全 文 ：收稿日期:2004-12-20;　修订日期:2005-03-27
基金项目:吉林省延边朝鲜族自治州科技发展计划项目
　　　　 (No. 2003YBKJ027)
作者简介:关丽萍(1970-),女(满族),吉林蛟河人 , 现任延边大学药学院
讲师 , 硕士学位 ,主要从事天然化合物的提取 、合成及药理生物活性的研
究工作.
反相高效液相色谱法测定珍珠梅中芦丁的含量
关丽萍1 , 金晴昊1 , 郑云花1 , 张学武2
(1.延边大学药学院 ,吉林 延吉 133000;　2. 延边大学医学院 ,吉林 延吉　133000)
摘要:目的:建立珍珠梅中芦丁含量的测定方法。方法:采用 YMC - pack ODS - A(4. 6 mm×250 mm , 5 μm)色谱柱 , 流
动相为甲醇-水溶液(35∶65);柱温 25℃;流速 0. 4 ml min-1。检测波长为 256 nm。结果:此法线性范围 1. 0 ～ 6. 0 μg , r
=0. 999 0。平均回收率为 98. 8%, R SD 为 1. 15%(n=5)。结论:测定方法简便 , 精密度高 ,准确性好 , 可以作为珍珠梅中
黄酮的测定方法。
关键词:珍珠梅;　反相高效液相色谱法;　芦丁;　含量测定
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2005)08-0717-01
Study on Determination of Rutin in Sorbaria sorbi f olia by RP- HPLC Assay
GUAN Li-ping1 , JIN Qing-hao1 , ZHENG Yun-hua1 , ZHANG Xue-wu2
(1. Col lege o f P harmacognosy , Y anbian Universi ty , Y anbian , J i lin 133000 , China;2. Medical Col-
lege , Y anbian Universi ty , Y anbian , J inlin 133000 , China)
Abstract:Objective:To e stablish a RP - HPLC method fo r the de te rmination of rutin in Sorbaria sorbi f olia . Methods:
YMC - pack ODS - A(4. 6 mm×250 mm , 5 μm) column w as used. The mobile phase consisted of methanol-water(35∶
65) with flow rate 0. 4 ml min-1 and colum n tempe rature at 25℃, at detection wave leng th of 256 nm.Results:The method
was line r within the range of 1. 0 ～ 6. 0 μg(r=0. 999 0). The average r ecovery of assay w as 98. 8% and RSD 1. 15%(n=
5). Conclusion:The me thod appea red to be sim ple and rapid , highly accurate and precise. It can used fo r the quantita tive
determintion of flavone in Sorbaria sorbi f olia.
Key words:Sorbaria sorbi f olia ;　RP - H PLC;　Rutin;　De te rmination
　　珍珠梅 Sorbaria sorbi f olia 属蔷薇科植物 , 又称“山高粱”
“八木条” ,广泛分布于云南 、贵州 、四川 、湖北 、甘肃 、宁夏及东北 ,
有活血化瘀 、消肿止痛 ,治骨折及跌打损伤的作用。其主要成分
为黄酮类化合物[ 1] 。其药理作用有抗缺氧作用 、保护肝脏及抗肿
瘤作用等[ 2 ,3] 。芦丁为珍珠梅中一种黄酮类化合物 ,具有多种生
物活性 ,主要用于防治心脑血管疾病等作用[ 4 ,5] 。芦丁为珍珠梅
中含量较高的活性成分。目前尚未见有利用 RP - H PLC 法测定
珍珠梅中芦丁含量的报道。本实验建立了利用此法测定珍珠梅
中芦丁的含量方法。
1　仪器与试药
1. 1　仪器 SCL - 10Avp 型高效液相色谱仪(日本岛津);SPD -
10Avp 型紫外- 可见检测器(日本岛津);XW - 80A 旋涡混合器
(上海青浦沪西仪器厂);AS3120A 型超声波清洗脱气器(奥特宝
恩斯仪器有限公司);AT - 261型电子天平(MET TLER)。
1. 2　试药 甲醇(色谱纯),芦丁(对照品 ,中国药品生物制品检定
所);样品采自吉林省延吉市市郊 ,由延边大学药学院刘永镇教授
