全 文 ：使小鼠出血量明显增加;这些结果侧面也证明了 TGRP具有抗
血栓作用。 TGRP由茅莓提取制备 , 茅莓在全国各地分布 , 药源
广 , 值得开发。
参考文献
1　朱志华 ,张惠勤 ,袁永军.茅莓的药理研究.中国中药杂志 , 1990;15
(7)∶43
2　郑永玲 ,胡常林.茅莓提取物对局灶性脑缺血的实验研究.中医药
研究 , 2002;18(2)∶37
3　王继生 , 邱宗荫 , 夏永鹏.茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血的保护作
用.中国中药杂志 , 2006;32(2)∶141
4　王继生 , 邱宗荫 , 夏永鹏.茅莓提取物对大鼠局灶性脑缺血 /再灌注
后神经细胞凋亡及相关蛋白 Bcl-2、Bax表达的影响.中国药理学通报 ,
2006;23(2)∶ 224
5　董丽萍.长马西平对小鼠缺氧及脑缺血损害的影响.中国药理学通
报, 1994;15(3)∶ 257
松潘乌头总碱的镇痛作用
刘铭佩
(兰州大学第二医院药剂科 ,兰州 　730030)
　　摘　要 　目的:研究松潘乌头总碱(TAS)的镇痛作用机制。方法:采用小鼠热板法和大鼠甩尾法测定动物的痛阈 ,同时检测
乙酸致痛小鼠脑组织 NO、MDA含量及 SOD活性。结果:icvTAS0.025mg/kg能明显提高小鼠 、大鼠的痛阈;TAS能使乙酸致痛小鼠
脑组织 NO、MDA含量明显降低 , SOD活性明显增强;CaCl2能拮抗 TAS的镇痛作用 , Ver则使之增强。结论:TAS的镇痛作用部位可
能在中枢神经系统 , 其作用机制可能与影响 Ca2+内流和减少 NO、MDA含量 , 提高 SOD活性有关。
　　关键词　松潘乌头总碱;镇痛作用;Ca2+内流;NO;MDA;SOD
　　松潘乌头(AconitumsungpanenseHand-Mazz)分布于甘肃南
部 、四川北部 、青海省 , 民间用于治疗跌打损伤 、风湿 、类风湿性
关节炎等引起的疼痛 。其主要化学成分为多种生物碱 , 且以二
萜生物碱为主 [ 1]其总生物碱具有良好的镇痛作用 , 且无耐受性
和身体依耐性 [ 2] 。本文对总生物碱的镇痛作用机制进行了探
讨。
1　材料与方法
1.1　试验药物　松潘乌头采自甘肃定西 ,其总生物碱(totalal-
kaloidsofaconitumsungpanenseHand-Mazz, TAS)由兰州大学药
学院药物分析教研室提供 ,含量 1.14%。
1.2　动物　昆明种小鼠 ,体重 20.0 ±2.0g(合格证号:医动学
第 14-005);Wistar大鼠 , 体重 180.0±20.0g(合格证号:医动字
第 14-006),由兰州大学实验动物中心供应 。
1.3 　试剂　维拉帕米(verapamil, ver)为连云港制药厂生产 , 批
号:20020615;氯化钙(CaCl2)为天津市塘沽邓中化工厂生产 ,批
号 20011210。一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛
(MDA)试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。
2 　方法与结果
2.1 　 icvTAS对小鼠痛阈的影响 [ 3]　给药前先测定小鼠的痛
阈 , 热板温度为 55℃±0.5℃, 室温为 17℃±1℃, 以小鼠舔后足
为疼痛反应 , 以痛反应的潜伏期为痛阈指标 , 挑选痛阈在 10 ～
24s者供实验用 ,给药后痛阈超过 60s者以 60s计。 取痛阈值合
格的♀小鼠 20只 , 随机分为 2组 , 分别 icv生理盐水 10μl和
TAS0.025mg/kg,给药后 15min测定小鼠痛阈。结果给药前对
照组 、TAS组小鼠痛阈(s)分别为:17.56±3.74、17.58 ±3.86;
给药后分别为:17.54±3.63、33.49±8.71(P<0.01),表明 icv-
TAS使小鼠痛阈显著提高。
2.2 　icvTAS对大鼠痛阈的影响 [ 4] 　给药前先测定大鼠的痛
阈 ,以 55℃±1℃恒温水浴为致痛源 ,大鼠固定后将其尾尖部以
上约 5cm放入热水中 , 记录大鼠尾部入水到缩离水面的时间;
