全 文 ：藏药材莲座蓟质量标准研究
陈 燕1， 易进海1* ， 德 吉2， 刘倩伶1
(1. 四川省中医药科学院，四川 成都 610041;2. 西藏自治区藏医院，西藏 拉萨 850000)
收稿日期:2009-08-26
作者简介:陈 燕(1964 －)，女，副主任药师，研究方向:中药新药研发及质量标准研究。Tel:(028)85210843 E-mail:yicy64@ 163. com
* 通讯作者:易进海，研究员，硕士生导师，研究方向:天然药物研究及新药开发。
关键词:莲座蓟;显微鉴定;薄层色谱鉴别;高效液相色谱法;绿原酸;芦丁
摘要:目的:建立藏药材莲座蓟的质量标准。对莲座蓟进行了显微鉴定、薄层色谱鉴别。采用高效液相色谱法同时对药
材中绿原酸、芦丁进行含量测定。方法:色谱条件为:色谱柱:Phenomenex Luna C18(2)(4. 6 mm × 150 mm，5 μm);流动
相:甲醇 － 1%冰醋酸溶液(32 ∶ 68);检测波长为 340 nm;流速:1 mL /min。柱温:35 ℃。结果:4 批莲座蓟药材 TLC色谱
中均能检出绿原酸、芦丁。绿原酸在 0. 068 08 μg ～ 0. 340 4 μg范围内有良好的线性关系，r = 0. 999 7。芦丁在 0. 042 72
μg ～ 0. 213 6 μg范围内有良好的线性关系，r = 0. 999 8。绿原酸平均加样回收率为 97. 66%，RSD = 1. 06%(n = 6);芦丁
平均加样回收率为 97. 73%，RSD = 1. 14%(n = 6)。结论:本法简便快捷，结果可靠，为控制莲座蓟药材的质量提供参考
方法。
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)08-1377-03
莲座蓟为菊科植物莲座蓟 Cirsium esculentum
(Sievers)C. A. Mey. 的全草。为藏、蒙族习用药
材，具有散瘀消肿，排脓托毒，止血的功效，用于治疗
肺脓肿，疮痈肿毒，皮肤病，肝热，各种出血［1-2］。主
要分布在我国西藏、新疆、内蒙古和东北等地，收载
于《中华人民共和国卫生部药品标准·藏药》第一
册和《内蒙古中草药》。目前尚无质量标准研究，其
化学成分也未见报道。本实验对收集的 4 批莲座蓟
药材化学成分进行了系统预试，采用 3 种不同的展
开剂和流动相对药材进行了薄层鉴别及 HPLC 图谱
的定位核对，发现莲座蓟药材中含有绿原酸、芦丁等
化合物，据文献报道绿原酸、芦丁具有抗炎、抗变态、
抗病毒、解热的作用［3-4］，与莲座蓟的功能主治相符。
为此，参照《中国药典》2005 年版一部天山雪莲项下
的含量测定方法，采用 HPLC 法测定莲座蓟药材中
绿原酸、芦丁的含量，为莲座蓟药材的质量评价提供
参考方法。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
显微镜:日本奥林巴斯生物显微镜、尼康(NI-
KON)摄影显微镜，显微描绘仪:香港莱卡显微描绘
仪、北京第三光学仪器厂显微描绘目镜。显微制图:
采用显微描绘仪绘制，然后取其主要显微特征，组合
成显微特征图版，最后采用硫酸纸描绘而成。Wa-
ters高效液相色谱仪:包括 Waters1525 泵，2487 双
通道紫外检测器，Waters柱温箱，Breeze 液相色谱工
作站。Brasson超声清洗仪。塞多利斯十万分之一
电子天平。
1. 2 试剂与样品
绿原酸、芦丁对照品(批号:110753-200413;
100080-200306;中国药品生物制品检定所，含量测
定用)。4 批莲座蓟药材由西藏自治区藏医院提供，
经四川省中医药科学院舒光明研究员鉴定为菊科植
物莲座蓟 Cirsiumesculentum (Sievers)C. A. Mey.的
干燥全草。甲醇为美国 Tedia 色谱纯，水为超纯水，
硅胶 G(青岛海洋化工厂)，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 显微鉴别
本品粉末绿褐色。用间苯三酚、浓盐酸染色，置
显微镜下观察。结果可见，本品冠毛主轴由多细胞
组成，直径 36 ～ 78 μm;冠毛非腺毛细长，单细胞，直
径 22 ～ 39 μm，长至 640 μm。苞片表皮细胞表面观
呈长条形，直径 10 ～ 27 μm，可见稀疏孔沟及斜纹
孔。气孔位于叶表面，呈椭圆形，直径 23 ～ 26 μm，
不定细胞型。非腺毛由 2 ～ 5 个细胞组成，微弯曲，
有的中部微溢缩状，直径 11 ～ 18 μm。花粉粒淡黄
棕色，类球形或阔椭圆形，直径 46 ～ 55 μm，外壁具
钝齿状突起及细网状雕纹，有的可见三萌发孔。导
管网纹或螺纹，直径 10 ～ 65 μm。见图 1。
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图 1 莲座蓟药材显微特征图
