全 文 :第 24卷 第 2期 《新疆师范大学学报》 (自然科学版 ) Vol. 24, No. 2
2005年 6月 Journa l o f Xinjiang No rmal Univ ersity Jun. 2005
( Natura l Sciences Edition)
湿地蒿茎中芦丁含量的测量
张 燕
(海南琼州大学生命与环境科学学院 ,海南琼州 572200)⒇
摘 要: 目的:测定湿地蒿茎中芦丁的含量。 方法:采用双波长薄层扫描法。 结果:湿地蒿茎中芦丁含量为 0. 262% ,该法
简便快速、准确灵敏 ,重现性好 ,结果可靠。 结论:为进一步开发利用湿地蒿提供了科学依据。
关键词: 湿地蒿 ; 芦丁 ; 双波长薄层扫描 ; 含量测定
中图分类号: Q946. 3 文献标识码: A 文章编号: 1008-9659-( 2005) -02-0069-03
芦丁 (Rutin )也称芸香甙 ,是由槲皮素 C3位上羟基和芸香糖所结合而成的双糖甙 ,是常见的一种黄酮醇
类物质。据药理学研究 [1 ] ,芦丁具有: 抗炎症、抗病毒、抗肿瘤、抗过敏 ,具有维生素 P样作用 ,有维持血管抵抗
力 ,降低其通透性 ,减少脆性等作用 ,临床上常用作毛细血管性止血药及治疗高血压的辅助药。
湿地蒿 ( Artem isia tournefortiana Reichb)为菊科蒿属一年生草本植物 ,我国主要分布在新疆 [2- 3 ] ,生于
山坡、农田、河谷、荒地及林缘。全草药用 ,新疆民间药用有清热、解毒、消炎、止血之功效 [3 ]。有关湿地蒿的化
学成分研究尚未见报道。本文采用双波长薄层扫描法 [4 ]测定了新疆蒿属植物湿地蒿茎中芦丁的含量 ,以期为
湿地蒿的进一步研究和开发奠定基础。
1 实验材料和条件
1. 1 材料
湿地蒿于 2002年 10月采自新疆喀什市郊 ,由西北师范大学植物所鉴定 ,取其茎粉 ( 40目筛 )。
1. 2 仪器
日本岛津 CS - 930型薄层扫描仪 ; 5_ l、 10_ l玻璃平头微量进样器 (上海医用激光仪器厂 ) ;双槽玻璃层
析缸。
1. 3 试剂
硅胶 G(薄层层析用 ,青岛海洋化工厂生产 ) ;芦丁对照品 (中国药品生物制品鉴定所 ) ;其它试剂均为分
析纯。
1. 4 实验条件
1. 4. 1 层析条件:展开剂: 乙酸乙酯—乙酸—水 ( 9∶ 1∶ 1) ;展开温度: 室温 ,上行法展开 ,展距 10cm ;显色
剂: 10% Na2CO3水溶液。
1. 4. 2 扫描条件: 扫描方式为双波长锯齿扫描 ,检验波长λS= 370nm ,参比波长λR= 500,狭缝 1. 2mm× 0.
4mm ,散射参数 Sx= 3。
⒇ [收稿日期 ] 2004- 12- 7
[作者简介 ]张燕 ( 1968- ) ,女 ,汉族 ,讲师 ,硕士 ,主要从事植物化学的教学与研究。
2 实验方法与结果:
2. 1 薄层板的制备
硅胶 G与 0. 4%的 CMC水溶液按 1: 3比例混合 ,研磨至合适粘度 ,在 10cm× 12. 5cm的洁净玻板上用 0.
6mm厚的涂铺器湿法铺成 0. 6mm的均匀薄层 ,晾干后于 105℃活化 40min,置于燥器中备用。
2. 2 对照品溶液的制备
精密称取芦丁标品 6. 0mg ,用甲醇溶解后定容至 10ml。
供试液的制备: 准确称取晾干的湿地蒿植物茎粉 ( 4O目筛 ) 10g ,加 95%乙醇液在 70℃水浴上热回流 2.
