全 文 ：·论著·
HPLC法测定新疆芍药和窄叶
芍药根中芍药苷的含量
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马 英 高婷婷 谭 勇 田丽萍 魏 雯 王珊珊 王 恒
(石河子大学药学院，新疆石河子，832002)
【摘要】目的:测定并比较新疆芍药和窄叶芍药根中芍药苷的含量。方法:采用 HPLC，PLATISIL C18色谱柱(5
μm，250 × 4． 6 mm) ，流动相∶乙腈 － 0． 1%磷酸水溶液(17 ∶ 83) ，流速:1． 0 mL·min －1，柱温 30℃，检测波长 230 nm。
结果:窄叶芍药芍药苷的含量为 2． 56%，新疆芍药芍药苷的含量为 2． 45%。结论:窄叶芍药根中芍药苷含量较高，
为充分利用芍药植物资源提供参考依据。
【关键词】新疆芍药;窄叶芍药;芍药苷
中图分类号:Ｒ927． 12 文献标识码:A
芍药为毛茛科芍药属(Paeonia lactiflora Pall)的
一种常见传统中药，常以根部入药。我国约分布有
8 个种以及 6 个变种［1，2］，在新疆西北部阿尔泰及天
山山区主产有新疆芍药 (P． sinjiangensis K． Y． Pan)
和窄叶芍药(P． anomala L．)的两个种。现代药理
研究表明，芍药苷为芍药根中的主要活性成分，其具
有护肝、抗病毒及降压镇痛、清热解痉等作用［3 ～ 6］。
目前对新疆芍药和窄叶芍药中芍药苷研究鲜有报
道。本研究采用高效液相色谱法对新疆芍药和窄叶
芍药根中芍药苷的含量进行测定和比较，为新疆芍
药和窄叶芍药的内在质量评价及其资源的开发利用
提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 仪器与试剂 Water 2695 高效液相色谱仪;
KQ 3200 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司) ;Sartorius BP211D 十万分之一分析天平(北京赛
多利斯仪器系统有限公司)。甲醇、乙腈均为色谱
纯(SK Chemicals公司) ;水为重蒸去离子水。
1． 1． 2 对照品及供试药材 对照品:芍药苷(购自
成都曼思特生物科技有限公司，批号 MUST-
11081801)。药材:芍药样品采自于新疆塔城地区裕
民县，经石河子大学药学院李鹏副教授分别鉴定为
毛茛科新疆芍药(P． sinjiangensis K． Y． Pan)和窄叶
芍药(P． anomala L．)。
1． 2 方法
1． 2． 1 实验条件 色谱条件:PLATISIL C18色谱柱
(5μm，250 × 4． 6mm) ，流动相乙腈 － 0． 1%磷酸水溶
液(17:83) ，流速 1． 0mL·min －1，柱温 30℃，进样量
20μL，检测波长 230 nm。
1． 2． 2 供试溶液的配置与测定 (1)对照品溶液
的制备:精密称取芍药苷对照品 6． 30mg，置 10mL
容量瓶，加甲醇溶解，并稀释至刻度，制成每 1mL 含
63μg的芍药苷对照品溶液。(2)供试品溶液的制
备:分别精密称取两种芍药各 0． 10g，置 50mL 容量
瓶中，分别加甲醇 35mL 溶解，超声处理(功率
500W，频率 50HZ)30min，放冷至室温，再加甲醇定
容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，0． 45μm 微孔滤膜
即得供试品溶液。分别吸取上述溶液 20μL，注入液
相色谱仪中。此色谱条件下对照品溶液和供试品溶
液的色谱图见图 1。
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2013 年 10 月
第 35 卷 第 5 期
农 垦 医 学
Journal of Nongken Medicine
Oct． 2013
Vol． 35 No． 5
* 基金项目:国家自然科学基金(30860022) ;石河子大学“263”青年骨干教师项目(YX07011) ;石河子大学研究生精品
课程(2012yp-kc06)。
通讯作者:谭勇，博士，教授，硕士研究生导师，从事药用植物资源及天然产物化学研究。
1 －芍药苷;A ．对照品;B ．窄叶芍药;C ．新疆芍药
图 1 芍药苷 HPLC色谱图
2 结果
2． 1 样品含量测定［6］
精密称取芍药样品各 0． 1g，按上述方法制备供
试品溶液，在“1． 2”项下色谱条件进样分析，测定峰
面积，根据标准曲线计算样品中的芍药苷。每批样
品测定 3 份，以 3 次测定结果的平均值作为测定值，
结果见表 1。
表 1 窄叶芍药和新疆芍药根中芍药苷的含量(n = 3)
样品 芍药苷含量(%) ＲSD(%)
窄叶芍药 2． 56% 1． 09
新疆芍药 2． 45% 0． 83
2． 2 线性关系的考察
精密吸取芍药苷对照品溶液 5μL、10μL、15μL、
20μL、25μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图和峰