1. 冠毛 2. 苞片表皮细胞 3. 气孔 4. 叶下表皮细胞 5. 非腺
毛 6. 花粉粒 7.导管
2. 2 薄层鉴别
取 4 批本品粗粉 0. 2 g，加甲醇 2 mL，超声处理
20 min，静置，上清液作为供试品溶液。另取芦丁对
照品、绿原酸对照品，各加甲醇制成每 1 mL 含 0. 5
mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国
药典 2005 年版一部附录 VIB)试验，吸取供试品溶
液 10 μL、对照品溶液 5 μL，分别条状点于同一聚酰
胺薄膜板上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷
以三氯化铝试液，待乙醇挥干后，置紫外光灯(365
nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应
的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图 2。
图 2 莲座蓟药材 TLC图谱
1 － 4. 莲座蓟药材 5. 绿原酸对照品 6. 芦丁对照品
2. 3 绿原酸、芦丁的含量测定
2. 3. 1 色谱条件 色谱柱:Phenomenex Luna C18
(2)(4. 6 mm × 150 mm，5 μm);柱温:30 ℃;流动
相:甲醇 － 1%冰醋酸溶液(32 ∶ 68);检测波长为
340 nm;流速:1. 0 mL /min。理论板数按芦丁峰计算
应不低于 8 000。在此色谱条件下，绿原酸、芦丁对
照品、莲座蓟药材的 HPLC图谱见图 3。
2. 3. 2 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号
筛)约 0. 5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加
50%甲醇 25 mL，称定重量，超声处理(功率 250 W，
频率 50 Hz)20 min，放冷，再称定重量，用 50%甲醇
补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 1
mL，置 5 mL量瓶中，加 50%甲醇稀释至刻度，摇匀，
即得。
图 3 莲座蓟药材 HPLC图
A. 绿原酸、芦丁对照品 B. 莲座蓟药材 1. 绿原酸 2. 芦丁
2. 3. 3 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品
5. 34 mg，置 25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀。精密称取绿原酸对照品 8. 51 mg，置 25
mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密
吸取芦丁对照品溶液 1. 0 mL 和绿原酸对照品溶液
1. 0 mL，置同一 10 mL 量瓶中，加 50%甲醇稀释至
刻度，摇匀，即得混合对照品溶液(每 1 mL 中含芦
丁 0. 021 36 mg和绿原酸 0. 034 04 mg)。
2. 3. 4 线性关系 精密吸取绿原酸、芦丁对照品混
合溶液 2、4、6、8、10 μL，注入液相色谱仪中测定。
以进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准
曲线，得绿原酸的回归方程为:Y = 2 978 884. 5X －
6 843，r = 0. 999 7。芦丁的回归方程为:Y =
4 925 938X － 33 651. 8，r = 0. 999 8。结果表明绿原
酸在 0. 068 08 ～ 0. 340 4 μg、芦丁在 0. 042 72 ～
0. 213 6 μg范围内呈良好线性关系。
2. 3. 5 精密度实验 取 2. 3. 3 项下的对照品溶液
5 μL，分别连续进样 5 次，依法测定峰面积，结果绿
原酸和芦丁的 RSD分别为 0. 83%、0. 91%。表明仪
器精密度良好。
2. 3. 6 稳定性实验 取 2. 3. 2 项下的供试品溶液
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(批号:01)，精密吸取 10 μL，分别于室温放置 0、1、
2、4、6、24 h后注入液相色谱仪，依法测定峰面积，结
果绿原酸和芦丁峰面积稳定，RSD 分别为 0. 72%、
0. 88%，表明供试品溶液室温放置 24 h内稳定。
2. 3. 7 重复性实验 取样品粉末(批号:01)5 份，
每份 0. 5 g，精密称定，照 2. 3. 2 项下方法分别制成
供试品溶液，精密吸取 10 μL，注入液相色谱仪，依
法测定峰面积，测得绿原酸和芦丁的含量分别为