5h、 2h ,抽滤 ,将两次滤液合并减压浓缩至浸膏 ,浸膏加 60℃热水搅拌溶解 ,水溶液用等量石油醚萃取 3次 ,石
油醚层减压浓缩 ,回收石油醚 ;水层部分再用等量正丁醇萃取 3次 ,合并正丁醇萃取液减压浓缩至浸膏 ,将浸
膏用甲醇定容至 10ml容量瓶内。
2. 3 薄层层析
分别吸取对照品溶液 3_ l ,供试品溶液 5_ l点于同一薄层板上 ,以乙酸乙酯—乙酸—水 ( 9∶ 1∶ 1)为展开
剂上行展开 10cm ,取出晾干 ,喷 10% Na2CO3水溶液 ,晾干观察。 结果表明:供试液在与对照品溶液相应位置
上显示出斑点 ,芦丁斑点的 R1= 0. 38。
2. 4 标准曲线的制作
精密吸取对照品溶液 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0、 6. 0、 7. 0_ l点于同一薄层板上 ,依层析条件展开、显色、扫描 ,结
果见表 1。
表 1 芦丁点样量与峰面积积分值
点样量 (_ l ) 点样量 (_ g ) 峰面积积分值
2. 0 1. 2 18502. 02
3. 0 1. 8 26233. 17
4. 0 2. 4 35492. 20
5. 0 3. 0 45443. 63
6. 0 3. 6 55170. 4
7. 0 4. 2 63282. 77
以峰面积积分值对点样量 (_ g)作回归分析 ,得回归方程 Y= 15269. 85X - 541. 23, R= 0. 9993, N= 6。结
果表明 ,对照品点样量在 1. 2~ 4. 2_ g范围内与峰面积积分值之间呈现一条不通过原点的直线。
2. 5 稳定性试验
将芦丁对照品溶液 3_ l点于硅胶 G薄层板上 ,依层析条件展开 ,显色 ,扫描 ,对同一斑点每隔 30分钟扫描
一次 ,测定峰面积积分值 ,结果表明 ,在展开后 2. 5小时内测定 ,积分值相对稳定 ,见表 2。
表 2 芦丁测定的稳定性试验
放置时间 (min) 峰面积积分值 R SD(% )
0 24804. 21
30 24623. 80
60 24184. 84 3. 03
90 23943. 86
120 23114. 14
150 23110. 62
2. 6 精密度试验
取对照品溶液点于同一薄层板上 ,每点 2. 5_ l ,共五点 ,依法展开显色后进行扫描 ,结果见表 3。
·70· 新疆师范大学学报 (自然科学版 ) 2005年
表 3 芦丁测定的精密度试验
试验号 峰面积积分值 R SD(% )
1 2044. 48
2 20958. 71
3 22094. 64 3. 39
4 21380. 72
5 22123. 42
2. 7 样品含量的测定
在同一块薄层板上点 1个 3_ l对照品溶液 , 5个供试品溶液 (每点 1_ l ) ,采用外标二点法测其样品含量 ,结
果见表 4。
表 4 样品中芦丁含量测定结果
编号 芦丁含量 (% ) 平均含量 (% ) RSD (% )
1 0. 264
2 0. 256
3 0. 268 0. 262 2. 21
4 0. 255
5 0. 265
2. 8 回收率试验
采用加样回收法 ,准确称取已知芦丁含量的 40目筛的湿地蒿茎粉 5g,加入一定量的标准品 ,按照供试液
方法制备得回收率试液。在同一块薄层板上点 1个 3_ l对照品溶液 , 5个回收率试液 (均为 5_ l ) ,按样品含量测
定方法测定 ,计算回收率 ,结果见表 5。
表 5 芦丁测定的回收率试验
试验号 样品含量 (m g) 加入量 (mg ) 实测量 (mg ) 回收率 (% ) 平均值 (% ) RSD (% )
1 13. 668 94. 51
2 13. 691 98. 34
3 13. 10 0. 601 13. 709 101. 33 97. 64 2. 57
4 13. 686 97. 50
5 13. 680 96. 51
3 讨论
3. 1 经测定 ,芦丁显色后 ,须放置 20min后趋于稳定时所得积分值较为合理 ,因此 ,必须在显色趋于稳定后
再对所测各斑点逐一进行扫描 ,才能保证扫描的准确性。
3. 2 采用双波长薄层扫描法测定湿地蒿茎中芦丁的含量 ,具有方法简便、快速准确 ,结果稳定 ,重现性好等
优点。
参考文献:
[1 ] J、 B哈本 .黄酮类化合物 [M ] .北京:科学出版社 , 1983: 50- 60
[2 ]中国科学院中国植物志编辑编委会 .中国植物志第 76卷第 2分册 [M ] .北京:科学出版社 , 1991: 67
[3 ]新疆植物志编辑委员会 .新疆植物志第五卷 [M ].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 , 1999: 169
[4 ]中国科学院上海药物研究所编著 .中草药有效成分提取与分离 [M ] .上海科技出版社 , 1983: 135- 150
(下转第 74页 )
·71·第 2期 张 燕 湿地蒿茎中芦丁含量的测量
参考文献:
[1 ] Ta i. Ho. SC ,Fok AC , et a l. Measurement of obesity by anth ropometry an d bioelectr ic impedance analysis cor rela tion wi th fastin g l ipids and
insul in resistance in an Asian population [J ] . Ann Acad Med S ingapore, 1999, 28( 3): 445- 450.
