全 文 ：收稿日期：2010－06－02
基金项目：广西农业科学院科技发展基金项目（200901）
作者简介：庾韦花（1977-），女，广西永福人，硕士，助理研究员，主要从事生物技术育种研究工作。
牛尾菜（Smilax riparia A． DC）属于百合科菝葜
属多年生草质藤本植物，雌雄异株，根茎可以入药，
对风湿性关节炎、气虚浮肿、偏瘫及骨结核等疾病
有明显的治疗效果。牛尾菜在全国大部分地区都有
分布，但分布类型存在差异；在广西主要分布在河
池、百色、桂林、崇左等地，当地农民又称其为白须
公、牛尾蕨，其嫩茎味美、营养丰富，是一种很受欢
迎的无污染野生蔬菜，同时也是值得进一步筛选的
抗癌植物种类之一［1］。 目前，牛尾菜的野生资源越
来越少，通过采挖其野生材料进行分株繁殖已不能
满足市场需求。 在避免对自然资源的过度采挖、破
坏生态环境的前提下， 采用组织培养技术快速、大
量繁殖各种花卉、药用植物种苗，可满足规模化生
产的需求［2～6］。 近年来，邵美妮等［7］采用牛尾菜幼嫩
茎段为外植体进行组织培养，而以顶芽为外植体诱
导丛生芽未见报道。本研究以广西野生牛尾菜顶芽
为外植体，进行组织培养及再生体系研究，以期为
牛尾菜产业化生产及人工栽培奠定基础。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
供试野生牛尾菜采自广西百色，保存于广西农
科院生物技术研究所资源圃。
1． 2 试验方法
牛尾菜丛生芽诱导及再生体系研究
庾韦花，蒙 平，张向军，潘颖南，陈少珍，黄素梅，唐 军
（广西农业科学院生物技术研究所，南宁 530007）
摘要：以牛尾菜顶芽为外植体，探讨不同浓度6－BA（0．5～5．0 mg/L）和NAA（0．1～1．0 mg/L）配比对丛生芽诱导、增殖
和生根的影响。结果表明，适宜丛生芽诱导的培养基为MS＋6－BA 2．0 mg/L＋ NAA 0．2 mg/L ＋0．3％ AC，丛生芽萌动早、
无褐化，诱导率为75.0％；丛生芽增殖最佳培养基为MS＋6－BA 0．5 mg/L＋NAA 0．1 mg/L，增殖系数为4．2；生根最佳培养
基为1/2MS＋NAA 1．0 mg/L，生根率为87.0％，根较粗壮，生根数4～7条，根平均长度为1．2 cm；在混合基质营养土、木屑、
黄泥（1∶1∶2）中，幼苗移栽成活率达80.0％以上。
关键词：牛尾菜；顶芽；丛生芽；诱导；增殖；生根；移栽
中图分类号：Q949.95 文献标识码：A 文章编号：1002－8161（2010）07－0646－03
Cluster buds induction and its regeneration system in
Smilax riparia A. DC
YU Wei－hua，MENG Ping，ZHANG Xiang－jun，PAN Ying－nan，CHEN Shao－zhen，
HUANG Su－mei，TANG Jun
(Biotechnology Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530007, China)
Abstract: The shoot tip of wild Smilax riparia A.DC was used as explants to conduct experiment on the induction,
multiplication and rooting of cluster buds in media with different combinations of 6-BA (0.5-5.0 mg/L) and NAA (0.1-1.0
mg/L). The results showed that the optimum medium for cluster buds induction was MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+
0.3% activated charcoal. Browning of explants was completely controlled in this medium and the cluster buds grew earlier
with 75.0 % induction rate. The optimum medium for multiplication of cluster buds was MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/
L with 4.2 multiplication coefficient. The optimum medium for rooting was 1/2MS supplemented with 1.0 mg/L NAA, the
rooting rate reached up to 87.0%, the number of root was from 4 to 7 and the average root length reached up to 1.2 cm.
The rooting plantlets were found able to survive in the transplantation medium (nutrition soil ∶ sawdust ∶ yellow mud= 1∶1∶2)
with 80.0% of transplant survival rate .
