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长寿花离体快繁技术研究



全 文 :基金项目 三门峡职业技术学院科研项目(SZY-2012-039)。
作者简介 梁红艳(1978-),女,山西忻州人,讲师,硕士。研究方向:生
物技术。
收稿日期 2013-07-01
长寿花(Kalanchod blossfeldiana CV. Tomthumb),别名寿
星花,为景天科长寿花属多年生常绿多浆植物。叶片翠绿,
花朵密集,花色丰富,有红、橙、紫、粉、白等色,花期 12 月至
翌年 4 月底,由于其花期长,正逢冬、春少花季节,又有着吉
祥、长寿之寓意,是元旦和春节期间馈赠亲友和长辈的理想
盆花。长寿花在一定程度上可以有效吸收甲醛,对房屋装修
后的甲醛气体有一定净化能力 [1]。此外,还可以从长寿花中
提取红色素,研究表明 [2],长寿花的红色素水溶性好,在一定
范围内对光和热有一定的耐受性,稳定性好,有一定的开发
利用价值。总体来看,出于市场不断成熟、消费渐趋日常化
等原因,种苗商预测近几年长寿花种苗周年供应更加均衡,
销量也会保持平稳上升态势 [3]。但长寿花的常规繁殖方式为
初夏或初秋枝条扦插 [4],易受季节限制,繁殖速度较慢,通过
组织培养可以大大加快其繁殖速度,实现周年生产。目前,
已有通过组织培养对长寿花进行快繁的相关研究 [5-11]。从已
有报道来看,在对长寿花进行快速繁殖时,可以选择花序、茎
尖和带腋芽茎段作为外植体,也可采集叶片作为外植体,但
在以叶片为外植体时,主要是先进行愈伤组织的诱导,再进
行分化和试管苗的增殖,而直接从叶片上诱导出不定芽的报
道较少。该文以长寿花的叶片为外植体,直接从叶片上诱导
出不定芽和根系,实现一步成苗,并进行试管苗的增殖培养。
1 材料与方法
1.1 试验材料
以市售盆栽长寿花作为供试材料。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的采集、清洗和消毒。用消毒后的解剖刀采集
盆栽长寿花的叶片,自来水仔细清洗后,在无菌条件下用
75%酒精消毒 30 s,再用 0.1%升汞消毒 7~8 min,无菌水冲
洗 3~5 次后接种于初代培养基上。
1.2.2 一次成苗培养。配制培养基:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA
0.1 mg/L+蔗糖 3%+琼脂粉 6.5 g/L,调节 pH 值至 5.8左右。如
无特殊说明,培养箱温度白天保持 25 ℃,夜间保持 20℃,光
照强度 4 400 lx,光照时间 8 h/d。
1.2.3 继代增殖培养。配制 MS 和 MS+6-BA 5.0 mg/L 2 种培
养基,对初代培养获得的试管苗进行继代增殖培养。
2 结果与分析
2.1 初代培养结果
叶片培养 1 周后进行观察,发现用酒精和升汞结合起
来的消毒效果比较理想,叶片污染率很低。约 2 个月后再观
察,发现从长寿花叶柄处长出既有芽又有根的完整植株,实
现了一步成苗(图 1、2)。
2.2 培养基对试管苗增殖的影响
试管苗在 MS 和 MS+6-BA 5.0 mg/L 2 种培养基上生长
一段时间后观察,发现试管苗在 MS+6-BA 5.0 mg/L 培养基
上增殖率非常高,植株密集(图 3),但是试管苗的质量很差,
生长瘦弱,叶片很小,植株的茎半透明,发脆,发生了玻璃
化。一般玻璃化苗的移栽成活率都很低,发生玻璃化的原
因,可能是该培养基中细胞分裂素 6-BA 浓度过高所致。而
试管苗在 MS 基本培养基上长势良好(图 4),根系数量多且
(下转第 163页)
长寿花离体快繁技术研究
梁红艳
(三门峡职业技术学院生化工程系,河南三门峡 472000)
摘要 以长寿花叶片为外植体,对不定芽的诱导及试管苗的增殖进行了研究,结果表明:长寿花叶片一步成苗的适宜培养基配方为
MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖 3%+琼脂粉 6.5 g/L,试管苗在 MS 基本培养基上增殖系数较高,试管苗生长健壮,所以 MS 是试管苗
增殖的适宜培养基。
关键词 长寿花;不定芽;诱导;增殖
中图分类号 S682.1+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2013)16-0145-01
Research on Rapid Propagation of Kalanchod blossfeldiana in vitro
LIANG Hong-yan
(Biochemical Engineering Department,Sanmenxia Polytechnic,Sanmenxia Henan 472000)
Abstract This study took leaf slice of Kalanchod blossfeldiana as explants,carried on adventitious buds induction and test -tube seedlings
propagation,the results were as follows:the buds induction suitable culture medium was MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3% sucrose+agar 6.5 g/L,
proliferation coefficient was higher when plantlets in MS basic medium,so MS was the suitable medium for plantlet proliferation.
Key words Kalanchod blossfeldiana;adventitious buds;induction;propagation
图 1 长寿花的一步成苗
林业科学现代农业科技 2013年第 16 期
145
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分布均匀(图 5)。
3 结论与讨论
试验以长寿花叶片为供试材料,进行了外植体的消毒、
初代培养和继代增殖培养,结果表明:长寿花叶片一步成苗
的适宜培养基配方为 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗
糖 3%+琼脂粉 6.5 g/L,试管苗在 MS 基本培养基上增殖系
数较高,试管苗生长健壮。
细胞分裂素在试管苗的增殖过程中发挥着重要作用,
可以诱导芽的分化,促进侧芽萌发生长。但并不是说细胞分
裂素浓度越高越好,该研究发现,虽然长寿花试管苗在附加
5.0 mg/L 6-BA 的 MS 培养基上增殖率很高,植株密集,但是
试管苗的长势差,发生了玻璃化,移栽之后一般都很难成活。
所以数量不能作为衡量试管苗增殖的唯一指标,还应结合瓶
苗的长势进行评价。而衡量瓶苗质量的好坏,主要依据苗的
根系状况、整体感、出瓶苗高、叶片数 4 个方面进行判定 [12]。
其中,根系状况对瓶苗质量影响最大,也是最重要的指标,
其次是整体感、出瓶苗高和叶片数。
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图 2 叶片诱导的完整植株
图 3 玻璃化苗
图 4 增殖的试管苗
图 5 试管苗的根系生长情况
(上接第 145页)
朵组成腋生的圆锥花序,雄花序长 8~13 cm,萼片膜质,退化
雌蕊小,雌花:萼片边缘白色,膜质,子房无毛,果径 0.6~1.0
cm,褐色或淡红色,种子长约 5 cm,花期 2—3 月(福建),果
期 8—10 月,我国产于台湾、福建南部及华南、西南南部和
四川南部,各地平原多栽培。
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