间隔 3min, 连测 2次。 挑选缩尾反应在 2 ～ 6s以内的大鼠 20
只 , ♀、♂各半 , 随机分为 2组 , 分别 icv生理盐水 20μl和 TAS
0.025mg/kg,给药后 15min测定痛阈。结果给药前对照组 、TAS
组大鼠痛阈(s)分别为 3.15±1.72、3.54 ±1.77;给药后分别为
3.53±1.74、8.33±1.91, (P<0.01), 说明 icvTAS使大鼠痛阈
显著提高。
2.3　TAS对乙酸致痛小鼠脑组织 NO含量的影响 　小鼠ip0.
70%乙酸 10ml/kg, 选择 10min内出现扭体反应的小鼠 30只 ,
♀、♂各半 , 随机分为 3组 , 一组为乙酸致痛模型组 sc等容量生
理盐水;2、 3组为给药组 , scTAS0.5mg/kg、0.25mg/kg,给药后
15min,将小鼠快速断头处死 , 取出脑组织 , 放在预冷(4℃)的生
理盐水中将血液冲洗干净 ,滤纸吸干后 , 称重 , 并用预冷(4℃)
的生理盐水制成 10%的脑匀浆 ,按试剂盒方法测定 NO含量 , 蛋
白定量测定采用双缩脲法。另取 10只小鼠♀、♂各半 , ip、sc等
容量生理盐水作为正常对照组 , 同法测定其脑组织 NO含量。
由表 1结果可知 , 乙酸致痛小鼠模型组脑组织 NO含量明显升
高 , TAS使升高的 NO含量显著降低。
2.4 　TAS对乙酸致痛小鼠脑组织 SOD活性和 MDA含量的影
响 　小鼠分组及给药同法进行 , 按试剂盒方法测定 SOD活性
和 MDA含量 ,从表 1结果可以看出 , 乙酸致痛小鼠脑组织 SOD
活性明显降低 , MDA含量明显增加 , 而 TAS使上述两指标的异
常改变显著 ,恢复接近正常水平。
36 中药药理与临床 2007;23(1)DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2007.01.019
　　表 1　TAS对乙酸致痛小鼠脑组织 NO含量 、SOD活性及 MDA含
量的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
NO含量
(μmol/gpro)
SOD
(U/mgpro)
MDA
(nmol/ml)
正常对照 2.37±0.68＊＊ 4.45±0.86＊＊ 2.13±0.27＊＊
乙酸模型 5.22±0.91 1.76±0.85 3.15±0.25
TAS　　 0.5 2.59±0.74＊＊ 3.37±0.83＊＊ 2.19±0.23＊＊
TAS　　 0.25 3.61±0.63＊＊ 2.72±0.71＊＊ 2.25±0.22＊＊
　　与模型组比较＊P<0.05, ＊＊ P<0.01(下同)
2.5　CaCl2和 ver对 TAS镇痛作用的影响 　采用小鼠热板法 ,
选取基础痛阈在 10 ～ 24s的♀小鼠 40只 , 随机分为 4组:1组 ip
等容量生理盐水 , 2、3、 4组 ipTAS0.5mg/kg;15min后 , 2组 icv-
CaCl2 5.0mg/kg, 3组 icvVer0.3mg/kg(预试验中所用 CaCl2、
Ver剂量对小鼠痛阈无明显影响), 1、 4组 icv生理盐水。待
15min后再测小鼠痛阈 。 TAS能明显延长小鼠舔后足潜伏期 ,
提高其痛阈 , 对 TAS这一镇痛作用 , CaCl2使之减弱 , 而 ver使之
明显增强 , 结果见表 2。
　　表 2　CaCl2和 Ver对 TAS镇痛作用的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
痛阈(S)
给药前 给药后
正常对照 17.45±3.51 17.49±3.55
TAS 0.5 17.42±3.48 35.96±8.38＊＊
TAS+CaCl2 0.5+5.0 17.43±3.46 24.12±5.67■■
TAS+Ver 0.5+0.3 17.44±3.52 44.33±8.91＊＊■
　　与对照组比较 ＊＊P<0.01,与 TAS组比较 ■P<0.05, ■■ P<
0.01
3　讨论
　　文献 [ 2]报道 TASig、ip、sc给药均能显著抑制小鼠热板反
应 、扭体反应 、嘶叫反应 、提高动物的痛阈 , ip、sc0.5、0.25mg/kg
在给药后 15min起效 ,维持 1.5h以上。本研究结果表明:大鼠 、
小鼠 icvTAS1/10的全身有效量(0.025mg/kg)能在给药后
15min起效 ,达到 ip、sc全身给药 15min的镇痛强度 , 提示 TAS
镇痛作用部位可能在中枢神经系统。
有关 NO在疼痛调节中的作用已有报道 [ 3];临床研究也显
示 [ 4]疼痛病人脑脊液中 NO的含量明显升高。本实验中乙酸致
痛小鼠脑组织 NO含量增高 , 而 TAS可使明显降低 , 提示 TAS
