全 文 ：＊基金项目:2007年广西自然科学基金资助项目
(No.桂科自 0728183)
■通信作者
1 广西中医学院 2007级硕士研究生
2 广西中医学院
3 南宁市红十字会医院
收稿日期:2008-01-15
墓头回提取液抑制小鼠宫颈癌 U14生长的实验研究＊
蒋秋燕　钟　璐1 　方　刚2 　苏莉鸣3 　唐乾利2■
(广西中医学院第一附属医院　南宁　530023)
摘要　目的:探讨墓头回提取液对小鼠宫颈癌 U14 生长的抑制作用。方法:将 SPF 级雌性 KM 小鼠随机分成墓头回提取液
高 、中 、低剂量组 、顺铂组及模型组 , 以观察墓头回提取液对 U14 实体瘤肿瘤抑制作用和腹水瘤小鼠的生命延长时间的影响。
结果:以阴性对照组为基础 , 墓头回提取液高 、中剂量组及顺铂阳性对照组对实体瘤的抑瘤作用明显(P <0.01);墓头回提取
液低 、中 、高剂量组 、顺铂组抑瘤率分别为 8.2%、35.9%、56.9%和 68.7%;墓头回提取液 3 个剂量组均能明显延长腹水瘤小鼠
生命(P <0.01)。结论:墓头回提取液对小鼠宫颈癌 U14的生长有较好的抑制作用。
关键词　墓头回提取液;小鼠宫颈癌 U14;抗肿瘤
中图分类号:R284　　　文献标志码:A　　　文章编号:1005-930X(2009)01-0077-02
　　墓头回 ,又称墓头灰(《山西中药志》)、箭头风(《广西中
草药》),为败酱科植物异叶败酱(Pat rinia H eterophylla Bge)、
糙叶败酱(Patrinia Scabra Bge)的根 , 性凉 , 味苦 , 微酸涩 , 具
有燥湿止带 、收敛止血 、清热解毒之功[ 1] 。 中药作为抗肿瘤
药 ,因其具有有效成分种类多 、抗瘤谱广 、副作用小等特点 ,
日益受到人们的重视 ,从中药的提取物中筛选有效的抗肿瘤
制剂 ,已成为开发抗肿瘤药物的重要途径之一。 现代研究发
现 ,墓头回提取液及其提取成分具有良好的抗肿瘤作用[ 2] 。
因此 ,本实验观察墓头回提取液对小鼠宫颈癌 U14 生长的抑
制作用 ,并为进一步的研究提供实验依据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　动物及瘤株:SPF 级雌性 KM 小鼠 100 只 , 体重(20
±2)g , 购于广西医科大学实验动物中心 , 符合健康一级动物
标准 ,合格证号:SCXK 桂 2003-0003。 U14 宫颈癌细胞株:购
于上海药物研究所 ,在昆明小鼠腹腔内传代。
1.1.2　药物:墓头回原药材 1.0 kg ,购于广西中医学院第一
附属医院中药房 ,经广西中医学院中药鉴定研究所鉴定为异
叶败酱(Patrinia Heterophy lla Bge),粉碎后用 5 000 mL 蒸馏
水浸泡0.5 h , 水煎煮2次 , 水提取液冷却后与75 %乙醇以
10∶1 比例醇沉 10 h , 真空过滤器过滤 , 合并 2 次滤液 ,加热
浓缩至 100 m L ,水浴加热 , 得到浸膏 150 g , 保存备用;顺铂
(齐鲁制药有限公司 , 批号:706031CF),临用时以注射用水配
制成所需浓度(1 mg/ mL);其他所用试剂均为分析纯。
1.2　实验方法
1.2.1　宫颈癌模型的建立
1.2.1.1　实体瘤模型的建立[ 3] :将未带瘤 KM 小鼠称重 ,随
机分为 5 组 ,每组 10 只 , 墓头回提取液高 、中 、低 3 个剂量
组 、顺铂组 、模型组。在无菌条件下 , 取预先在 KM 小鼠体内
