全 文 ：第 12 卷 第 6 期 北华大学学报(自然科学版) Vol． 12 No． 6
2011 年 12 月 JOURNAL OF BEIHUA UNIVERSITY(Natural Science) Dec． 2011
文章编号:1009-4822(2011)06-0713-03
正交法优化草芍药中芍药总苷的提取工艺
刘艳秋1，2，邹向明3，李顺梅1，邢世明4
(1．北华大学林学院，吉林 吉林 132013;2．东北林业大学，黑龙江 哈尔滨 150040;
3．吉林医药学院附属医院，吉林 吉林 132013;4．吉林省红石林业局，吉林 桦甸 132403)
摘要:以芍药总苷含量为考察指标，采用正交试验探讨了草芍药中芍药总苷的最佳提取工艺．结果表明:优化工
艺为草芍药以 14 倍水煎煮 2 h，煎煮 2 次，浸泡时间为 6 h．
关键词:草芍药;芍药总苷;提取工艺
中图分类号:S567． 23;R946． 83 文献标志码:A
收稿日期:2011-09-26
作者简介:刘艳秋(1979 －) ，女，助教，博士研究生，主要从事森林植物有效成分提取研究．
Extracting Technique of Paeoniflorin from Paeonia
obovata with Orthogonal Test
LIU Yan-qiu1，2，ZOU Xiang-ming3，LI Shun-mei1，XING Shi-ming4
(1． Forestry College of Beihua University，Jilin 132013，China;2． University of Northeast Forestry，Harbin 150040，China;
3． Affiliated Hospital of Jilin Medical College，Jilin 132013，China;
4． Hongshi Forestry Bureau of Jilin Province，Huadian 132403，China)
Abstract:The best extraction process of paeoniflorin in Paeonia obovata was discussed by using orthogonal
design method，taking extract content of paeoniflorin as index． The optimum technology condition is 14 times
amount of water added，2 hours for each time，decocting 2 times，soaking time was 6 h．
Key words:Paeonia obovata;paeoniflorin;extracting technology
草芍药(Paeonia obovata Maxim)别名山芍药、野芍药、土芍药，为芍药科，芍药属，多年生草本植物，主
要分布于我国吉林、辽宁、内蒙古、甘肃等地．芍药是我国的著名花卉，栽培历史悠久，园艺品种丰富［1］，草
芍药的根具有镇痛、抗癌、清热凉血、抗炎抗血管扩张作用，煎煮剂所含有效成分对葡萄球菌、霍乱弧菌及
痢疾杆菌均有抑制作用，草芍药含有的没食子酸乙酯、水杨酸、鞣花酸、赤芍乙素、芍药苷、芍药内酯苷、羟
基芍药苷等化合物均具有显著的疗效［2-3］． 芍药总苷是一大类生物活性物质，具有杀菌、抗炎之功效［4-7］．
本试验以草芍药总苷为指标，针对草芍药中芍药总苷的提取工艺进行研究，以期为草芍药的进一步开发奠
定理论基础及提供技术支持．
1 仪器与材料
1． 1 仪 器
日本岛津 LC-10Avp高效液相色谱仪;K18 分析柱;SPD-10Avp可见紫外检测器．
1． 2 材 料
草芍药购于吉林市吉林大药房，甲醇为色谱醇，其他试剂均为分析纯．
2 试验方法
2． 1 色谱条件
色谱柱采用 LUNAC18 色谱柱，柱温 30 ℃，流动相为甲醇-0． 05 mol /L磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇(体积
比为 67 173 4 4) ，流速为 1 mL /min，波长为 230 nm．
2． 2 对照品溶液的制备
精密称取 8． 8 mg芍药苷对照品，置 10 mL量瓶中，加 5%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀．精密吸取该溶液
1 mL，置 5 mL磨口试管中，沸水浴 2 h，待冷却后转移至 20 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，得 44 μg /L
对照品溶液．
2． 3 供试品溶液的制备
精确称取提取后干燥的总苷提取物 20 mg置于 25 mL容量瓶中，加 5%氢氧化钠溶液后定溶至刻度，溶
