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扁担杆提取物体内抗肿瘤作用研究



全 文 :第 4卷 第 7期
2008年 7月
亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific T raditiona l Medicine
Vol.4 No.7
Jul.2008
收稿日期:2008-04-30
基金项目:江西省卫生厅中医药科研计划(项目编号:2007A094)
作者简介:刘建群(1970 ~ ),男 ,江西萍乡人 ,博士 , 江西中医学院副教授 ,主要研究方向为中药活性成分研究。
扁担杆提取物体内抗肿瘤作用研究
刘建群 ,吴继梅 ,张 锐 ,寇晓莉 ,洪 沁
(江西中医学院现代中药制剂教育部 ,江西 南昌 330004)
摘 要:目的:研究药用植物扁担杆提取物体内抗肿瘤作用。方法:采用小鼠宫颈癌(U14)移植性肿瘤模型 , 观察
扁担杆根皮乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物对肿瘤生长的抑制作用。结果:小鼠灌服扁担杆提取物 10d 后 ,
总提取物及其水部位的中 、高剂量组可明显抑制 U14 移植性肿瘤的生长 , 与阴性对照组相比 , 有显著性差异(P<
0.01)。结论:扁担杆提取物具有抗小鼠宫颈癌(U14)移植性肿瘤生长作用。
关键词:扁担杆提取物;抗肿瘤;小鼠宫颈癌 U14
中图分类号:R730.52    文献标识码:A    文章编号:1673-2197(2008)07-021-02
  扁担杆(Grewia biloba G.Don)为椴树科 (Tiliaceae)
扁担杆属(Grew ia)植物 ,主要分布于江西 、湖南 、浙江和广
东等省[ 1] 。在非洲和亚洲一些国家地区 ,部分扁担杆属植
物被作为民间草药使用 ,多具有抗菌消炎作用。如南非的
Grew ia occidentalis和巴基斯坦的Grewia ery thraea 在民
间作为传统草药治疗伤口细菌感染[ 2, 3] ;Grewia bicolor 在苏
丹作为传统草药治疗皮肤脓胞疮 ,还有镇静作用[ 4] ;《新修
本草》记载扁担杆的变种小花扁担杆枝叶煮汁可治小儿蛔
虫病;《开宝本草》称其可“主三虫 ,下气消谷”[ 5] ;《中药大辞
典》记载其全株和枝叶能祛风除湿 、理气消痞 ,可治小儿因
虫疳积 、大人气痞 、脾虚食少 、妇女崩带 、风湿[ 6] 。扁担杆的
根皮在江西部分地区 ,民间用来治疗皮肤脓胞疮等细菌感
染。但关于扁担杆的抗肿瘤作用研究还未见报道 ,本文首
次报道了扁担杆根皮乙醇提取物对小鼠宫颈癌(U14)移植
性肿瘤生长的抑制活性。
1 实验材料
1.1 实验药品和试剂
扁担杆根皮药材于 2006年 8月采自江西省萍乡市 ,原
植物由安徽中医学院药学院刘守金副教授鉴定为扁担杆
(G rew ia biloba G.Don),凭证标本(No .060801)保存于江
西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室;环磷酰胺
(CTX)(江苏恒瑞医药股份有限公司生产 , 批号:
07102521)。
1.2 实验动物及瘤株
昆明种小鼠 ,雌性 ,普通级 ,体重(20±2.0)g ,购于南昌
大学医学院医学实验动物科学部;小鼠宫颈癌(U14)肿瘤 ,
购于中国医学科学院药物研究所。
1.3 仪器
TG328A型万分之一电子天平(北京赛多利斯仪器系
统有限公司);HHS 型电热恒温水浴锅 (上海博迅实业有
限公司医疗设备厂);XS-212 型显微镜 (江南光电(集团)
股份有限公司)。
2 方法
2.1 提取物制备
将扁担杆干燥根皮 5.5kg粉碎 ,用 90%乙醇溶液加热
回流提取 3次 ,每次 2h ,合并提取液 ,滤过 ,浓缩 ,干燥 ,得
总浸膏 550g 。将总浸膏用水溶解混悬 ,依次用乙酸乙酯 、
正丁醇萃取 ,将乙酸乙酯 、正丁醇萃取液和剩余的水相溶液
浓缩 、干燥 ,得乙酸乙酯部位 、正丁醇部位和水部位。每克
总浸膏相当于 10克生药 ,用时以生理盐水配成所需浓度。
2.2 体内抗肿瘤实验[ 7]
无菌条件下抽取传代 7 ~ 9d生长良好的 U14 的小鼠
腹水 ,用生理盐水按 1∶4稀释成细胞悬液(细胞数为 2.5 ~ 3
×107/mL),每只小鼠右腋皮下接种 0.2mL 。接种后随机
分成生理盐水模型对照(NS)组 、环磷酰胺(CTX , 25mg ·
kg
-1 ·d-1)组 、高(500mg ·kg -1 ·d-1)、中(250mg ·kg-1
·d-1)、低(100mg ·kg -1 ·d-1)剂量给药组 ,每组 10 只。
接种 24h后开始灌服给药 ,每天固定时间段给药 1次并记
录小鼠的活动情况 。给药前称体重 ,连续给药 10d ,末次给
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第 4卷 第 7期
