全 文 ：湖北百合的组织培养技术研究
孟杨1 , 潘佑找2＊ , 贾姗姗2 , 刘丹洲1
　(1.长江大学信息与数学学院 ,湖北荆州 434023;2.长江大学园艺园林学院 ,湖北荆州 434025)
摘要　湖北百合鳞片不同部位均可诱导出芽 ,其分化能力从强到弱依次为外层、中层、内层。0.8 cm×0.8 cm外植体的诱导率和污染率
均高于 0.5 cm×0.5cm外植体。最佳芽诱导培养基是MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.5mg/L ,其诱导率可达 100%;最佳芽增殖培养基是MS
+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5mg/L,相同浓度的NAA较 2, 4-D更有利于芽的增殖;最佳生根诱导培养基为 1/2MS+NAA 0.2 mg/ L,含NAA
的培养基诱导出的根短而粗壮 ,含 IAA的培养基诱导出的根长且细 ,说明NAA诱导生根的效果要好于 IAA。
关键词　湖北百合;鳞片;组织培养
中图分类号　Q943.1　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2006)17-4247-02
Study on the Technique of Tissue Culture of Henryi L.
MENGYang et al　(College of Informatics &Mathematics , Yangtze University , Jingzhou , Hubei 434023)
Abstract　 The bulblet of lilies can be induced from the different parts of Henryi L., of which the ability from strong to weak is from the outer scales , the
middle scales to the inner scales.The inducing rate and polluting rate of the 0.8 cm×0.8 cm in its size were higher than the 0.5 cm×0.5 cm.The best
induction medium for scale culturewas MS+6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.5 mg/L, of which the inducing rate was 100%.The best proliferation medium of
shoots was MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L and compared with 2 ,4-D , the same concentration of NAA was more advantageous to the proliferation
of bud.The best induction medium for roots was 1/ 2MS+NAA 0.2 mg/L and the roots which were induced from the medium with NAA were short and
robust;the roots which were induced from the medium with IAAwere long, thin and week.We can see that NAA was better than IAA for rooting.
Key words　Henryi L.;Bud scale;Tissue culture
　　湖北百合(Lilium henryi Baker)为多年生草本 ,以其吉祥
美满寓意 ,加上花姿雅致 、色泽鲜艳 、气味芳香 ,深受人民喜
爱 ,成为近年迅速发展的高档花卉。但由于近年来人们的过
度利用及环境污染 ,湖北百合数量急剧下降 ,品质也有所降
低。利用组织培养技术对百合其他种类[ 1-4]进行繁殖 ,可人
为控制培养条件 ,生长快 ,生长周期短 ,用材少 ,培养效果好。
但有关湖北百合组织培养技术的研究尚未见报道。
1　材料与方法
1.1　材料　湖北百合于 2005年 4月采自湖北省长阳县乐园
乡野外 ,保湿带回长江大学后 ,立即定植于长江大学植物园。
1.2　方法　取湖北百合鳞茎 ,选无病斑的鳞片 ,在洗涤剂溶
液中用刷将材料上的泥土刷净。流水冲洗 10h后 ,在超净工
作台上用 75%乙醇消毒 35 s ,0.1%升汞溶液消毒10min ,最后
用无菌水冲洗 6次。将消毒好的鳞片按外层 、中层 、内层分
别横切成 0.5 cm×0.5 cm和 0.8cm×0.8cm的方块。
1.3　培养基及培养条件　以MS 为基本培养基 ,均加入
2.5%蔗糖 , pH 值为 5.8 ,培养基均用 0.9%的琼脂固化 。在
1.2 kg/cm2 压力下灭菌 20 min。培养温度(25±2)℃,光照
2000～ 10000 lx ,日照时间 12～ 16 h/d。
2　结果与分析
2.1　不同部位及大小的外植体对芽诱导的影响　将鳞片按
外层 、中层 、内层分别切成 0.5 cm×0.5 cm和 0.8 cm×0.8 cm
的方块 ,接入诱导培养基MS +1.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L
NAA中 ,结果见表 1 。
　　表 1 不同部位及大小的外植体对芽诱导的影响
外植体大小
cm×cm 部位
外植体块
数∥个
分化出芽的
鳞片块数∥个
诱导率
%
分化芽
数∥个
总分化
率∥%
污染数
个
污染率
%
0.5×0.5 外 20 20 　　100 75 80.0 2 　　　5
中 20 16 80 45 0
内 20 12 60 21 0
0.8×0.8 外 20 20 100 83 81.7 4 8.3
中 20 17 90 57 1
内 20 12 65 25 0
　　由表 1可以看出 ,在相同芽诱导培养条件下 ,不同部位
