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毛头牛蒡子中总黄酮最佳提取工艺研究



全 文 :亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific Traditional Medicine
Vol. 6 No.8%
Aug. 2010
第 6 卷 第 8 期
2010 年 8 月
表 5 样品中盐酸小檗碱含量
编号 1 2 3 4 5 平均含量
含量(%) 11.05 10.16 11.29 11.88 13.06 11.49
3 讨论
(1)经对盐酸小檗碱甲醇溶液在 200nm~400nm 进行
光谱扫描,有两个较大吸收峰分别为 265nm 和 254nm,参
考黄柏药材色谱条件选择 254nm为检测波长。
(2)经对乙腈—0.1%磷酸溶液(50∶50)(每 100mL 加十
二烷基磺酸钠 0.1g), 乙腈—0.033mol / L 磷酸二氢钾 (含
0.5%三乙胺,用磷酸调节 pH 至 3.0)(30∶70)等流动相条件
选择,均能达到较好分离,但考虑到离子对试剂对色谱柱
的性能影响较大, 选择乙腈—0.33mol / L 磷酸二氢钾 (含
0.5%三乙胺,用磷酸调节 pH 至 3.0)(30∶70)为流动相,结
果盐酸小檗碱与杂质峰分离度良好,峰形对称,经系统适
用性试验,均能符合要求,且阴性样品无干扰。
(3)供试液制备方法参考《中国药典》2005 版一部黄
连药材的制备方法,经对回流提取与冷浸放置过夜提取效
果比较,两者没有明显的区别,为缩短检验时间,确定回流
提取为供试液制备方法,该方法分析迅速、准确。
(4) 盐酸小檗碱含量受黄连药材产地、生长年限的影
响较大,且本次试验测定黄连药材的批次数少,暂定盐酸
小檗碱的含量不得少于 4.5%,待积累一定数据后,再重新
修订含量标准。
参考文献:
[1] 中国药典委员会 .中华人民共和国药典[M].一部 .北京:化学
工业出版社,2005.
[2] 谢秀琼.中药新制剂开发与应用[M].北京:人民卫生出版社,
2002.
[3] 耿国发, 庞俊典.HPLC法测定洁阴舒洗剂中盐酸小檗碱的含
量[J].中国药师,2006,(9)2:153-154.
[4] 中国药典委员会 . 中华人民共和国药典[M].一部 .北京:化学
工业出版社,2005.
(责任编辑:陈涌涛)
收稿日期:2010-05-04
作者简介:韩潇(1974-),女,新疆维吾尔自治区第一济困医院药师,研究方向为临床药学。
毛头牛蒡子中总黄酮最佳提取工艺研究
韩 潇,赵艳龙
(新疆维吾尔自治区第一济困医院,新疆 乌鲁木齐 830001)
摘 要:目的:优选提取毛头牛蒡子中总黄酮的最佳条件。 方法:采用平行实验优化毛头牛蒡子中总黄酮的提
取工艺,以芦丁的含量为评价指标。结果:加75%乙醇50mL超声提取90min,提取效果最好。结论:该工艺可充分
提取毛头牛蒡子中的总黄酮类成分,提高了药材利用率,为毛头牛蒡子的进一步开发利用作了铺垫。
关键词:毛头牛蒡子;总黄酮;芦丁
中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2010)08-0034-02
牛蒡子,始载于《名医别录》,原名恶实,别名鼠粘子、
大力子,来源于菊科二年生草本植物,是牛蒡属牛蒡(Arc-
tium Lappa L.)的干燥成熟果实,为常用中药 [1]。 同属植物
毛头牛蒡子(Arctium tomentosum Mill.)的干燥成熟果实在
The Study of theBestExtractTechnology of Total Flavones fromArctiumTomentosumMill.
Han Xiao1,Zhao Yan long1
(1.Xin jiang first hospice hospital,Urumqi 830001,China)
Abstract:Objective:To choose the best extract technology of Total flavones from Arctium tomentosum Mill.Methods:Parallel
experiment was used to optimize the best extract technology; the content of rutin was index.Results:Hyper acoustic extract with 75%
alcohol,50ml of alcohol-adding amount and 90 min of extract time respectively.Conclusion:The extract technology of Total flavones
from Arctium tomentosum Mill. is best, and improves the efficiency of Arctium tomentosum Mill.; conduce to further research of the
Arctium tomentosum Mill.