鉴定为真品。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件 色谱柱为 YMC - pack ODS - A(4. 6 mm ×250
mm , 5 μm);流动相为甲醇-水溶液(35∶65);柱温为 25℃;流速
为 0. 4 ml min-1 。
2. 2　供试品溶液的制备 称取干燥并切成细段的珍珠梅 50 g , 用
6 倍量 75%乙醇浸泡过夜 ,水浴加热回流 2 h ,提取 2 次 , 合并滤
液 ,减压蒸除滤液 , 干燥得粗品。 精密称取提取物 100 mg , 加入
少量甲醇溶解 ,移入 50 m l量瓶中 , 定容 ,摇匀 , 用微孔滤膜过滤 ,
作为供试液 ,备用。
2. 3　对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品 50 mg , 置于 50
ml量瓶中 ,加入甲醇溶解 , 定容于 50 ml , 所得浓度 1 mg /m l , 备
用。
2. 4　线性范围考察 精密吸取对照品 1. 0 , 2. 0 , 3. 0 , 4. 0 , 5. 0 ,
6. 0μl进样 ,按色谱条件测定峰面积积分值 , 以峰面积为纵坐标 ,
浓度为横坐标 ,绘制标准吸收曲线 ,并用最小二乘法求回归方程。
回归方程为:Y =146 826 8. 4X - 222 415. 2 , 相关系数为 r =
0. 999 0。HPLC 色谱图见图 1。
a-芦丁对照品溶液　b-珍珠梅样品溶液　1.芦丁色谱峰
图 1　芦丁 HPLC色谱图
2. 5　精密度实验 精密吸取对照品供试液 10 μl ,按“ 2. 1”项下条
件 ,连续进样 5 次 , 测得峰面积 , 结果 RSD=1. 16%, 说明仪器和
色谱条件均具有良好的精密度。
2. 6　重线性实验 分别取同一供试样品 5 份 ,同法制备 , 按“ 2. 1”
项下条件 ,测定峰面积 , RSD=2. 07%,结果显示该方法具有较好
的重线性。
2. 7　稳定性实验 在室温条件下 , 将样品按测定方法处理后 , 分
别在 2. 0 , 4. 0 , 8. 0 , 12. 0 , 24. 0 h , 进样 10 μl/次 , 得峰面积的
RSD=1. 12%(n=5)。结果表明该溶液在 24 h 内的含量基本保
持不变。
2. 8　回收率实验 精密称取已知含量的样品 , 加芦丁对照品适
量 ,按“ 2. 2” 供试品溶液的制备方法操作 , 测定平均回收率为
98. 8%, RSD 为 1. 15%(n=5)。
2. 9　含量测定 取 3 批珍珠梅 , 按“ 2. 2”所述方法制备供试品溶
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LISHIZH EN MEDICINE AND MA TERIA MEDICA RESEARCH 2005 VOL. 16 NO. 8 时珍国医国药 2005 年第 16 卷第 8 期
液 ,注入高效液相色谱仪 , 在 256 nm 处测定峰面积 ,根据线性回
归方程测定含量。结果见表 1。
表 1　样品含量测定的结果 m g g-1
序号 芦丁含量 平均值
1 0. 228
2 0. 242 0. 230
3 0. 220
　　n=3
3　讨论
本实验利用高效液相法测定珍珠梅中芦丁的含量尚属首次。
该方法简便 、准确 , 重现性好 ,为珍珠梅药物的开发提供了质量控
制标准。
参考文献:
[ 1 ] 　江苏新医学院. 中药大辞典[ M ] . 上海:上海科学技术出版社 ,
1994:8-8.
[ 2 ] 　张学武 ,金海玲 ,赵　红 ,等.珍珠梅提取物对四氯化碳所致大鼠急
性肝损伤的保护作用[ J] .中国中医药科技 , 2001 , 8(6):373-374.
[ 3 ] 　Zhang XW , Zhang XB, Quan JS , et al. Inhibitory ef fect of sorbifolia
on DEN - induced precancerous hepat ic foci and i t s ant ioxidative
act ivies in rat s[ J] .肿瘤防治杂志 , 2003 , 10(11):1137-1140.
[ 4 ] 　刘诗平 ,陈尚猛 ,朱卫东. 槲皮素及其衍生物活性的研究进展[ J] .
中草药 , 1991 , 22(4):182-184.
[ 5 ] 　李茂星 ,谢景文 ,葛　欣. 芦丁的药效学研究进展[ J] .华西药学杂
志 , 2000 , 15(6):450-451.
收稿日期:2005-02-24;　修订日期:2005-06-11
基金项目:湖北省武汉市医药卫生科研基金资助项目(No. 武卫[ 1999]
196号-16)
作者简介:张　涛(1963-),男(汉族),湖北武汉人 , 现任江汉大学医学与
生命科学学院主任药师 ,硕士学位 ,主要从事中药及天然产物活性成分的
化学与药理研究工作.