面积。以各成峰面积(Y)为纵坐标，质量浓度(X)
为横坐标，绘制标准曲线，计算得到芍药苷线性回归
方程 Y =1490755X +23963，Ｒ2 = 0． 9998。结果表明
芍药苷在 0． 315 ～ 1． 575μg /mL呈现良好的线性。
2． 3 重复性试验
分别精密称取窄叶芍药和新疆芍药样品粉末各
6 份，按供试品的制备方法各制备 6 份供试品溶液，
分别进样 15μL，测定峰面积，计算器质量分数。结
果窄叶芍药和新疆芍药苷峰面积的 ＲSD 分别为 0．
72%、0． 75%，表明该方法的重复性良好。
2． 4 稳定性试验
取同一芍药供试品溶液分别在 0、1、2、4、8、12、
24h进样(不测时将供试品置于冰箱 4℃冷藏) ，测
定芍药苷峰面积。结果显示，供试品在 24h 内稳定
性较好，窄叶芍药和新疆芍药苷峰面积的 ＲSD分别
为 0． 81%、0． 82%。
2． 5 精密度试验
精密吸取同一芍药苷供试品溶液，重复进样 6
次，每次进样量 15μL，按“1． 2”项色谱条件进行测
定，测定窄叶芍药和新疆芍药苷峰面积的 ＲSD分别
为 0． 68%、0． 69%，表明仪器精密度良好。
2． 6 加样回收率试验
分别精密称取窄叶芍药 6 份已知含量的同一供
试品约 10mg，分别添加芍药苷对照品约 1． 0mg，在
“1． 2”项色谱条件下进样分析，结果测得窄叶芍药
中芍药苷的加样平均回收率为 99． 2%，ＲSD 为 1．
2%。结果见表 2。
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表 2 加样回收率试验结果
称样量(g) 含量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均值(%) ＲSD(%)
0． 1011 1． 265 1． 001 2． 245 97． 9
0． 1016 1． 575 1． 004 2． 576 99． 7
0． 1048 1． 724 1． 003 2． 738 101． 1
0． 1042 1． 722 1． 002 2． 720 99． 6
0． 1010 1． 250 1． 005 2． 233 97． 8
0． 1005 1． 197 1． 002 2． 192 99． 3
99． 2 1． 2
3 讨论
3． 1 提取溶剂选取
预实验采用甲醇、75%甲醇和 75%乙醇溶液分
别提取两种芍药根，并做了比较，3 种溶剂均能提取
到芍药苷，但是纯甲醇溶液提取得到芍药苷含量较
高，故采用纯甲醇作为提取溶剂。
3． 2 流动相选取
首先采用《中国药典》测定赤芍中芍药苷的流
动相甲醇 － 0． 05mol /L 磷酸二氢钾溶液水溶(40:
65) ，发现峰形不好。进过多次配比和选择流动相，
最终决定采用乙腈 － 0． 1%磷酸水溶(17:83)为流
动相，结果显示:分离效果好。
3． 3 两种芍药根中芍药苷含量比较
实验结果表明，窄叶芍药根中芍药苷的含量为
2． 56%，新疆芍药为 2． 45%，其芍药苷含量都达到
2010 年版《中国药典》的要求［6］，并且前者含量不同
于后者。两者之间的差异可能与其生长的气候及植
物的遗传和变异因素有关。该方法操作简便，精密
度好，准确可靠，可以作为新疆芍药和窄叶芍药质量
控制的科学依据之一，并且为充分利用窄叶芍药提
供参考依据。
参考文献:
［1］ 潘开玉．毛茛科芍药亚科芍药属．中国植物志［M］．北京:中国
科学出版社，1979，37 ～ 59
［2］ 郭先锋．中国芍药的分类学研究进展［J］．北京林业大学学报，
2002，24(3) :99 ～ 102
［3］ 难波恒雄．生药的资源，化学，代谢［J］．国外医学(中医中药分
册) ，1988，10(5) :291 ～ 292
［4］ 肖尚喜，张咏南，史百芬．白芍总苷促干扰素诱生及抗病毒作
用的研究［J］．中国药理学通报，1993，9(l) :58 ～ 60
［5］ Bohlmmar J，Meyer Guaen G，Croetua Ｒ． Pinatter Penoid synthas-
es:molecular biology and phylogenetic analysis［J］． Proc Natl Aead
Sci USA，1998，95(8) :4126
［6］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［S］． 一部． 北京:中国
医药科技出版社，2010，147
［收稿日期:2013 － 10 － 15］
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第 35 卷 第 5 期
农 垦 医 学
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Oct． 2013
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