全 文 ：ty under three concentrations． TGP displayed larger absorbed dose，larger Ka and shorter absorbed half life period (t1 /2)in duodenum and
jejunum than ileum and colon，indicating significant deviation by SPSS11． 5． Conclusions:The absorption mechanism of TGP in stomach
maybe passive diffusion mechanism． Duodenum maybe the main absorption place of TGP in intestines．
Key words total glucosides of paeony(白芍总苷) ;paeoniflorin;albiflorin;in situ perfusion;absorption kinetics
松潘乌头总碱的镇痛作用研究
*
张 政1，邓月婷1，王小芳1，任 远2，张喜民1＊＊
(1甘肃陇神戎发药业股份有限公司，兰州 730101;2甘肃中医学院，兰州 730000)
摘 要 目的:研究松潘乌头总碱的镇痛作用，并探讨其作用机制。方法:采用小鼠热板法和醋酸扭体法判断松潘乌头总碱
的镇痛作用效果;通过多种工具药实验及用 ELISA检测试剂盒方法测定单胺类递质含量。结果:松潘乌头总碱 3mg、6mg、12mg /kg
能明显提高小鼠痛阈、减少扭体次数;松潘乌头总碱 12mg /kg与氟哌啶醇有协同作用，纳洛酮不能对抗其的镇痛作用，利血平能部
分减弱其镇痛作用;大鼠口服松潘乌头总碱 9mg /kg在外周可显著降低单胺类递质含量，在中枢能显著升高 5-HT、DA含量，降低 NE
含量。结论:松潘乌头总碱有显著镇痛作用，该作用与调节脑内和外周血液中单胺类递质含量有关。
关键词 松潘乌头;镇痛作用;单胺类神经递质
松潘乌头为毛茛科乌头属植物松潘乌头(Aconitum sung-
panense Hand． -Mazz．)的根块。本品有大毒，具有祛风止痛、散
瘀消肿之功效，民间用于跌打损伤、风湿性和类风湿性关节炎
等疾病。其化学成分主要为多种生物碱，以二萜类生物碱为主。
文献报道松潘乌头总碱(含量 1． 14%)具有良好的镇痛作用，且
无耐受性和身体依赖性［1，2］。我们对松潘乌头进行提取精制纯
化，得总生物碱含量为 74． 35%松潘乌头总碱(total alkaloids of
Aconitum sungpanense Hand． -Mazz．) ，本研究对其镇痛作用及作
用机制进行研究。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 松潘乌头(Aconitum sungpanense Hand． -
Mazz．)采自甘肃天水，由甘肃林业职业技术学院任继文教授鉴
定。松潘乌头总碱的制备:取粉碎后过 60 目筛的松潘乌头药
材，用 10%碳酸钠溶液浸润，加入 5 倍量 75%乙醇于超声中提
取 30min，重复提取 3 次，合并提取液，减压浓缩得松潘乌头浸
膏。加入 10 倍量 2%硫酸溶液溶解松潘乌头浸膏，过滤后滤液
中加入氨水调 pH至 9 ～ 10，用乙醚:氯仿(3:1)混合溶液 1:1 萃
取滤液三次，合并萃取液，蒸干，即得。用酸性染料比色法测定
其总生物碱含量为 74． 35%。临用时以 5%吐温-80 溶液配制成
所需浓度。盐酸吗啡注射液(东北制药集团沈阳第一制药有限
公司，批号 130101-2) ;阿司匹林肠溶片(Bayer Schering Pharma，
批号 BJ10117)。
1． 2 动物 昆明种小鼠，SPF 级，体重 18 ～ 22g，实验动物质量
合格证号 SCXK(甘)2011-0001;SD 大鼠，SFP 级，体重 180 ～
220g，实验动物质量合格证号 SCXK(甘)2004-0006，均购自甘肃
中医学院实验动物中心。
1． 3 试剂 盐酸纳洛酮注射液(成都倍特药业有限公司，批号
121021) ，氟哌啶醇注射液(湖南洞庭药业股份有限公司，批号