0. 345 2% 和 0. 153 6%，RSD 分别为 1. 09% 和
1. 14%。表明试验方法良好。
2. 3. 8 加样回收率实验 取已知绿原酸和芦丁含
量的样品(批号:01)粉末 6 份，每份 0. 25 g，精密称
定，准确加入一定量的绿原酸对照品(0. 340 4 mg /
mL)2. 5 mL、芦丁对照品(0. 213 6 mg /mL)2. 0 mL，
照含量测定项下操作，测定含量，计算回收率，绿原
酸平均回收率为 97. 66%，RSD为 1. 06%;芦丁平均
回收率为 97. 73%，RSD为 1. 14%。结果见表 1。
表 1 绿原酸和芦丁加样回收率测定结果(n =6)
样品称量
/ g
样品中绿原
酸量 /mg
样品中芦丁
量 /mg
添加对照品
绿原酸量 /mg
添加对照品
芦丁量 /mg
测出绿原
酸量 /mg
测出芦丁
量 /mg
绿原酸回
收率 /%
芦丁回
收率 /%
0. 250 2 0. 863 7 0. 384 3 0. 851 0. 427 2 1. 698 8 0. 795 4 98. 13 96. 23
0. 251 1 0. 866 8 0. 385 7 0. 851 0. 427 2 1. 689 2 0. 801 2 96. 64 97. 26
0. 252 7 0. 872 3 0. 388 1 0. 851 0. 427 2 1. 717 3 0. 807 7 99. 29 98. 22
0. 250 4 0. 864 4 0. 384 6 0. 851 0. 427 2 1. 690 4 0. 804 6 97. 06 98. 31
0. 249 8 0. 862 3 0. 383 7 0. 851 0. 427 2 1. 697 2 0. 798 1 98. 11 97. 00
0. 250 6 0. 865 1 0. 384 5 0. 851 0. 427 2 1. 688 3 0. 808 9 96. 73 99. 34
2. 3. 9 样品含量测定 样品 4 批，分别依 2. 3. 2 项
下方法制成供试品溶液，依法测定，绿原酸和芦丁含
量测定结果见表 2。
表 2 莲座蓟药材中绿原酸和芦丁含量测定(n =3)
产地 /采收时间 绿原酸 /%
绿原酸平均
含量 /%
芦丁 /%
芦丁平均
含量 /%
赤峰(07 － 03)
0. 347 0
0. 345 2
0. 152 1
0. 153 6
0. 343 3 0. 155 0
林芝(07 － 03)
0. 419 1
0. 417 2
0. 190 9
0. 191 7
0. 415 2 0. 192 4
林芝(08 － 02)
0. 388 2
0. 385 9
0. 175 2
0. 172 8
0. 383 5 0. 170 3
里龙(08 － 02)
0. 532 8
0. 531 8
0. 228 5
0. 226 5
0. 530 7 0. 224 4
3 讨论
提取方法的选择 本试验对供试品溶液的不同
提取方法(超声、回流)，不同提取溶剂(甲醇、50%
乙醇)及不同提取时间(20、45 min)分别进行考察。
结果 50%乙醇 25 mL 超声提取 20 min 绿原酸和芦
丁的含量均较高，杂质峰较少，该法简便，可控性强。
莲座蓟的薄层色谱鉴别 曾参照 2005 年版一
部天山雪莲药材的 TLC展开条件乙酸乙酯-丁酮-甲
酸-水(10 ∶ 6 ∶ 1 ∶ 2)的上层溶液为展开剂［5］，对样
品进行薄层色谱鉴别，发现色谱斑点间分离度较差，
经反复试验，采用聚酰胺薄膜板上，以醋酸为展开
剂，展开效果较好，薄层色谱斑点清晰、明确。
曾比较研究流动相甲醇 － 0. 4%磷酸(38 ∶ 62)
和甲醇 － 1%冰醋酸溶液(32 ∶ 68)，结果发现磷酸
对峰形影响较大，拖尾严重，采用醋酸可改善此现
象。
莲座蓟作为藏、蒙族地区常用药材，其化学成分
未见报道，本实验通过对该药材的显微鉴别、TLC 及
绿原酸和芦丁的含量测定的研究，初步建立了该药
材的质量标准，结果显示该方法简便、准确、重现性
好，可作为莲座蓟药材质量评价的参考方法。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会编. 中华人民共和国卫生
部药品标准藏药第一册［S］. 1995:84.
［2］ 内蒙古自治区卫生局编.内蒙古中草药［M］. 北京:内蒙古自
治区人民出版社，1972:42.
［3］ 吴卫华，康 帧.绿原酸的药理学研究进展［J］.天然产物研究
与开发，2006，18:691-694.
［4］ 藏志和，曹丽萍.芦丁药理作用及制剂的研究进展［J］.医药导
报，2007，26(7):760-768.
［5］ 中国药典［S］.一部. 2005:36.
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