Key Words:Arctium tomentosum Mill.;Total Flavones;Rutin
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亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific Traditional Medicine
Vol. 6 No.8%
Aug. 2010
第 6 卷 第 8 期
2010 年 8 月
新疆有大面积分布[2]。 目前所用牛蒡子几乎全是毛头牛蒡
子的干燥成熟果实,已有很久的应用历史。牛蒡子味辛苦、
性寒、归肺胃二经,具有疏散风热、宣肺透疹、解毒利咽等
功效,主要用于风热感冒、咳嗽痰多、麻疹、咽喉肿痛、痄腮
丹毒、痈肿疮毒 [3]。 药理学证明其具有抗菌、抗肿瘤、降血
糖、抗病毒等作用[4]。 毛头牛蒡子的化学成分较多,主要含
有木脂素类、黄酮类物质,挥发油,此外还有酚羟基物质、
脂肪酸、生物碱等,我们对其黄酮类成分进行了研究,为毛
头牛蒡子的进一步开发利用作了铺垫。
2 实验部分
2.1 试药
毛头牛蒡子(购自阿勒泰地区药检所);芦丁标准品,
批号 100080-200707(中国药品生物制品鉴定所)。 其它所
用试剂均为分析纯。
2.2 仪器
梅特勒 AL204 电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有
限公司);Spectrum Lab22 可见分光光度计(上海棱光技术
有限公司制造);ZNHW-Ⅱ型智能恒温电热套 (郑州长城
科工贸有限公司);KQ-400DB 型数控超声波清洗器(昆山
市超声仪器有限公司)。
2.3 实验方法
2.3.1 对照品溶液的制备
精密称取 105℃干燥至恒重的芦丁标准品 10mg 置于
100mL容量瓶中,加蒸馏水适量,用蒸馏水定容至刻度,摇
匀,即得 0.1mg / mL 芦丁标准品溶液。
2.3.2 标准曲线的绘制
精密吸取对照品溶液 0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 置
于 10mL 容量瓶中,分别加 5%NaNO2溶液 0.4mL,摇匀,放
置 6min,加 10% Al(NO3)3溶液 0.4mL,摇匀,放置 6min,加
4%NaOH 溶液 4mL,摇匀 ,放置 15min,加蒸馏水至刻度
后,于 400~600nm 全波长之间扫描,结果表明,芦丁标准
品溶液在 510nm 波长处有最大吸收, 故选择 510nm 为测
定波长。 以第 1 份为空白,在 510nm 波长处测定吸光度,
以芦丁对照品的浓度(C)为横坐标,吸收度(A)为纵坐标,
得回归方程 A=8.754C+0.012,r=0.9997, 表明芦丁对照品
在 0.002~0.010mg / mL 范围内线性关系良好。
3 结果
3.1 提取工艺研究
选择不同的提取工艺,运用最适宜的工艺对毛头牛蒡
子中总黄酮进行提取。 根据文献,提取溶剂以 75%乙醇为
最佳。 精密称取毛头牛蒡子粗粉 5g,加 50mL 75%乙醇做
溶剂,用不同的提取方法,制得的溶液均过滤,定容,摇匀,
备用。 取上述不同方法所得样品溶液,于 510nm处测定其
吸光度。 如表 1所示。
表 1 不同的提取方法在最大吸收波长处的测定结果
30min 60min 90min
超声提取 0.315 0.367 0.401
回流提取 0.307 0.346 0.378
浸泡提取 24h 0.312
浸泡 24h 后超声 0.335 0.377 0.412
实验表明,在不同的提取工艺下,牛蒡子中总黄酮的
提取含量有所不同。最后,以简便的操作手法,较高的含量
提取为原则,确定以 75%乙醇 50mL 超声提取 90min 为最
佳提取工艺。该方法效率高,不需过夜浸泡,操作较回流提
取更简便。
3.2 精密度实验
精密吸取样品溶液 1mL,按样品含量测定方法连续测
定 6次,RSD=1.57%, 表明检测仪器精密度良好。
3.3 稳定性实验
精密吸取新制备的同一样品溶液 1mL,间隔 20min 测
定 1 次 , 连续测定 9 次 ,RSD=1.54%, 表明样品溶液在
180min 之内稳定。
3.4 重复性实验
精密称取同一批毛头牛蒡子粗粉 6 份, 按最佳工艺
提取,制备样品溶液,并按照样品含量测定方法处理并测
定,结果 RSD=1.72%,表明该法有较好的重复性。
3.5 加样回收率实验
按上法制成 6 份样品溶液, 分别加入芦丁对照品溶
液,同法操作,平均回收率为 100.52%,RSD为 1.57%。
4 讨论
本试验采用平行试验筛选出毛头牛蒡子中黄酮类化
学成分最佳提取工艺,以提取的芦丁含量为考察指标。 即
加 75%乙醇 50mL超声提取 90min, 提取含量高, 效果最
好。 此工艺简便易行,可以将毛头牛蒡子中总黄酮类化学
成分充分提取出来,为充分利用毛头牛蒡子资源提供了重
要的依据。
参考文献:
[1] 肖培根.新编中药志[M].第二卷.北京:化学工业出版社,2002.
[2] 刘勇民.新疆植物志[M].第三卷.乌鲁木齐:新疆科技出版社,2006.
[3] 国家药典委员会.中国药典[M].一部.北京:化学工业出版社,
2005.
[4] 于宏.牛蒡的化学成分与生物活性[J].国外医药·植物药分册,
2007,22(6):244-246.
(责任编辑:陈涌涛)
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