[2 ]李光伟等 .检测人群胰岛素敏感性的一个新指数 [J ] .中华内科杂志 , 1993, 32( 10): 656- 660.
[3 ] Mikkolas Tom i S , Clarkson , et al , Estrogen rep lacement therapy , atherosclerosis ,and vascular funct ion [J ]. Cardiovascular Research , 2002,
53( 3): 605- 619.
Effects of Body Fat Contents and Distribution on Serum Glucose
and Insulin of the Middle-aged and Elderly Uygurs
ZHANGHongbin , HUI Shounian
(Department of Physical Education ,Northwest N ormal University ,Langzhou , Gansu, 730070)
Abstract: This paperaims to study the ef fects o f body fat contents and dist ribution on serum g lucose
and insulin in the middle-aged and elderly uygur popula tion. And the inethod used is that: to tal 420 subjects
ag ed 45 to 73 years old fo rm Kashi ci ty of Xinjiang w as included in this analysis. Heigh t, w eight , waist
and hip ci rum ference were measured by standard methods. Fasting serum gluco se w as detected on an
automatic biochemist ry analy zer and insulin w ere detected by a radioimmunoassay ki t. Body mass index
BM I. WHR and ISI w ere calculated. The rela tionship betw een BM I. WHR and serum g lucose and insulin
w as analyzed. Results show that , the lev els o f fasting serum g lucose, insulin had an increasing tendency
w ith BM I and WHR increasing w hi le ISI decreased wi th BM I and WHR increasing significant ly. such
trends w ere mo re obvious in w omen than in men. It is concluded tha t fa sting serum g lucose and insulin
levels w ere nearly related on to body fat.
Key words: BM I. WHR; serum gluco se; insulin
(上接第 71页 )
Determination of the Rutin Content of Stem of Artemisia tournefortiana Reichb
ZHANG Yan
( School of L ife and Environmentl Sciences , Qiong Zhou University Hainan 572200)
Abstract: The object of the study w as to: To determine the rutin content of stem of Artemisia
tournefortiana Reichb. And th e method used is: the dual-w aveleng th thin layer scanning. The result of the
study show s tha t: the rutin content o f stem o f Artem isia tournefort iana Reichb. is 0. 262% . Its reteration is
g ood and the resul t i s reliable. So i t is concluded tha t: the study provides scienti fic proof fo r the further
exploi tation and uti li zation of Af tem isia tournefortiana Reichb.
Key words: Artem isia tournefort iana Reichb; rutin; dual-w aveleng th thin layer scanning; content
determination
·74· 新疆师范大学学报 (自然科学版 ) 2005年