Key words: Smilax riparia A. DC; shoot tip; cluster buds; multiplication; rooting; transplanting
广西农业科学 2010，41（7）：
Guangxi Agricultural Sciences
646-648
1． 2． 1 外植体消毒 选择健壮无病害植株，剪下
顶芽，置于500 mg ／ L聚乙烯吡咯烷酮（PVP）溶液中
浸泡20 min后再进行消毒处理。 用洗衣粉水将顶芽
洗净，再用自来水冲洗10 min后，晾干并置超净工
作台上以75％酒精浸泡10 s后， 无菌水清洗2次，然
后置于0．1％升汞溶液中消毒10 min，再以无菌水清
洗3～4次，切段后接入培养基中进行诱导培养。
1． 2． 2 丛生芽诱导、继代增殖和生根培养 以MS
或1 ／ 2MS为基本培养基， 分别添加不同浓度6－BA
（0．5～5．0 mg ／ L）、NAA（0．1～1．0 mg ／ L）（表1），对牛尾
菜进行丛生芽诱导、继代增殖和生根培养，不同培
养基均附加琼脂0．4％、糖3．0％。培养条件：光照时间
10 h ／ d，光照强度2000 lx，培养室温度为（26±2）℃。
1． 2． 3 移栽 挑选生根较好的小苗于室外炼苗
15 d左右，后将小苗根部的培养基轻轻洗净，随后
移栽到疏松透气的混合基质中， 即营养土∶木屑∶黄
泥＝1∶1∶2。
表 1 不同培养基 6－BA和 NAA浓度
Table 1 Concentrations of 6－BA and NAA in different culture
media
编号 Number 培养基 Medium
1 MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L
2 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L
3 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L
4 MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+0.3%AC
5 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L
6 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L
7 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L
8 1/2MS+NAA 1.0 mg/L
9 1/2MS+NAA 0.5mg/L
10 1/2MS+NAA 0.1 mg/L
11 1/2MS+NAA 0.1 mg/L+0.4%AC
2 结果与分析
2． 1 不同培养基对牛尾菜丛生芽诱导的影响
从表2可以看出，在一定NAA浓度（0．2 mg ／ L）
条件下，随着6－BA浓度的升高，外植体诱导率呈现
先增加后降低的趋势；当6－BA为2．0 mg ／ L时，外植
体诱导率最高，达到70.0％以上；当6－BA达到5．0mg ／ L
时，丛生芽诱导率明显下降，且诱导的丛生芽呈现
畸形、白色、脆，容易折断。 此外，在培养基中添加
0．3％ AC（活性炭），诱导率较不添加AC的增加5个
百分点，且丛生芽萌动早、无褐化现象发生（图1）。
因此， MS＋6－BA 2．0 mg ／ L＋NAA 0．2 mg ／ L＋0．3％AC
为丛生芽诱导的适宜培养基。
2． 2 不同培养基对丛生芽继代与增殖的影响
将诱导获得的丛生芽转接到5～7号增殖培养
基，结果表明，添加0．5～1．0 mg ／ L 6－BA和0．1～0．2
mg ／ L NAA组合的培养基均利于丛生芽的增殖，但
增殖系数随着6－BA、NAA浓度的升高而降低， 以7
号培养基即MS＋6－BA 0．5 mg ／ L＋NAA 0．1 mg ／ L的
增殖系数最高（4．2），6号培养基次之（3．8），5号培养
基的丛生芽增殖系数仅为2．3。 此外，发现3种培养
基的芽苗均出现褐化现象（图2），25 d左右转接一
次，对其影响不大。因此，MS＋6－BA 0．5 mg ／ L＋NAA
0．1 mg ／ L为适宜的丛生芽增殖培养基。
表 2 不同培养基对丛生芽诱导的影响
Table 2 Effects of different media on induction of cluster buds
