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飞燕草总黄酮提取物对小鼠炎症抑制作用的研究



全 文 :2011 年 11月第 18卷第 32期实验研究
中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
飞燕草(Delphinium grandiflorum)为毛茛科翠雀属的多
年生草本植物,又名大花飞燕草、千鸟草、翠雀、萝小花等,分
布于我国各地。 辛,苦,温,有毒,入肺、心、胃三经。 具有止咳
平喘,利水消肿,解痉止痛之功,主治喘息不得卧,水肿胀满,
腹痛,风热牙痛,头虱等症[1]。 叶、种子可引起皮炎,种子的毒
性较其他部分为大。 中毒之动物,表现步伐困难,特别是后
肢;脉搏、呼吸皆变慢,体温有所降低,食欲则良好。更严重时
可有肌肉抽搐,乃至运动失调;最后发生全身性痉挛收缩,呼
吸衰竭而死。东北地区所产飞燕草主要含有生物碱、皂苷、黄
酮等有效成分, 其中对于其所含生物碱部分研究较为具体,
包括内含洋翠雀碱,洋翠雀康宁,硬飞燕草碱,翠雀胺等生物
碱。但对于翠雀花碱、洋翠雀碱药理活性目前研究较少。其所
含脂肪油有杀虫作用。 但对其所含黄酮类成分研究相对较
少。本课题通过前期研究发现飞燕草全草中含有一定量的黄
酮,但未见对其药理活性的系统性研究,故本课题以飞燕草
总黄酮为原料,对其进行一系列药理活性研究,本论文选取
其中的小鼠炎症反应试验进行具体论述。
1 仪器与试药
721 型分光光度计;离心机;加热套;水浴锅;真空泵;旋
转蒸发仪(以上器材均为北京安捷来科学仪器设备有限公司
生产);超净工作台(CJ-1);吲哚美辛胶囊(吉林省银河制药
厂,批号:20101109);冰醋酸;其余试剂均为分析纯。
飞燕草(采于吉林省磐石市,经长春中医药大学邓明鲁教
授鉴定为毛茛科翠雀属的多年生草本植物飞燕草);ICR 雄
性小鼠,购自吉林大学基础医学院动物实验中心,体重 15~20 g。
2 方法与结果
2.1 飞燕草总黄酮的提取
精确称取飞燕草全草 500 g,加入乙醚 5 000 ml浸泡 3次,
每次 1.5 h,脱脂。 残渣挥干乙醚,加 80%乙醇 5 000 ml,回流
提取 2 次,每次 1.5 h,合并提取液。 80℃下减压回收乙醇,浓
缩液减压烘干(60℃),干品加蒸馏水 1 000 ml 超声溶解,过
滤,滤液上 HPD600 大孔树脂,分别用蒸馏水、10%乙醇、80%
乙醇梯度洗脱,收集 80%乙醇洗脱液,减压回收乙醇(60℃),
减压真空干燥(60℃),所得干品即为飞燕草总黄酮提取物[2-5]。
2.2 飞燕草总黄酮的消炎作用实验
取小鼠 120 只,随机分为 6 组:对照组,15.0 mg/kg 阳性
药吲哚美辛组,1.5 g/kg、1.0 g/kg、0.5 g/kg 高、中、低剂量受试
药给药组,模型组。 ig 给药,连续给药 5 d。于末次给药 1 h后
于小鼠 ip 0.8%冰醋酸,0.20 ml/只,20 min 后处死小鼠,剪开
腹腔,用 5 ml 0.9%氯化钠溶液洗腹腔 3 次,合并洗液,定容
至 20 ml,离心取上清液于 590 nm处读取吸光度[6-8]。 计量资
料应用均数±标准差表示(x±s),组间差异采用 t 检验, P<0.05
说明差异有统计学意义。 结果见表 1。
实验数据显示,飞燕草总黄酮高、中、低三组计量给药组对
醋酸致毛细血管通透性增高急性炎症均有明显抑制效果,此结
果证实了飞燕草总黄酮的消炎作用。结果表明飞燕草总黄酮提
取物对醋酸致毛细血管通透性增高急性炎症有明显抑制作用。
飞燕草总黄酮提取物对小鼠炎症抑制作用的研究
徐 力 1,刘彦季 2
1.长春中医药大学附属医院药剂科,吉林长春 130021;2.吉林省电力医院,吉林长春 130022
[摘要] 目的:研究飞燕草总黄酮提取物对小鼠炎症的抑制作用。方法:采用乙醇回流提取法提取飞燕草总黄酮,同时
采用醋酸致毛细血管通透性增高急性炎症法研究飞燕草总黄酮的消炎作用。结果:乙醇回流提取所得飞燕草总黄酮
对醋酸致毛细血管通透性增高急性炎症有明显的消炎作用。 结论:乙醇回流提取飞燕草总黄酮含量高,且提取物消
炎作用明显。
[关键词] 飞燕草;总黄酮;乙醇提取;消炎作用
[中图分类号] R285 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721(2011)11(b)-014-02
Study of Delphinium grandiflorum flavonoids on inhibition of inflammation in
mice
XU Li1, LIU Yanji2
1. Pharmacy, Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Jilin Province, Changchun
130021, China; 2. Electric Power Hospital, Jilin Province, Changchun 130022, China
[Abstract] Objective: To study the Delphinium flavonoids extract inhibited inflammation in mice. Methods: The ethanol
extract of total flavonoids extracted Delphinium grandiflorum, while using acetic acid-induced acute inflammation of capil -
lary permeability studied Delphinium grandiflorum anti-inflammatory effect of flavonoids. Results: The ethanol extract from
Delphinium grandiflor-um flavonoids on capillary permeability induced by acetic acid increased significantly with acute
inflammation of the anti-inflammatory effect. Conclusion: The ethanol extract Delphinium grandiflorum total flavonoids
content, and extract significant anti-inflammatory effect.