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亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific T raditiona l Medicine
Vol.4 No.7
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药 24h后称体重 ,处死 ,完整剥离肿瘤 、肝脏 、脾脏 、胸腺等
组织 ,经生理盐水洗涤后用滤纸吸干称重 ,计算抑瘤率和免
疫器官指数(脾脏指数和胸腺指数)。
抑瘤率(%)=(对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/
对照组平均瘤重×100%。
胸腺指数 =胸腺重量(mg)/体重 (g);
脾脏指数 =脾脏重量(mg)/体重 (g)。
2.3 统计学处理
所得数据用 SPSS13.0 统计软件进行单因数方差分析
处理 ,数据用 x ±s表示 ,实验组与对照组比较用 t检验 。
3 结果
3.1 模型评定
模型符合要求[ 7] ,实体瘤生长良好 ,阴性对照组小鼠平
均瘤重>1.0g 。阳性对照组有明显抗实体瘤生长作用 ,抑
瘤率>40%。
3.2 小鼠活动情况观察
CTX组小鼠进食量较阴性对照组明显减少 ,毛发干枯 、
蓬松 、无光泽 ,且有中度腹泻 ,体质消瘦 ,活动迟缓。而总浸
膏组 、水部位组小鼠较阴性对照组活动敏捷 ,进食量增加。
3.3 对小鼠移植瘤 U14的抑制作用
结果表明扁担杆总提取物和水部位的 3个不同剂量组
对小鼠 U14肿瘤均有较强的抑制作用 ,且呈现明显的量效
关系 ,和阴性对照组相比均有显著性差异(P <0.01)。其
中高剂量组 500mg/kg (相当于生药 5g/kg)、中剂量组
250mg/kg (相当于生药 2.5g/kg)的抑瘤率均大于 30%
(见表 1)。
表 1 扁担杆总提取物和各部位对小鼠宫颈癌 U14生长的影响 x+s , n=10
组别 剂量(mg/ k g)
体重变化
(g 终/始)
瘤重
(g)
抑瘤率
(%)
脾脏指数
(mg/ g)
胸腺指数
(m g/g)
NS — 24.54/ 19.04 1.21±0.41 — 8.17±5.64 3.56±1.39
C TX 25 22.63/ 19.25 0.57±0.17** 52.44 4.81±0.99 1.53±0.55
总提取 100 26.82/ 19.23 0.91±0.26** 24.69 7.95±2.62 2.58±1.04
物 250 25.83/ 18.96 0.78±0.23** 34.96 6.00±1.84 2.51±1.15
500 24.60/ 18.89 24.60/ 18.89 43.08 6.66±2.80 2.31±0.69
乙酸乙 100 26.91/ 21.42 1.12±0.54 7.21 4.74±0.92 1.87±0.82
酯部位 250 24.33/ 20.50 0.94±0.35* 22.20 4.74±1.19 2.05±0.47
500 24.65/ 20.85 0.90±0.37** 25.43 4.77±1.00 1.80±0.78
正丁醇 100 25.36/ 21.41 1.36±0.44 — 5.73±2.24 1.78±0.68
部位 250 26.63/ 21.52 1.24±0.41 — 7.68±2.87 1.76±0.52
500 24.89/ 21.48 1.18±0.29 1.82 5.41±1.16 1.68±0.54
水部位 100 26.68/ 20.91 0.86±0.42** 28.75 5.54±1.69 2.49±1.16
250 26.50/ 21.18 0.77±0.27** 36.20 6.09±1.24 2.33±1.14
500 24.65/ 21.38 0.63±0.27** 47.80 5.29±1.06 1.76±0.76
注:*表示 P<0.05 ,即与对照组相比有差异性 , **表示 P<0.01 ,即与对照组相比有显著性差异。
4 讨论
本实验研究表明 ,扁担杆总提取物和水部位组平均瘤
重明显低于阴性对照组 ,其高 、中剂量组对小鼠宫颈癌
(U14)的抑制率均>30%,与阴性对照组相比有显著性差
异(P <0.01),且不同剂量组之间呈现明显的量效关系。
根据中草药提取物抗癌有效的一般标准[ 7] (实体瘤抑瘤率
>30%,统计学分析有显著性差异),扁担杆乙醇提取物具
有明显的抗小鼠宫颈癌(U14)作用 ,其活性部位为水部位。
参考文献:
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(责任编辑:姜付平)
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