药食两用中药复方对去卵巢大鼠内分泌激素的影响
张　涛1 ,2 , 肖　刚1 , 艾永循2 ,曹路敏3 ,李　万3 ,阮金兰4
(1.江汉大学医学与生命科学学院 ,湖北 武汉　430056;　　　
2.江汉大学中医药研究所 ,湖北 武汉　430056;　　　　　　
3. 华中科技大学同济医学院生殖医学中心 ,湖北 武汉　430030;
4. 华中科技大学同济医学院药学院 ,湖北 武汉　430030)　　　
摘要:目的:探讨药食两用中药复方治疗绝经期综合征的作用机理。方法:以去卵巢大鼠为动物模型 ,己烯雌酚片为阳性
对照药物 ,采用放射免疫测定法观察该复方对血清 E2 , FSH , LH , T , P , T 3 , T 4 及 TSH 等激素水平的影响 。结果:与去卵
巢空白对照组比较 ,该中药复方能升高血清 E2 值 , 降低血清 FSH , LH , T 3 , T 4 值 ,差异均有显著性(P<0. 05)。结论:该
中药复方能多途径调节卵巢大鼠生殖内分泌功能 ,改善甲状腺功能。提示其能够稳定机体内环境 ,缓解绝经期综合征症
状。
关键词:中药复方;　绝经期综合征;　大鼠;　性激素;　甲状腺激素
中图分类号:R281. 5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2005)08-0718-02
Effects of Edible Chinese Herbal Prescription on the Endocrine Hormones in Ovaricetomized
Rats
ZHANG Tao1 , 2 , XIAO Gang1 , AI Yong-xun2 , CAO Lu-min3 , L I Wan3 , RUAN Jin-lan4
(1. Col lege of Medicine and Li f e Science , J ianghan Universi ty , Wuhan , Hubei 430056 , China;2.
I nst itute o f TCM and Materia Medica , J ianghan Universi ty , Wuhan , Hubei 430056 , China;3. Cen-
ter o f Reproduct ive Med icine , Tongj i Medical College of Huazhong Universi ty o f Science and Tech-
nolog y , Wuhan , Hubei 430030 , China;4. School o f P harmacy , Tongj i Medical Col lege o f Hua-
z hong Universi ty o f Science and Technolog y , Wuhan , Hubei 430030 , China)
Abstract:Objective:To explo re the ther apeutic mechanism of edible Chinese herbal prescription on menopausal syndrome.
Methods:Using ovariectomized r at model and Diethy lstilbestro l table t as po sitive contr ol , the effects o f edible Chine se
herbal prescription on the ho rmonal levels of serum E2 , FS H , LH , T , P , T 3 , T4 , and TSH by RIA w ere observ ed. Re-
sults:The edible Chinese he rbal prescription could inc rease the value s o f se rum FSH , LH , T 3 , T4 obviously. The differ-
ence s w ere significant when compa red w ith control g roup (P <0. 01 or P <0. 05). Conclusion:The edible Chinese he rba l
prescription could regulate repr oductiv e endocrine in various w ays and improve the function o f thyr oid g land in ova riecto-
mized rats. So it could stabilize internal env ir onment o f body and relieve sym ptoms o f menopausal sydr ome.
Key words:Chinese herbal prescription;　Menopausal syndrome;　Ra ts;　Sex ho rmone;　Thy roid ho rmone
　　鉴于激素替代疗法降低免疫力 、致癌倾向等诸多弊端 ,针对
绝经期综合征患者潮热盗汗 ,心悸失眠 , 烦躁或忧郁 , 头晕腰酸 ,
绝经或月经不调等临床表现[ 1] , 本研究以“肾主生殖”为理论依
据 ,选用毒副作用小 、剂量范围宽的药食两用中药乌梅 、酸枣仁 、
桑椹子 、核桃仁 、百合 、牡蛎等组成复方 , 临床用于治疗绝经期综
合征疗效肯定。我们曾报道了该方对去卵巢大鼠相关器官指数
的影响[ 2] 。为了进一步探索该方临床治疗绝经期综合征有效的
机理 ,本研究以去卵巢大鼠为动物模型 , 观察该方对相关内分泌
激素的影响。
1　实验材料
1. 1　动物 成年雌性未孕 Wista r 大鼠 , 体重 220 ～ 250 g , 清洁
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时珍国医国药 2005 年第 16 卷第 8期 LISH IZHEN MEDICINE AND MA TERIA MEDICA RESEARCH 2005 VOL. 16 NO. 8