传代第 7 天的 U14 肿瘤细胞(腹水),以无菌生理盐水按 1∶3
稀释 ,调整细胞数约为 2.0×109个/ L , 于每只小鼠右前肢腋
下注射 0.2 mL。以观察墓头回提取液对实体瘤 U14 小鼠肿
瘤抑制率的影响。
1.2.1.2　腹水瘤模型的建立:另取未带瘤 KM 小鼠 50 只 ,
随机分为 5 组 ,每组 10 只 , 分别为墓头回提取液高 、中 、低剂
量组 、顺铂组 、模型组。 参照耿果霞等[ 4] 以及预实验结果建
立模型 , 在无菌条件下 , 取在 KM 小鼠体内传代的第 7 天的
U14 肿瘤细胞(腹水), 以无菌生理盐水按 1∶3 稀释 , 调整细
胞数约为 2.0×109个/ L , 于每只小鼠腹腔注射 0.2 m L。以
观察墓头回提取液对腹水瘤 U14 小鼠生命延长率的影响。
1.2.2　给药:参照预实验及活性筛选给药量 , 将墓头回浸膏
配制为墓头回提取液高 、中 、低 3 个剂量 , 按所含浸膏量计
算 ,分别为 1 500 、750、375 mg/kg · d-1;从接种第 2 天开始 ,
墓头回提取液组按体重 0.2 mL/ 10 g· d -1 , 定时分组灌胃给
药;顺铂组腹腔注射顺铂注射液 3 mg/kg · d -1 ;模型组每只
每天予生理盐水 0.5 mL 灌胃。以上均连续给药 10 d。
1.2.3　宫颈癌 U14 小鼠实体瘤平均瘤重以及抑瘤率测定。
1.2.3.1　平均瘤重以及抑瘤率计算:处死前称重 , 计算小鼠
体重均值;颈椎脱臼处死小鼠 , 剖取瘤块进行称重 , 记录瘤
重 ,计算平均瘤重以及抑瘤率 ,肿瘤抑制率=(对照组平均瘤
重-给药组平均瘤重)÷对照组平均瘤重×100%。
1.2.3.2　实体瘤抑制有效的评价标准[ 3] :①对照组小鼠肿
瘤均值不得低于 1 g;②肿瘤抑制率在 30%以上 , 与对照组比
较差异有统计学意义;③给药组动物平均体重下降(与自身
对照)不得超过15%;④动物死亡数不超过 20%,同时达到以
上 4 条要求说明有效。
1.2.4　腹水瘤宫颈癌 U14 小鼠生命延长时间测定:停药后
观察小鼠存活天数 , 计算小鼠生命延长率 , 生命延长率=(给
药组平均存活天数-对照组平均存活天数)/对照组平均存
活天数×100%。
1.3　统计学处理
·77·广 西 医 科 大 学 学 报JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY 　2009 Feb;26(1)
DOI :10.16190/j.cnki.45-1211/r.2009.01.049
所有数据用 SPSS 11.0 软件进行单因素方差分析 , 计量
资料结果以均值±标准差( x ±s)表示。
2　结果与分析
2.1　墓头回提取液对宫颈癌 U14 小鼠实体瘤抑制作用的影
响:与模型组平均瘤重相比 ,墓头回提取液高 、中剂量组对肿
瘤有较好的抑制作用(P <0.01),顺铂阳性对照组有明显的
抑制作用(P <0.01 , 见表 1。
表 1　墓头回提取液对实体瘤 U14 小鼠肿瘤抑制率的影响( x±s)
组别 n前 后
剂量(mg/ kg· d -1) 初始体重(m / g) 终体重(m / g) 瘤重(m/ g) 抑瘤率(%)
模型组 10 9 0 20.4±1.05 27.1±0.84 1.95±0.09 0
墓头回低剂量组 10 9 375 19.6±1.07 25.2±0.78 1.79±0.10 ＊ 8.2