镇痛作用可能与 NO有关。神经细胞中 NO合成酶系一种 Ca2+
依赖性的结构酶 ,细胞内 Ca2+浓度升高 , 可促进 NO的合成。本
研究结果表明 , TAS镇痛作用可被 CaCl2所拮抗 ,而被 ver增强 ,
提示 TAS可能通过影响 Ca2+内流 ,进而减少 NO的生成而产生
其中枢镇痛作用。
王洁等报道 [ 5] , 氧自由基在外周和中枢均有致痛作用 , 自
由基清除剂维生素 E和 SOD则可对抗此致痛作用;阿斯匹林 、
吲哚美辛对酒石酸锑钾致痛小鼠体内的氧自由基有清除作用。
从本研究中观察到 , 乙酸致痛小鼠脑组织中 SOD活性降低 ,
MDA含量升高 , 而 TAS使 SOD活力 , MDA含量异常改变得以
恢复 ,提示 TAS的中枢镇痛作用可能与清除自由基有关。有资
料显示 [ 7] , 细胞内 Ca2+浓度增加可使 SOD活力明显降低 ,从而
促使氧自由基生成 ,据此可以推测 TAS清除自由基的作用可能
与其上述对细胞内 Ca2+的影响有关。至于 TAS的镇痛作用有
无外周因素参于有待研究。
参考文献
1　李洪刚 , 李广义.松潘乌头二萜生物碱的研究 ,药学学报 , 1988;23∶
461～ 463
2　党月兰 ,胡兆勇 ,吴福祥.松潘乌头总碱的镇痛作用和身体依赖性的
实验研究 ,中国药物依赖性通报 , 1993;2(4)∶242～ 246
3　王百忍 ,赵经伟.一氧化氮与疼痛神经中调节作用 ,神经解剖学杂志 ,
1995;11(1)∶ 69 ～ 74
4　SamuelsonH, WennmalinH, HanderT.Nitricoxideandcentralpain
transnissionasevaluatedbyCSFnitriteconcentrationsinpainpatients.Ab-
stractof7thWorldCongressonPainScatle.IASP, 1993;275(1)∶1
5　王洁 , 宋必卫 ,马传庚 , 等.氧自由基与疼痛 ,中国药理学通报 , 1998;
14⑵∶ 107 ～ 109
StudiesonthemechanismofanalgesicactionoftatalalkaloidsofAconitumsungpanenseHand-Mazz.
LiuMingpei
(TheSecondHospitalofLanzhouCollege, Lanzhou　730030)
　　Objective:TostudythemechanismofanalgesicactionoftotalalkaloidsofAconitumsungpanenseHand-Mazz(TAS).Methods:The
painthresholdinmiceandratswasdeterminedbyusinganalgesicassaysofhotplateinmiceandtailflickinginrats.Todeterminethenitric
oxide(NO), themalondialdehyde(MDA)contemts, superoxidedismutase(SOD)activityinthebraintissueofaceticacidwrithingmouse.Re-
sults:ThepainthresholdofmiceandratswaselevatedaftericvTASinadoseof1/10systemicefectivedose(0.025mg/kg).TAS(0.5, 0.
25mg/kg, sc)couldobviouslyloweredcontentsofNOandMDA, andincreasedSODactivityinthebraintissueofaceticacidwrithingmouse.
TheanalgesicactionofTAScouldbeantagenizedbyCaCl2 andenhancedbyverapamil.Conclusion:ThesiteofanalgesicactionofTASmay
beinthecentralnervoussystem.ItsmechanismofanalgesicactionarerelatetoitsinfluenceonthetransmembraceinfluxofCa2+andreduc-
ingtheoutputNOandremovingfreeradicals.
　　Keywords　totalalkaloidsofAconitumsungpanenseHand-Mazz.;analgesicaction;Ca2+influx;nitrcoxide(NO);superoxidedis-
mutase(SOD);malondialdehyde(MDA).
37中药药理与临床 2007;23(1)