全 文 ：新疆芍药色谱图谱分析及芍药苷的含量测定
新疆医科大学中医学院(830054)　　田树革■
新疆医科大学附属中医院(830000)　刘　庆
提　要:目的:对新疆芍药及块根芍药进行色谱指纹图谱的比较和所含芍药苷的测定。方法:柱子:Zirchrom C18 4.6mm ×
25cm 5μm;流动相:甲醇:0.05mol/ L 磷酸二氢钾溶液(40:75);流速:1.0ml/min;检测波长:230nm;柱温:30℃。结果:该方法
的线性范围为0.94μg～ 6.58μg , 平均回收率为 99.3%(RSD=1.65%n=5)。结论:本测定方法为新疆芍药与块根芍药的区分
和药材质量评价提供可靠依据 ,方法简便 , 易操作 ,重复性好。
关键词:新疆芍药;块根芍药;芍药苷;高效液相色谱法
中图分类号:R291.5　文献标识码:B　文章编号:1006—6810(2003)04—0032—02
　　赤芍是一种常见的中药 , 为毛莨科多年生草本植物芍
药 PAEONIA LACTIFLORA PALL 或川赤芍 PAEONIA
VEITCHIR LYNCH 的干燥根〔1〕。新疆药用赤芍的原植物
主要为新疆芍药 paeonia sinjiangensis K.Y.Pan.和块根芍药
paeonia anomalaL.的根 , 药材名均为赤芍。性微寒 , 味苦;均
具有活血散瘀止痛 ,清热凉血解毒的功效。两者分布较广 ,
资源丰富 ,都为野生 , 新疆芍药疆内大量收购 , 中医作赤芍
用 ,少用或不用块根芍药 , 维吾尔医以块根芍药入药 , 两者之
间的质量评价标准十分欠缺〔2〕。
芍药根主含芍药甙 PAEONlFLORIN3.5%～ 8%。含微
量芍药内酯甙 ALBIFLORIN , 羟基芍药甙及苯甲酰芍药甙
BENZOYLPAEONIFLORIN , 芍药精(D-儿茶精), 赤芍甲
素 ,赤芍乙素 , 还含苯甲酸约 1%, 鞣质约 12%, 并含葡萄糖
甙 ,蔗糖 , 棕榈酸 ,最新报道含有芍药新甙〔3〕。 我们利用高效
液相法对新疆芍药与块根芍药色谱图进行实验比较并测定
主成分芍药苷的含量 ,现报道如下。
(A)新疆芍药(1)、块根芍药(2)、芍药苷(3)
图 1　新疆芍药(B)与块根芍药(C)的 HPLC色谱图谱比较
1　仪器与试剂
1.1　岛津 LC-10ATvp高效液相色谱仪 , SPD—10Avp 型二
■为 2001 年新疆维吾尔自治区卫生厅青年科技人才专项基
金 ,编号新卫科字(2001)15 号
极管阵列检测器 , 工作站 , CLASS VP 色谱工作站;KQ —
400DB 型数控超声波清洗器(昆山市超仪器有限公司),电子
天平(sar torius 德国产), 芍药苷对照品(中国药品制品检定
所:0736-200117), 甲醇:色谱纯;水:超纯水;其他试剂均为
分析纯。药材:新疆芍药 、块根芍药(由新疆参茸药业提供 ,
32　　　　　 　　　　　　　　中国民族医药杂志　　　　　　　　　　2003年 9月(第 10卷)第 4期
DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2003.04.030
经石春新主管药师鉴定)。
2　实验部分
2.1　新疆芍药与块根芍药的色谱图比较
2.1.1　供试品溶液的制备:分别取新疆芍药与块根芍药各
100mg , 精密称定 ,置 20ml容量瓶中 ,加甲醇适量 , 超声 30 分
钟 ,放冷 , 加甲醇至刻度 ,摇匀 , 0.45μm 微孔滤膜滤过 , 即得。
2.1.2　对照品溶液的制备:精密称取芍药苷适量 , 精密称
定 ,加甲醇制成 0.47mg/ ml的溶液 , 作为对照品溶液。
2.1.3　色谱条件:色谱柱:ZIRCHROM C18 4.6mm ×25cm
5μm;流动相:A 相:甲醇;B 相:0.05mol/ L 磷酸二氢钾溶液;
流速:1.0ml/ min;检测波长:230nm;柱温:30℃;分析时间:60
分钟。得新疆芍药 、块根芍药 、芍药苷色谱图谱 ,结果见图 1
(A、B、C)。
2.2　芍药苷的含量测定
表 1　新疆芍药与块根芍药中芍药苷测定结果　(n=3)
样品 样品积分面积 样品中芍药苷含量(%)
平均 RSD
%
新疆芍药 1761792 1780990 1763755 2.23 1.13
块根芍药 1428115 1440935 1414433 1.8 0.88
2.2.1　色谱条件:色谱柱:ZIRCHROM C18 4.6mm×250mm
5μm;流动相:A 相:甲醇;B 相:0.05mol/ L 磷酸二氢钾溶液;
流速:1.0ml/min;检测波长:230nm;柱温:30℃;分析时间:
30 分钟。
2.2.2　线性试验:精密吸取上述对照品溶液 2 , 4 , 6 , 8 , 10 ,
12 , 14μl进样 , 并以对照品的量(X)为横坐标 , 峰面积为纵坐