derived from shoot tip
培养基编号
Medium
code
外植体数
Explant
number
诱导率(%)
Induction
rate
褐化现象
Browning
status
备注 Remark
1 20 15.0 有 芽苗畸形、脆，颜色白
色，生长较慢
2 20 45.0 有 芽苗形态正常，颜色淡
绿色，生长较慢
3 20 70.0 有 芽苗形态正常，颜色绿
色，生长快
4 20 75.0 无 芽苗萌动早，形态正
常，颜色绿色，生长快
5 20 60.0 有 芽苗形态正常，颜色绿
色，生长快
2． 3 不同培养基对丛生芽生根的影响
把继代获得的丛生芽转入8～11号生根培养基，
从表3可以看出， 随着1 ／ 2MS培养基中NAA浓度的
增加， 丛生芽生根株数不断增加， 以8号培养基1 ／
2MS＋NAA 1．0 mg ／ L的生根率最高， 达到87．0％，根
较粗壮，生根数4～7条，根平均长度为1．2 cm，最适
合移栽（图3、图4）。9号培养基1 ／ 2MS＋NAA 0．5mg ／ L
的生根率为60．0％，且生根数、根长、根粗壮程度不
及8号培养基，而10号与11号培养基的根细长，不适
合移栽。
表 3 不同培养基对丛生芽生根的影响
Table 3 Effects of different media on rooting of cluster buds
培养基
编号
Medium
code
接种株数
Inoculation
number
生根株数
Rooting
plant
number
生根率
(%)
Rooting
rate
生根数
（条）
Rooting
number
根平均长
度（cm）
Average
root length
根粗壮
程度
Root
status
8 30 26 87.0 4~7 1.2 粗
9 30 18 60.0 3~5 0.7 一般
10 30 16 53.0 2~4 1.5 细
11 30 15 50.0 2~4 1.8 细
2． 4 移栽
移栽季节最好选在春季。挑选生根效果好的小
苗经室外炼苗15 d左右，然后把小苗根部的培养基
轻轻洗净并移栽到疏松透气的混合基质（营养土 ∶
木屑∶黄泥＝1∶1∶2）中。 移栽后浇足定根水，置于阴凉
地方3～5 d，移栽成活率可达80.0％以上，1个月左右
侧芽开始萌动。
庾韦花等：牛尾菜丛生芽诱导及再生体系研究 647· ·

3 讨论
牛尾菜的繁殖方式主要有3种：种子繁殖、宿根
繁殖、组织培养。据文献报道，百合科植物的种子均
不易发芽，且休眠期较长，如秋水仙、小黄花菜、小
叶菠葵等的休眠均具有特殊性， 或胚形态发育不
全，或需一段生理后熟或二者均有［8，9］。 对牛尾菜种
子进行发芽试验，发现在自然条件下，种子需要7～
10个月才能发芽，主要是其胚的形态发育不完全并
具有生理后熟。 因此，从牛尾菜种子萌发形成实生
苗到可以食用，需要3～5年，这使以牛尾菜种子进行
繁殖受到限制［10］。 以根茎进行繁殖，不仅消耗大量
野生资源，导致物种濒危甚至灭绝，而且由于采挖
数量有限，植株生长不一致、产出少，无法进行大面
积栽培。通过组织培养技术，不仅使用的材料少、来
源广、利于保护野生资源，还可以缩短生育期，实现
规模化人工栽培。
牛尾菜在组织培养不同阶段均易产生褐变现
象，以在外植体诱导过程中尤为严重，很大程度上
影响了丛生芽的诱导；虽然在继代与生根培养过程
也发生褐化，但程度较轻，只要及时转接，对幼苗的
增殖与生根影响不明显。 因此，为了提高丛生芽的
诱导率，须对外植体的褐化现象进行控制。 经多种
方法试验，发现在丛生芽诱导培养基中添加0．3％活
性炭不仅能有效控制外植体褐变，还可提高其诱导
率。 此外，采用500 mg ／ L PVP氧化剂溶液进行预处
理20 min或培养基中添加1000 mg ／ L Vc或采用低
无机盐浓度WPM培养基都可不同程度减轻外植体
的褐变。
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（责任编辑 韦莉萍）
图 1 丛生芽诱导
Fig.1 Induction of cluster buds
图 2 丛生芽增殖
Fig.2 Multiplication of cluster buds
图 3 生根
Fig.3 Rooting
图 4 移栽
Fig.4 Transplanted plantlets


广 西 农 业 科 学648· ·