A121005) ，利血平注射液(天津金耀氨基酸有限公司，批号
120491) ，5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)试
剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1． 4 仪器 Benchmark Plus 连续波长酶标仪(美国 Bio-rad 公
司)。
1． 5 方法
1． 5． 1 小鼠热板实验 将 120 只雌性小鼠随机分为 6 组，空白
组 ig 5%吐温-80 溶液，吗啡组 ip 10mg /kg 盐酸吗啡注射液，松
潘乌头高、中、低剂量组 ig 12mg /kg、6mg /kg、3mg /kg 松潘乌头
总碱溶液。以小鼠放在热板(55℃ ± 0． 5℃)上至舔后足所需时
间作为该鼠的痛阈值，挑选基础痛阈在 5 ～ 30s者供实验用。基
础痛阈应间隔 5min，测 2 次取其平均值计算。小鼠单次给药后
置于热板上测定痛阈值，最长测定时间不超过 60s。
1． 5． 2 醋酸扭体实验 将 100 只小鼠，雌雄各半，随机分为 5
组，即空白组、阿司匹林组、松潘乌头高、中、低剂量组。空白组
与阿司匹林组给药 30min后，松潘乌头高、中、低剂量组给药 2h
后，按 0． 1ml /10g给每只小鼠 ip 0． 6%醋酸溶液。观察各鼠反
应，记录 15min内扭体次数，计算药物对扭体反应的抑制率。
1． 5． 3 松潘乌头总碱镇痛作用与受体和神经递质的关系［3，4］
雌性小鼠 80 只，随机分为 8 组。痛阈测定方法同 1． 5． 1 项
下。各组处理方法如下:①ig 等容量 5%吐温-80 溶媒，0． 5h 后
测痛阈;②ip盐酸吗啡注射液，0． 5h后测痛阈;③ip盐酸吗啡注
射液 30min后 ip盐酸纳洛酮注射液，即刻测痛阈;④ig 松潘乌
头总碱溶液，0． 5h后测痛阈;⑤ ig 松潘乌头总碱溶液 30min 后
ip盐酸纳洛酮注射液，即刻测痛阈;⑥ip 氟哌啶醇注射液，0． 5h
后测痛阈;⑦ip 氟哌啶醇注射液，30min 后 ig 松潘乌头总碱溶
液，0． 5h后测痛阈;⑧ip 利血平注射液，4h 后 ig 松潘乌头总碱
溶液，0． 5h后测痛阈。
1． 5． 4 松潘乌头总碱对福尔马林所致的疼痛模型大鼠神经递
26 中药药理与临床 2014;30(6)
* 基金项目:兰州市科技局项目兰州市 2011 年创新人才团队培育计划(2011 － 1 － 140) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.06.019
质的影响［5］ 大鼠 40 只，雌雄各半，随机分为 4 组，即空白组、
模型组、吗啡组、松潘乌头组，给药容积为 1ml /100g。空白组、
模型组 ig 5%吐温-80 溶液，吗啡组 ip10mg /kg 盐酸吗啡溶液，
松潘乌头组 ig 9mg /kg 松潘乌头总碱溶液。前三组给药 40min
后，松潘乌头组给药 1h 后，于大鼠左足足底皮下注射 5%福尔
马林溶液 80μl(空白组给予相同体积的生理盐水)。注射福尔
马林 40min后，采集 2ml 静脉血，于 4℃条件下 l0000rpm 离心
l0min，收集分离血清，按试剂盒方法处理后于酶标仪上测定单
胺类递质含量。大鼠取血后，迅速在冰台上分离出大鼠脑组织，
精密称重，加入 9 倍量的生理盐水，于冰浴下快速玻璃匀浆，将
脑组织匀浆液转入离心管中，4℃条件下 15000rpm 离心 15min，
取上清液，同法测定单胺神经递质含量。
2 结果
2． 1 小鼠热板法 从结果中可以看出松潘乌头低、中、高剂量
组与空白组比较能显著提高痛阈值，有量效关系特征，随着剂
量的增加，镇痛效果越明显。且有时效关系特征，松潘乌头总碱
镇痛作用较吗啡起效较慢，峰值在给药后 4h，镇痛效果较吗啡
长，维持在 3h左右。
表 1 小鼠热板实验结果(珋x ± s，n = 20)
组别
剂量
(mg /kg)
痛阈(s)
基础痛阈 0． 5h 1h 1． 5h 2h 3h 4h 5h
空白对照 18． 83 ± 5． 00 19． 98 ± 10． 75 20． 29 ± 7． 56 21． 72 ± 10． 39 21． 61 ± 9． 01 22． 76 ± 7． 90 23． 49 ± 13． 28 23． 12 ± 7． 91