墓头回中剂量组 10 9 750 20.2±0.90 26.8±0.80 1.25±0.13 ＊＊ 35.9
墓头回高剂量组 10 10 1 500 19.8±0.84 26.3±1.09 0.84±0.12 ＊＊ 56.9
顺铂组 10 9 3 20.2±1.03 26.4±0.65 0.61±0.10 ＊＊ 68.7
　　　　　注:与模型组比较 , ＊＊P <0.01 , ＊P <0.05
2.2　墓头回提取液对腹水瘤宫颈癌 U14 小鼠生命延长时间
的影响:与模型组小鼠平均存活天数相比 , 墓头回提取液 3
个剂量组和顺铂组均能明显延长小鼠存活时间(P <0.01),
并且随着墓头回提取液的增加 , 小鼠存活时间逐渐延长 , 见
表 2。
表 2　墓头回提取液对腹水瘤 U14 小鼠生命延长率的影响
( x±s , n =10)
组别 剂量(mg/kg · d-1) 存活天数(t/ d) 生命延长率(%)
模型组 - 11.52±0.94 -
墓头回低剂量组 375 14.44±1.02＊ 25.3
墓头回中剂量组 750 17.55±0.81＊ 52.3
墓头回高剂量组 1 500 19.64±0.79＊ 70.5
顺铂组 3 21.16±0.89＊ 83.7
　　注:与模型组比较 , ＊P <0.01
3　讨　论
宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一 , 在我国的发病率
高居世界第二位 ,居妇科恶性肿瘤死亡的第一位 , 是危害我
国妇女健康的主要恶性肿瘤[5] ,传统的宫颈癌治疗手段主要
是手术和放疗 ,对早期宫颈癌可取得较好的疗效 , 但对于中
晚期宫颈癌的疗效并不理想[6] 。 70 年代以来 , 随着新的化疗
药物和化疗治疗途径的出现 , 宫颈癌的化疗逐渐被重视。常
用的化疗药物主要有顺铂 、环磷酰胺 、博来霉素等 。临床使
用效果较好 ,但缺点是毒性作用大 , 久用易发生耐药 , 且价格
也昂贵。故寻找更新的高效低毒 、价格低廉的治疗宫颈癌的
药物也成为了医学界努力的方向。
当前 ,从中药中筛选有效的抗肿瘤药物已经成为发现抗
肿瘤药物的途径之一。墓头回是湖南 、广西两地盛产的中
药 ,为妇科常用药 , 有药理和临床研究证实 , 墓头回在抗肿瘤
方面具有较好的效果 , 其有效成分为总皂甙 , 临床使用效果
较好 ,毒性作用小 ,久用不易发生耐药 , 且价格低廉[ 7～ 9] , 。本
实验以小鼠宫颈癌 U14 为动物模型 , 首先观察了墓头回提取
液对实体瘤 U14 小鼠的抑瘤作用 , 结果显示墓头回提取液
高 、中剂量组有较好的抑制作用 , 顺铂阳性对照组有明显的
抑制作用 ,而对于墓头回提取液低剂量组 , 虽然与对照组比
较差异有统计学意义(P <0.05),但是低剂量组的抑瘤率仅
为 8.2%, 未超过30%,因此无明显抑制肿瘤生长的作用。其
次 ,观察了墓头回提取液对腹水瘤 U14 小鼠生命延长时间的
影响 ,结果表明墓头回提取液 3 个剂量组和顺铂组小鼠存活
时间明显延长 , 说明墓头回提取液具有一定的抗肿瘤作用。
总之 ,通过实验 ,证实了墓头回提取液对实体瘤 U14 小鼠具
有一定的抗肿瘤效应 , 为墓头回提取物中具有抗肿瘤活性单
体的分离及抗肿瘤新药的开发提供一定的实验依据 , 其具体
的抗癌机制有待进一步探讨。
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·78· 广西医科大学学报　2009 Feb;26(1)