标(Y)进行线性回归 ,得回归方程 Y=1593614X-10074 , r=
0.9999。结果表明 , 芍药苷在 0.94μg ～ 6.58μg 与其色谱峰
面积呈良好的线性关系。
2.2.3　稳定性试验:取同一对照品溶液与供试品溶液 , 4 小
时内每隔 1 小时进样 1 次 ,连续进样 5 次 , 每次 10μl , 在 4 小
时内对照品溶液测得峰面积积分值 RSD=0.81%(n=5), 供
试品溶液测得峰面积积分值 RSD=1.14%(n=5), 试验结果
表明 4 小时内较稳定。
2.2.4　精密度试验:精密吸取对照品溶液 , 连续进样 5 次 ,
每次 10μl , 测得峰面积积分值基本一致 , RSD=1.6%, 表明
精密度良好。
2.2.5　回收率试验:称取已知含量的新疆赤芍 5 份 ,分别精
密加入一定量的芍药苷对照品(样品减半加对照品), 按供试
品的制备与测定方法 ,在上述色谱条件下 , 进行含量测定 , 测
得积分面积数据为 1694050、1638757、1613983 、1643039、
1681733 ,计算回收率 , 结果得 99.8%、99.1%、98.7%、99.
3%、99.6%, 得平均回收率为 99.3%, RSD=1.65%。
2.2.6　样品测定:按 2.2.1 项下所述条件与方法测定供试
样品 ,每次 10μl , 得积分面积值 , 带入回归方程 , 测定结果见
表 1。
3　讨　论
3.1　从新疆芍药与块根芍药的色谱图谱初步考察发现 , 二
者的组分基本一致 , 但组分从同浓度条件下积分面积上考
虑 ,其相对含量有明显差异 , 同时考察了多种流动相 , 甲醇:
0.05mol/ L 磷酸二氢钾溶液(40:75)为最佳条件。通过文献
查阅 ,芍药苷的含量测定有多种方法 , HPLC 法测定为使用
频率最高 ,效价比最为理想的方法〔4〕。
3.2　从芍药苷的含量上考察 , 新疆芍药与块根芍药都可达
到中国药典的要求 , 但从整体药效考虑 , 需要做与药典规定
品种的对比实验 ,应对新疆芍药与块根芍药的物质基础与药
效学作全面的分析研究。
参考文献
〔1〕中药药典〔S〕.2000 年版一部　北京:化学工业出版社 ,
2000.125.
〔2〕中国科学院新疆生物土壤研究所编.新疆药用植物志
〔M〕.第三册.新疆人民出版社 , 1984.14-15.
〔3〕维吾尔药材标准〔S〕.上册.新疆科技卫生出版社 , 1993.
125.
〔4〕任建生 , 等.芍药甙在复方中的定量分析研究进展〔J〕.时
珍国医国药 , 2001 , 12(8), 747.
2003 年 4 月 23 日收稿
HPLC Fingerprints Identification and Determination of Paeoniflorin
in the Paeonia sinjiangensis K.Y.Pan and the Paeonia anomala L.
TCM College , Xingliang Medical University 8300554　Tian Shuge
Affiliated Hospitol of Tom College , Xingjiang Medical University 83000　Liu Qing
Abstracts:objective:The method w as established to identify HPLC fingerprint and determination of Paeoniflo rin.Methods:Zirchrom
C18(4.6mm×250mm 5μm)was packed in the analy tical column.The mobile phase consisted of CH3OH:KH2PO4 solution(40:75).
The flowing rate was 1.0ml/ min , the co lumn temperature at 30℃ and the detective wavelength 230nm.Results:the linear concentra-
tio n ranges of this compound was 0.94μg-6.58μg , the average recoveries w as 99.3%(RSD%=1.65% n=5).Conclution:this
method could be used for the quality ev aluation o f the Paeonia siniiangensis K.Y.Pan and the Paeonia anomala L.
Key words:paeonia sinjiangensis K.Y.Pan;paeonia anomala L.;HPLC;
332003年 9月(第 12卷)第 4期　　　　　　　　　　中国民族医药杂志