鳞片的芽诱导率不同 ,鳞片分化能力从强到弱依次为外层 、
中层 、内层;体积较大的外植体的芽诱导分化率和污染率均
高于体积较小的外植体。从保证诱导率和减少污染率的角
度来看 ,应选择 0.5 cm×0.5 cm的外层鳞片作为外植体。
2.2　不同芽诱导分化培养基对鳞片产生芽的影响　在诱导
分化培养基上接种 0.5 cm×0.5 cm的外层鳞片 ,培养 6 d后
鳞片后开始增厚变绿;10 d鳞片基部边缘出现黄绿色愈伤组
基金项目　长江大学科技发展基金资助项目。
作者简介　孟杨(1983-),男 ,湖北德州人 ,本科生 ,专业:信息与数学。
＊通讯作者 ,硕士,副教授 ,E-mail:panyouzhao@163.com。
收稿日期　2006-07-22
织 ,并不断增大 ,逐渐形成颗粒状突起;23 d后 ,圆形突起形
成小鳞茎或芽苗 。由表 2可知 , 6种培养基均可诱导出芽 ,以
初Ⅲ和初Ⅵ培养基诱导率最高。从诱导率看 ,培养基初Ⅲ和
初Ⅵ所诱导的芽苗数目远远多于初 Ⅰ和初 Ⅱ,故认为最适诱
导分化培养基为初Ⅲ。
2.3　不同芽增殖培养基对芽增殖的影响　待初代培养的芽
长到 2.0 ～ 4.0 cm 时 ,将其分为单株 ,移入表 3所列培养基
中 , 13d后芽基部开始出现新生小芽 ,逐渐形成芽丛 ,30 d后
统计试验结果如表 3所示。由表 3可见 ,不同的培养基中 ,
芽的增殖情况不一样。在 6-BA浓度为 0.2mg/L不变的情况
下 ,NAA和 2 ,4-D的浓度在 0.05 ～ 0.5mg/L时 ,芽增殖率随
NAA和 2 , 4-D浓度的升高而升高 ,当NAA和 2 ,4-D的浓度超
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2006 , 34(17):4247-4248　　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　金琼琼　责任校对　金琼琼
过0.8mg/L时 ,芽的增殖率明显降低。可见 ,高浓度的NAA或
2 ,4-D都不利于芽的增殖。从表 3还可看出 ,在 6-BA浓度不变
的情况下 ,相同浓度的NAA较 2 , 4-D更有利于芽的增殖 ,且增
殖芽苗的质量也好。故认为最适芽增殖培养基为继Ⅲ。
　　表 2 不同芽诱导培养基对鳞片诱导分化的影响
培养
基号
激素组合∥mg/ L
6-BA NAA
接种鳞片
数∥块
分化鳞片
数∥块
分化率
%
每块分化鳞片
平均芽数∥个 生长状况
初Ⅰ 1.0 0.1 20 17 　　　85 2.5 较好 ,有根
初Ⅱ 1.0 0.3 20 18 90 3.2 好 ,无根
初Ⅲ 1.0 0.5 20 20 100 5.1 好 ,无根
初Ⅳ 0.1 1.0 20 11 55 2.3 差 ,无根
初Ⅴ 0.3 1.0 20 13 65 2.8 较好 ,无根初Ⅵ 0.5 1.0 20 20 100 4.5 好 ,无根
　　表 3 不同芽增殖培养基对芽增殖的影响
培养
基号
激素组合∥mg/ L
BA NAA 2, 4-D
新生芽平
均数∥个
生长
状况
继Ⅰ 0.2 0.05 - 3.36 壮
继Ⅱ 0.2 0.20 - 3.12 壮
继Ⅲ 0.2 0.50 - 3.45 壮
继Ⅳ 0.2 0.80 - 1.93 弱
继Ⅴ 0.2 1.00 - 1.72 细弱
继Ⅵ 0.2 - 0.05 2.15 弱
继Ⅶ 0.2 - 0.20 3.09 壮
继Ⅷ 0.2 - 0.50 3.37 壮
继Ⅸ 0.2 - 0.80 1.61 细弱继Ⅹ 0.2 - 1.00 1.54 细弱
2.4　不同生根培养基对芽生根的影响　待增殖培养所得的
芽长至 4.0 cm左右时 ,分成单株 ,接入生根培养基中 ,观察调
节因子对生根的影响 。表 4表明 ,4种培养基均对根有 100%
　　表 4 不同生根培养基对芽生根的影响
培养
基号
激素组合
mg/L
生根
时间∥d
生根率
%
平均生根
数∥个 根的状况
生Ⅰ 1/ 2MS+IAA 0.2 25 100 4.2 无根毛 ,细弱
生Ⅱ 1/ 2MS+IAA 0.5 25 100 1.8 无根毛 ,细弱
生Ⅲ 1/ 2MS+NAA 0.2 17 100 6.3 粗壮 ,有根毛
生Ⅳ 1/ 2MS+NAA 0.5 18 100 2.7 壮,根毛少
诱导率。生Ⅲ培养基生根效果最好 ,其平均生根数达 6.3条 ,
且根粗壮有根毛 ,适于移栽;生 Ⅰ、生Ⅱ培养基生根效果次之 ,
其根细弱无根毛 ,移栽后不易成活。较高浓度的生长素不利
于根的诱导 , NAA诱导生根的时间较 IAA短 7.5 d左右 ,相
同浓度的NAA较 IAA更有利于根的诱导。
3　小结
(1)0.5 cm×0.5cm的外层鳞片是湖北百合初代培养的
最适外植体。
(2)最适初代培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L
NAA。初代培养过程中发现 ,在高 6-BA 、低 NAA 的培养基
上 ,可诱导出带根小鳞茎 ,达到一次性成苗 ,而在高NAA 、低
6-BA的培养基上 ,鳞片基部形成大量圆形突起 ,分化出大量
无根芽苗。这与周寒松[ 5] 在麝香百合的组织培养快速繁殖
中的结论不一致。
(3)最适芽增殖培养基为MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5
mg/L。含NAA的培养基诱导出的根短且粗壮 ,有根毛 ,移栽
后易成活;含 IAA的培养基诱导出的根长且细弱 ,无根毛 ,说
明NAA诱导生根的效果要好于 IAA。
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(上接第 4236页)
则低于对照 。而在这一时段内 ,2种植物体内活性氧含量急
剧上升 ,说明保护酶 SOD 、CAT 、POD虽然在一定程度上有效
清除了体内的活性氧 ,但随处理时间延长 , 2种植物体内活
性氧的产生和清除的动态平衡不能始终维持在良好水平。
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4248 　　　　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2006年