全 文 ：CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2011 年 11月第 18卷第 33期 药品鉴定
飞燕草（Delphinium grandiflorum）为毛茛科翠雀属的多
年生草本植物，又名大花飞燕草、千鸟草、翠雀、萝小花等，分
布于我国各地。 辛，苦，温，有毒，入肺、心、胃三经。 具有止咳
平喘，利水消肿，解痉止痛之功，主治喘息不得卧，水肿胀满，
腹痛，风热牙痛，头虱等症[1]。 主要含有生物碱、皂苷、黄酮等
有效成分，经过前期试验，发现在东北地区所产飞燕草中含
有一定量的芦丁，为了系统对飞燕草进行定性和定量研究，
本文采用 HPLC 法测定飞燕草中的芦丁含量，为控制飞燕草
药材质量提供科学依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100 型高效液相色谱仪 （美国 Agilent 公司 ）；
EP114C型电子分析天平[奥豪斯仪器（上海）有限公司]，TYS-
80/28A 型超声清洗机（保定市天一超能科技有限公司）。
1.2 试剂
芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号 100098-
201112）；甲醇为色谱纯（美国 Fisher 公司）；其他试剂均为分
析纯；飞燕草（采于吉林省磐石市，经长春中医药大学邓明鲁
教授鉴定为毛茛科翠雀属的多年生草本植物飞燕草）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Agilent-C18（4.6 mm×250 mm）；甲醇∶水∶冰醋酸（40∶60∶1）为
流动相；检测波长为 330 nm；流速 1 ml/min，柱温 30℃[1]。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品于 10 ml容量瓶中，甲醇超声溶解，
制成 0.1 mg/ml 的芦丁对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
精确称取飞燕草全草 500 g，加入乙醚 5 000 ml浸泡 3次，
每次 1.5 h，脱脂。 残渣挥干乙醚，加 80%乙醇 5 000 ml，回流
提取 2 次，每次 1.5 h，合并提取液。 80℃下减压回收乙醇，浓
缩液减压烘干（60℃），干品加蒸馏水 1 000 ml 超声溶解，过
滤，滤液上 HPD600 大孔树脂，分别用蒸馏水、10%乙醇、80%
乙醇梯度洗脱，收集 80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇（60℃），
减压真空干燥（60℃），所得干品即为飞燕草总黄酮提取物，
精密称取总黄酮干品 20 mg 于 100 ml 容量瓶中，80 ml 甲醇
超声溶解，放凉后加甲醇定容至刻度，微孔滤膜过滤，续滤液
为供试品溶液[2-5]。
2.4 含量测定方法
精密吸取对照品与样品溶液各 20 μl， 注入高效液相色
谱仪中，测定峰面积，用外标法计算芦丁含量。
3 方法学考察
3.1 标准曲线的绘制
精密量取芦丁对照品溶液（0.456 mg/ml）1、2、3、4、5 ml于
10 ml 容量瓶中，甲醇定容至刻度，精密吸取上述溶液 20 μl
进样，并测定峰面积值，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐
标，绘制标准曲线，并以进样量对峰面积值回归得回归为：
Y=51 698X+68 325（r=0.999 8），含量在 0.912～4.560 μg 间呈
良好的线性关系[6-8]。
3.2 精密度试验
精密吸取对照品溶液 20 μl 注入液相色谱仪中，连续重
复进样 5 次，记录峰面积，计算峰面积的 RSD 为 0.198%，结
果显示此方法测定芦丁含量精密度良好。
HPLC 法测定飞燕草中芦丁的含量
徐 力
长春中医药大学附属医院药剂科，吉林长春 130021
[摘要] 目的：测定飞燕草中芦丁的含量，为飞燕草的质量控制提供依据。 方法：本实验采用 HPLC 法测定芦丁含量，
使用 C18色谱柱，甲醇∶水∶冰醋酸（40∶60∶1）为流动相，检测波长为 330 nm，柱温 30℃，流速 1.0 ml/min。 结果：芦丁在
0.912～4.560 μg与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 8，n=5），平均回收率为 99.26%（RSD 为 1.72%，n=6）。 结论：该
法简便、稳定，可用于测定飞燕草中芦丁的含量和定性鉴别。
[关键词] 飞燕草；芦丁；HPLC 法；质量控制
[中图分类号] R931.5 [文献标识码] C [文章编号] 1674-4721（2011）11（c）-049-02
Determination of rutin in Delphinium grandiflorum by HPLC
XU Li
Affiliated Hospital Pharmacy of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Jilin Province, Changchun
130021, China
[Abstract] Objective: To determine the Delphinium grandiflorum of rutin, providing the basis for quality control for Del -
phinium grandiflorum. Methods: The experimental determination of rutin content by HPLC method, using C18 column,
methanol∶water∶acetic acid (40∶60∶1) as mobile phase, detection wavelength of 330 nm, column temperature 30℃, flow rate
1.0 ml/min. Results: Rutin in the 0.912-4.560 μg and the peak area showed good linear relationship (r=0.999 8, n=5), the
average recovery was 99.26% (RSD=1.72%, n=6). Conclusion: The method is simple, stable and can be used for determi-
nation of rutin in Delphinium grandiflorum and qualitative identification.
