全 文 ：云南大学学报 (自然科学版) 　2001 , 23 (植物学专辑):111～ 112 CN 53-1045/N　ISSN 0258-7971
Journal of Yunnan University
紫斑百合的组织培养
李　标 , 胡琼华 , 何显静
(云南大学 生态遗传实验室 ,云南 昆明　650091)
摘要:以紫斑百全的鳞片作外植体 ,在 MS+6BA 1 mg·L -1+NAA 0.2 ～ 0.5 mg·L-1培养基上分化成苗 ,
在MS +6 BA1mg·L-1 +NAA0 .1 ～ 0 .2 mg·L-1培养基上增殖 , 增殖率可达4 ～ 5 .无根苗在MS +1 BA
1 mg·L-1培养基上迅速长根 ,生根率很高.
关键词:紫斑百合;鳞片;组织培养
中图分类号:Q 949.718.23
1　材料及培养条件
紫斑百合(Li lium nepalense D.Don)鳞片.
以MS培养基为基本培养基.①诱导培养基:
MS+6BA 1 mg·L-1+NAA 0.2 ～ 0.5 mg·L-1.②
增殖培养基:MS +6BA 1mg·L-1 +NAA 0.1 ～
0.2 mg·L-1.③生根培养基:MS+IBA 1 mg·L-1.
以上培养基均含 w(蔗糖)=3%, w(琼脂)=
0.95%, pH5.8 ,培养温度(24±2)℃,光照度 1 500
lx ,光照 12 h·d-1.
2　生长和分化情况
2.1　鳞片的消毒和接种　选择直径为 1.5 ～ 2.5
cm 的无菌鳞茎 ,先用湿纱布轻轻擦洗表面 ,置水龙
头下冲洗干净 ,然后摘取其鳞瓣用洗衣粉洗后流水
冲洗干净 ,蒸馏水洗 2次.在超净工作台内用 φ=
75%的乙醇消毒 30 s ,再用 w =0.1%的升汞消毒
7min ,无菌水洗 4次 ,用消毒滤纸吸干表面水分 ,
切取鳞片下半部约 2/3的切块(上部 1/3鳞瓣剪
掉),接种于诱导培养基上.
2.2　芽的诱导　接种 15 ～ 30 d 后 ,鳞片增厚愈伤
化并在鳞瓣基部出现绿褐色的愈伤组织 ,呈圆形突
起.再过 15 d后形成小鳞茎状的芽 ,芽的数量大多
为2个.也有的鳞瓣具有多个芽聚生在一起 ,形成
芽丛.再培养 20d后长出叶片 ,形成芽苗 ,叶片呈褐
绿色 ,较粗壮 ,且有的芽苗基部长出粗壮的根.
培养中 ,观察到在自然状况下生长的紫斑百合
大多带菌 ,且体内含有较多的酚类物质 ,外植体容
易褐化 ,因而诱导分化困难 ,甚至导致外植体坏死 ,
因此防止褐变是紫斑百合离体快繁中重要的问题.
2.3　增殖培养　将 2 ～ 5 cm 长的芽苗切下转接到
增殖培养基上.约 30 d左右 ,丛芽苗基部分化出 3
～ 5个小芽 ,形成芽丛 ,芽苗较粗壮.35 ～ 50 d继代
培养 1次.在继代培养中 ,尚可将较大的芽苗外部
的鳞叶从基部摘下 ,切去叶片上部 ,接种于诱导培
养基中约 35 d ,又可在鳞叶近轴面一边的基部分化
出小鳞茎 ,多的可达 4 ～ 5个.芽伸长 ,待绿色叶片
长出时 ,又可切下进行继代培养.
2.4　生根培养与移栽　将长约 3 ～ 4 cm 的无根苗
切下 ,接种到生根培养基上诱导生根.约 25 d ,95%
以上的无根芽苗具有长于 0.75 cm的粗壮根系 ,一
般 25 ～ 30 d时可进行移栽 ,移栽前需练苗 5 ～ 7 d.