[Key words] Delphinium grandiflorum; Flavonoids; Ethanol extract; Anti-inflammatory effect
(下转第 59 页)
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CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2011 年 11月第 18卷第 32期 药物与临床
数×100%。
1.4 统计分析
建立 Excel 数据库,采用 SPSS 18.0 统计学软件分析,并
进行 t检验和 χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
治疗前两组的呼吸频率和氧饱和度差异无统计学意义
(P>0.05),治疗后治疗组的氧饱和度显著高于对照组,治疗
组呼吸频率显著低于对照组,治疗组总有效率显著高于对照
组。 详见表 1、2。
表 1 两组治疗疗效比较[n(%)]
表 2 两组治疗前后临床表现改变(x±s)
3 讨论
COPD 是呼吸系统常见的非传染性疾病,常见于男性的
吸烟患者。多在冬春季节发病,急性发作时症状明显,由于发
病者多为老年患者、病程较久、肺部的功能下降,在感染时患
者纤体分泌亢进,故会出现咳嗽、咳脓痰,痰极难咳出[5]。盐酸
溴己新是一种常用的祛痰药,它可以减少腺体细胞分泌溶酶
体酶,降解多糖,同时可以抑制杯状细胞和腺体细胞分泌酸
性黏多糖,使浓稠痰液变稀薄,易于咳出。盐酸氨溴索是一种
新型的黏液降解剂,它与盐酸溴己新有相似的功能,同时还
可以促进气道上皮的再生和纤毛正常的摆动功能的恢复,稀
释痰液、利于患者痰液的排除,减少痰液在病灶处的停留,有
利于增高抗生素的浓度,达到提高抗感染、杀菌的效果。 同
时, 盐酸氨溴索还可以促进上皮细胞分泌肺泡表面活性物
质,保证肺泡的正常的换气-血流比值,减少患者的呼吸困难
的症状,改善临床表现,提高药物的治疗效果[6]。
本研究中,在治疗 COPD急性加重的患者,盐酸氨溴索的
祛痰效果明显优于盐酸溴己新,减少患者的呼吸频率、提高
患者的氧饱和度,改善了患者的呼吸功能,治疗的总有效率为
100.0%,高于对照组,差异有统计学意义。盐酸氨溴索的祛痰
效果显著,可以作为临床 COPD急性发作的患者的常用药物。
综上所述,盐酸氨溴索在治疗 COPD 加重期时候较盐酸
溴己新有更好的疗效,使脓痰变稀薄,容易咳出,减轻患者临
床症状,缩短治疗时间,改善患者预后,同时不良反应较少,
患者容易耐受,值得临床推广。
[参考文献]
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急性发作期的疗效观察[J].亚太传统医药,2010,11(1):1130-1132.
(收稿日期:2011-06-13)
显效
26(86.67)
20(66.67)
6.789
0.021
有效
4(13.33)
7(23.33)
7.899
0.020
无效
0(0.00)
3(10.00)
5.342
0.036
总有效率(%)
100.00
90.00
5.001
0.043
治疗组
对照组
χ2值
P 值
30
30
组别 例数(n)
治疗组
对照组
t 值
P 值
组别
83.1±2.2
82.1±1.4
1.289
0.438
98.1±2.2
89.1±2.5
5.899
0.031
29±2
29±1
1.342
0.841
22±2
26±2
5.211
0.043
氧饱和度(%)
治疗前 治疗后
呼吸频率(/min)
治疗前 治疗后
3讨论
本实验采用乙醇回流提取法提取飞燕草总黄酮,并进行
了一定程度上的精制, 通过对精制后总黄酮药理活性的研
究,首次定量测定了飞燕草总黄酮对醋酸致毛细血管通透性
增高急性炎症的抑制活性。 在实验中,将飞燕草总黄酮给药
组分为高、中、低三剂量组给药,通过对比试验发现,高、中、
低 3 个剂量给药组对于醋酸致毛细血管通透性增高急性炎
症均有较明显抑制作用,进一步证明了飞燕草总黄酮的消炎
作用。最终证实飞燕草总黄酮对醋酸致毛细血管通透性增高
急性炎症消炎作用较为明显。因此下一阶段的实验重点是进
一步提高飞燕草总黄酮的含量,并对纯化后的总黄酮进一步
跟踪其药理活性, 同时深入研究飞燕草总黄酮的物质基础,
寻找总黄酮有效部位群,确定更多的黄酮单体结构,为飞燕
草总黄酮的消炎结果提供化学物质依据。最终为该植物的开
发、利用提供科学依据和物质基础。
[参考文献]
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(收稿日期:2011-08-10)
对照组
模型组
高剂量组
中剂量组
低剂量组
吲哚美辛组
组别 剂量(g/kg) 动物(只)
-
-
1.5
1.0
0.5
15.0
20
20
20
20
20
20
OD 值
31.8±25.7
157.3±72.1
95.9±62.3
106.3±55.3
112.5±52.1
65.3±45.6
抑制率(%)
-
-
39.1
32.4
28.5
58.5
P 值
-
-
<0.05
<0.05
<0.05
<0.01
表 1 飞燕草总黄酮对醋酸致毛细血管通透性增高急性炎症的影响
(上接第 14页)
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