方法,对分离获得的滇南黄草
乌植物内生真菌进行显微形态特征的观察、鉴定。
鉴定检索参照文献[3,4]。
3 结果与讨论
3.1 滇南黄草乌植物内生真菌的种群组成
从滇南黄草乌植物中分离获得内生真菌共 37
株。经显微形态观察,归属为 3目、5科、12属
(见表1)。
从表 1可看出,37株滇南黄草乌植物内生真
菌主要分布在丛梗孢目和无孢目,分别有 25株和
9株 (占菌株数的67.57%、24.32%);暗梗孢科和
无孢菌群 (Mycelia Sterelia)为滇南黄草乌植物
内生真菌的优势菌群,分别占菌株数的 35.14%和
24.32%;镰孢霉属 (Fusarium)有7株 (占菌株数
的18.92%)为滇南黄草乌植物内生真菌优势属种,
其次是毛壳菌属 (Chaetomium)、交链孢霉属
(Alternaria)和匐柄霉属 (Stemphylium)都是 3株
(占菌株的 8.11%),而青霉属 (Pennicilium)、葡
萄孢属 (Botrytis)、木霉属 (Trichoderma)和枝孢
属 (Cladosporium)则分别只有1株。
3.2 滇南黄草乌植物内生真菌的分布
在分离获得的内生真菌中,茎部分离获得的
内生真菌在数量和种属上都比根部的多 (见表2),
从茎部分离获得的内生真菌有 22株 (占菌株数的
59.46%)为 8个属 (占 12个属的 66.67%),而从
根部分离获得的内生真菌只有 15株 (占 40.54%)
5个属 (占41.67%)。
从表 2可以看出,从根和茎上分离获得的内
生真菌在种群上完全不同,除了无孢菌群外没有
相似性;无孢菌群是根部的优势菌群,有 6株占
根部菌株数的 40.00%;根部的优势属种为毛壳菌
属,有3株 (占20.00%);而茎部的优势属种是镰
孢霉属,有 7株占茎部菌株数的 31.82%,其次是
匐柄霉属和交链孢霉属都是3株占13.64%。
在滇南黄草乌植物分离获得的内生真菌在数
量上相对较少,这可能与滇南黄草乌植物含有剧
毒生物碱有关。研究结果表明,镰孢霉属不仅是
整个滇南黄草乌植物内生真菌的优势种群,而且
也是滇南黄草乌植物茎部内生真菌的优势种类。
而且在滇南黄草乌植物根部和茎部所分到的内生
真菌种群各不相同,在数量和分布上也存有明显
差异,造成这样的现象可能与乌头碱的种类和含
量有关,同时也表明滇南黄草乌植物内生真菌的
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元阳彝族治疗妇科病验方录 4
彭朝忠 1 祁建军 2 李先恩 2
1.中国医学科学院药用植物研究所云南分所,云南 景洪 666100;2.中国医学科学院药用植物研究所,北京 100094
【关键词】:民族药 治疗 妇科 验方
【中图分类号】R29;R271.1 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8517(2008)07-0012-01
我们参加 “云南及周边地区农业生物资源调
查”项目,负责药用植物的调查。2007年 10月
31日至 2007年 12月 3日,对元阳县彝族医药文
化进行调查,采用中药学、民族植物学、民族药
用植物学与人类学结合的方法,对元阳县彝族治
疗妇科病的验方进行收集、整理。元阳县彝族聚
居区妇科病是常见病、多发病,彝族人民就利用
当地植物来防治妇科病,我们在彝族地区通过开
调查会、走访彝族名医,把彝族治疗妇科病的验
方介绍如下:
验方 1:大树紫珠树皮 30g、芦子兰 30g、小
红人 30g,水煎服,酒为引,主治月经不调,1日
1剂,1日3次,1次500ml,3日为一个疗程;验
方2:小红蒜20g、野玉米50g、小红蒿20g,水煎
服,主治月经不调,1日 1剂,1日 3次,1次
300ml,6日为一疗程;验方3:马利筋50g、小响
铃 20g、山苏木 20g,水煎服,主治月经不调、崩
漏带下、痛经,1日 1剂,1日 3次,1次 400ml,
9日为一疗程;验方 4:红格草 60g、金荞麦 40g、
山红稗 30g,水煎服,主治月经不调、闭经,1日
1剂,1日3次,1次500ml,6日为一疗程;验方
5:红岩七50g、马茴香 4g、马蹄根 30g,水煎服,
主治月经不调、痛经、闭经、产后大流血、红崩,
1日 1剂,1日 3次,1次 300ml,3日为一疗程;
验方6:红靛50g、土大黄10g、士细辛10g,水煎
服,主治痛经、闭经、红崩,1日 1剂,1日 3
次,1次500ml,6日为一疗程;验方7:大叶千斤
拨100g、千层皮 50g、木姜子 20g,水煎服,主治
月经不调、痛经,1日 1剂,1日 3次,1次
400ml,3日为一疗程;验方8:胭脂粉根30g、映
山红30g、磨盘草30g,水煎服,主治月经不调,1
日1剂,1日3次,1次300ml,6日为一疗程;验
方9:宽叶千斤拨根100g、虎杖20g、大血藤20g,
水煎服,主治月经不调,1日 1剂,1日 3次,1
次 400ml,3日为一疗程;验方 10:吊吊香 50g、
千斤拨根20g、柴桂皮 20g、定心藤 50g,水煎服,
主治月经不调、痛经、闭经,1日 1剂,1日 3
次,1次 500ml,6日为一疗程;验方 11:树萝卜
50g、棕树心 30g、树甘草皮 20g、苏木 30g,水煎
服,主治月经不调,1日 1剂,1日 3次,1次
300ml,3日为一疗程。验方 12:虾子花 20g、茜
草20g、泽兰10g、韭菜根20g、棕树根20g,水煎
服,酒为引,主治痛经、闭经,1日 1剂,1日 3
次,1次 400ml,6日为一疗程;验方 13:野葡萄
根 50g、野牡丹根 20g、鸡矢藤 20g、真金草 20g,
接骨树根、树干内皮 20g,水煎服,主治白带过
多,产后大出血,1日 1剂,1日 3次,1次
500ml,3日为一疗程。
(收稿日期:2008.3.18)
4 基金项目:科技部基础项目 (2006FY110707)
数量和种群的多样性特点。
致谢:云南会泽县大海乡中草药种植基地提
供植物样品,在此表示感谢。
参考文献
[1]李明福.滇中黄草乌资源开发及种植技术 [J]安徽农业科学,
2006,34(1):11～12,14。
[2]李治滢,杨丽源,周斌等.灯细辛内生真菌的研究Ⅰ:菌种分离
及其分类鉴定 [J]。云南大学学报,2003,25(1):65～68.
[3]魏景超.真菌鉴定手册[M].上海:上海科学技术出版社,1979.
[4]H.L巴尼特,B.B亨特著,沈崇尧译.半知菌属图解 [M].北京:
科学出版社,1977.
(收稿日期:2008.4.5)
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