将高 4 ～ 6 cm 的试管苗移出培养瓶外 ,洗净 ,
移栽于碎椰壳∶泥炭土(1∶1)的基质中 ,注意保温保
湿.移栽成活的关键是基质必须疏松透水 ,保证根
的呼吸 ,在弱光下适应 1 ～ 2 周后便可逐渐健壮生
长.
3　意义与进展
紫斑百合是百合科百合属的多年生球根植物 ,
花呈灯笼状 ,花瓣反卷 ,花色淡黄 ,喉部有紫斑.上
世纪初被引至国外后 ,被认为是一个奇异的种.目
前 ,紫斑百合各居群日益退化 ,病虫害严重 ,在各自
然分布点环境中 ,还受到放牧 、垦植 、采挖等人为活
动的影响 ,其自然生长繁殖已困难 ,面临濒危状况.
本文的组织培养技术 ,选用优良的紫斑百合鳞茎进
收稿日期:2001-05-22
　作者简介:李　标(1970-　),男 ,湖北人 ,硕士生,主要从事植物遗传与进化研究.
行扩大繁殖 ,在短期内可获得大量的芽苗 ,繁殖系
数较大 ,对种质资源的保护和大规模栽培利用提供
了新的可行途径.紫斑百合的组培快繁国内外尚未
见报道.
[参　考　文　献]
[ 1] 　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(14
卷)[ M] .北京:科学出版社 , 1980.
[ 2] 　王红霞 , 胡琼华 ,陈小兰.通江百合的组织培养[ J] .植
物生理学通讯 , 1999 , 36(2):132.
Tissue Culture of Lilium nepalense D.Don
LI Biao , HU Qiong-hua , HE Xian-jing
(Laboratory of Eco-genetics , Yunnan University , Kunming 650091 , China)
Abstract:The explants which are obtained from the cataphy lla of Li lium nepalense D.Don can directly
g row the shoo ts by dif ferentiation on the M S+6BA 1 mg/ L+NAA 0.2—0.5 mg/ L culture medium.On an-
other culture medium , the M S+6BA 1mg/L+NAA 0.1—0.2mg/L medium , they can propagate quickly and
the multiplicat ion rate will reach 4 —5.Meanwhile , the differential shoots w ill g row roo ts prompt ly on the MS
+IBA 1 mg/L medium .As anticipated , the radicant rate can reach a high level.
Key words:Li lium nepalense;bud scale;tissue culture
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Advanced in S tudying of Plant Hormone
CAI Chuan-jie , CHEN Shan-na
(Department of Biological Technology , Yunan University , Kunming 650091 , China)
Abstract:The recent advances in biosyntheses ,phy siological actions and act ion mechanisms of 5 types of
plant hormones and a new type of plant hormone brassinolide by molecular biology and genetics.
Key words:plant hormone;mutant;signal t ransduct ion;molecular biology
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A S tudy on Preserving the Pollen of Paeonia Delavayi
WANG Bin-yi , WANG Wei , DING Kai-yu
(Department of Biolog y , Yunnan University , Kunming 650091 , China)
Abstract:The ef fect of preservation temperature and humidity on the pollen vigor of Paeonia delavayi
Franch w as investigated on the mature pollen collected from f low ers in Shizishan Mudan Garden , Wuding
county Yunnan.It results in follow s:(1)Low temperature is beneficial to maintaining Pollen vigor;(2)If the
pollen is no t dried at normal temperature befo re preservation , it s vig or must be lost rapidly.(3)Drying the
pollen of P.delavayi and then preserving them at low temperature(-18℃)is an easy and effective method
to keep pollen vigor.It is useful for the art if icial pollinating of different flowers at different time , and provide
convinence fo r the breeding of Paeonia.
Key wards:Paeonia delavayi;pollen;vigo r
112 云南大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　　　　　　　第 23 卷