解，摇匀．取 5 mL沸水浴水解，流动相定容于 10 mL容量瓶中，取 5 μL注入色谱仪，计算草芍药总苷含量．
图 1 芍药苷标准曲线
Fig． 1 Standard curve of paeoniflorin
2． 4 标准曲线的制作
精密吸取对照品溶液 2、4、6、8、14 μL依次进样，按
上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，草芍药总苷对
照品进样量为横坐标，绘制标准曲线，见图 1．回归方程
为 y = 1 134 511x － 650，r = 0． 989 9．
2． 5 精密度试验
精密吸取对照品 5 mL，重复进样 5 次，结果草芍药
中芍药总苷峰面积 RSD为 1． 3% ．
2． 6 pH对芍药苷稳定性的影响
移取 5 mL配制提取的芍药总苷溶液 4 份，分别加入 20 mL乙醇后用 0． 1 mol /L的 NaOH和 0． 1 mol
的 HCl配成缓冲液，pH分别为 3． 0、5． 0、7． 0、9． 0．室温处理 5 h，定时测定芍药总苷含量．
3 试验结果
3． 1 正交试验设计与因素水平选择
根据水煎煮提取经验，影响水煎煮提取效率的因素主要有加水量、煎煮时间、煎煮次数等．因此，选加
水量(A)、煎煮时间(B)和煎煮次数(C)、浸泡时间(D)作为考察因素，以草芍药总苷含量作为考核指标，
用正交设计方法，采用三水平 L9(3
4)进行试验，优选水煎煮提取的最佳工艺条件．因素水平表见表 1，试验
结果见表 2，方差分析见表 3，pH对芍药苷稳定性的影响见图 2．
表 1 因素水平
Tab． 1 Levels of factors
水平
A
加水量 /倍
B
t(煎煮)/h
C
n(煎煮)/次
D
t(浸泡)/h
1 6 1 1 2
2 10 2 2 4
3 14 3 3 6
图 2 不同 pH对芍药苷质量分数的影响
Fig． 2 Effect of different pH on mass
fraction of paeoniflorin
表 2 L9(3
4)正交试验
Tab． 2 Results of L9(3
4)orthogonal test
试
验
号
列号 试验结果
A B C D ω
(草芍药总苷)/
(mg·g －1)
1 1 1 1 1 4． 12
2 1 2 2 2 8． 22
3 1 3 3 3 8． 34
4 2 1 2 3 9． 73
5 2 2 3 1 10． 35
6 2 3 1 2 6． 53
7 3 1 3 2 9． 10
8 3 2 1 3 15． 76
9 3 3 2 1 11． 41
K1 20． 68 22． 95 26． 41 25． 88
K2 26． 61 34． 33 29． 36 23． 85
K3 36． 27 26． 28 27． 79 33． 83
R 5． 20 3． 33 2． 95 3． 33
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表 3 方差分析
Tab． 3 Analysis of variance
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F P
A 40． 00 2 20． 00 19． 23＊＊ F0． 1 = 9． 16
B 22． 20 2 11． 10 10． 67* F0． 05 = 19． 00
C 1． 00 2 0． 50 ＜ 1
D 18． 59 2 9． 29 8． 90
3． 2 提取工艺
取草芍药根 50 g，按照正交设计表 2 试验，合并提取液，过滤，减压浓缩，干燥得浅棕色芍药苷粉末，作
为样品备用．
3． 3 验证试验
按照最佳提取条件重复试验 3 次，结果草芍药苷含量平均为 11． 5%，说明该工艺较稳定，可以达到提
取目的．
3． 4 pH对芍药苷稳定性的影响
由图 2 可知:芍药苷对 pH不稳定，随着 pH升高，芍药苷含量下降，说明芍药苷在碱性溶液中不稳定，
容易分解，但能在酸性溶液中保持良好的稳定性．
4 讨 论
1)通过正交法得出提取草芍药中芍药苷最佳提取工艺条件为 A3B2C2D3，即 14 倍水，煎煮 2 h，煎煮次
数为 2 次，浸泡时间为 6 h．
2)采用高效液相法测得草芍药苷重复性好，分析速度快，检验具有较高的灵敏度，并且流出的组分容
易收集．
3)水煎法简便、准确，可减少有机溶剂对人体的毒害和对环境的污染，经浓缩干燥后所得到的芍药总
苷为淡黄色粉末，具有浓郁的芍药味，熔点为 195 ℃ ．
参考文献:
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【责任编辑:郭 伟】
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