[Key words] Delphinium grandiflorum; Rutin; HPLC method; Quality control
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2011 年 11月第 18卷第 33期药品鉴定
中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
煎煮法
水提醇沉法
氨水提取法
超声提取法
1 000
1 000
1 000
1 000
104
57
107
84
68.93
71.07
72.57
88.90
28.67
16.20
31.06
29.87
提取工艺 甘草药材（g）
甘草提取物
（g）
甘草酸铵含
量（mg/g）
转移率（%）
量最低，提取物有微弱的特殊臭气和持久的特殊甜味；水提
醇沉法甘草酸铵的转移率最低，甘草酸铵含量较低，所提取
物品细腻，溶于水中无杂质，并具有持久的特殊甜味。 总之，
不同的提取方法所得的相应指标各不同，但可针对不同的成
方制剂，优选不同的提取方法，来达到控制甘草提取物的质
量与纯度。 保证产品的质量[4-8]。
实验数据表示，采用高效液相色谱法检测甘草酸铵，回
收率、稳定性及重现性良好，结果准确可靠，可提供各成方制
剂中甘草提取物的质量控制和分析。
[参考文献]
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（收稿日期：2011-08-29）
表 3 采用不同的提取工艺的含量与转移率
1
2
3
4
5
6
2.98
3.15
2.97
3.24
3.01
3.35
3.01
3.65
3.12
3.56
3.33
3.71
5.91
6.74
5.91
6.96
6.25
7.04
99.26
99.16
97.16
102.31
98.63
99.65
99.26 1.72
序号
样品含量
（mg）
加入量
（mg）
测得值
（mg）
回收率
（%）
平均回收
率（%）
RSD（%）
3.3 稳定性试验
取同一批次采集的飞燕草药材，按“2.3 供试品溶液的制
备”项下方法制备供试品溶液，并分别于配制后 0、4、8、12、
16、20、24 h 时进样并记录峰面积，所测峰面积结果显示样品
在 24 h 内稳定性良好。
3.4 重复性试验
取同一批次采集的飞燕草药材，精密称取 6份，按“2.3 供
试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，分别吸取 20 μl
注入高效液相色谱仪中，记录峰面积，计算峰面积 RSD 为
0.456%，说明此方法测定芦丁含量重复性良好。
3.5 回收率试验
精密称取同一批次的飞燕草总黄酮提取物 6份，每份 2 g，
研细， 每份均加入芦丁对照品 3.50 mg 于 100 ml 容量瓶中，
加甲醇 80 ml 超声溶解 30 min，放冷后加甲醇定容至刻度，
混匀后用 0.45 μm 微孔滤膜过滤，分别吸取续滤液 20 μl，注
入高效液相色谱仪中，测定峰面积。 计算芦丁平均回收率为
99.26%，相对标准偏差 RSD 为 1.72%（n=6）。 结果见表 1。
表 1 回收率试验（n=6）
3.6 样品测定
分别称取飞燕草药材 100 g，共 3 批，按“2.3 供试品溶液
的制备”项下方法制备供试品溶液，并测定含量，测定结果表
明，样品芦丁平均含量为 0.146%。
4 讨论
通过前期实验已经寻找出飞燕草总黄酮的有效提取方
法，并且确定其中含有一定量的芦丁，在总黄酮的含量测定
中，采用紫外分光光度法对其进行含量测定，从而控制总黄
酮的含量，并取得满意效果。 为进一步探讨飞燕草总黄酮的
有效物质群， 更加精确的定量控制飞燕草总黄酮的提取率，
笔者又通过高效液相色谱法来考察飞燕草总黄酮中芦丁的
含量，在参考 2010 版药典的基础上，摸索了飞燕草芦丁测定
的液相条件，方法学考察表明，该方法简便、灵敏、可行、稳
定，为飞燕草的进一步研究、开发、利用、质量控制奠定坚实
的物质基础和理论依据。
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（收稿日期：2011-08-11）
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