吗啡 10 18． 71 ± 4． 89 42． 51 ± 12． 66＊＊ 38． 72 ± 11． 74＊＊ 35． 64 ± 15． 25* 28． 02 ± 6． 61 27． 99 ± 15． 27 26． 93 ± 12． 58 28． 62 ± 11． 01
松潘乌头 3 19． 15 ± 5． 98 22． 73 ± 5． 67 23． 97 ± 12． 33 24． 16 ± 10． 32 25． 98 ± 13． 60 27． 17 ± 13． 16 30． 29 ± 14． 75* 25． 89 ± 12． 13
松潘乌头 6 19． 75 ± 4． 33 22． 15 ± 5． 12 24． 57 ± 13． 49 25． 33 ± 9． 87 27． 62 ± 15． 40 32． 14 ± 10． 31* 34． 62 ± 12． 17* 28． 45 ± 10． 53
松潘乌头 12 19． 73 ± 4． 98 21． 88 ± 5． 18 23． 52 ± 4． 42 27． 99 ± 15． 95 33． 62 ± 11． 87* 37． 30 ± 13． 16* 40． 13 ± 15． 63＊＊ 31． 51 ± 11． 83*
与空白组比较 * P ＜0． 05，＊＊ P ＜0． 01(下同)
2． 3 松潘乌头总碱对醋酸致小鼠扭体的影响 从结果可看出
阿司匹林和松潘乌头高、中剂量组与空白组比较，能极显著减
少小鼠扭体次数，均显示较好的镇痛效应。
2． 4 松潘乌头总碱与各种工具药合用对镇痛作用的影响 从
试验结果分析，纳洛酮对松潘乌头总碱的镇痛作用无明显影
响;利血平与松潘乌头总碱合用，能部分减弱其镇痛作用，说明
利血平能对抗松潘乌头总碱的镇痛作用，其镇痛作用与脑内单
胺类递质有关;氟哌啶醇对松潘乌头总碱的镇痛有协同作用。
表 2 松潘乌头总碱对醋酸致小鼠扭体反应的影响(珋x ± s，n = 20)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
扭体次数
(次 /15min)
抑制率
(%)
空白对照 20 16． 9 ± 11． 4
阿司匹林 200 20 8． 8 ± 8． 4＊＊ 48． 1
松潘乌头 3 20 10． 3 ± 9． 8* 39． 3
松潘乌头 6 20 5． 8 ± 4． 7＊＊ 65． 8
松潘乌头 12 20 3． 8 ± 3． 8＊＊ 77． 6
表 3 松潘乌头总碱与工具药合用给药后各组热板法实验结果(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg /kg)
给药
途径
痛阈(s)
0h 0． 5h 1h 1． 5h 2h
空白对照 ig 19． 60 ± 4． 50 21． 10 ± 7． 16 21． 65 ± 12． 09 22． 27 ± 9． 25 22． 63 ± 6． 92
吗啡 10 ip 20． 84 ± 6． 69 45． 87 ± 17． 12＊＊ 36． 93 ± 16． 87* 28． 43 ± 16． 10 26． 31 ± 15． 92
吗啡 +纳洛酮 10 + 5 ip + ip 19． 85 ± 5． 06 29． 99 ± 14． 71 31． 15 ± 16． 71 32． 86 ± 14． 95 31． 77 ± 12． 32
松潘乌头 12 ig 18． 85 ± 3． 69 26． 01 ± 16． 69 30． 79 ± 13． 66 34． 26 ± 14． 83 41． 77 ± 13． 08*
松潘乌头 +纳洛酮 12 + 5 ig + ip 19． 65 ± 4． 40 27． 53 ± 15． 43 35． 15 ± 14． 18 42． 27 ± 14． 77* 44． 82 ± 14． 40＊＊
利血平 +松潘乌头 0． 5 + 12 ip + ig 18． 71 ± 4． 93 25． 38 ± 15． 90 28． 88 ± 15． 11 36． 98 ± 16． 14 40． 20 ± 10． 91*
氟哌啶醇 0． 625 ip 20． 43 ± 5． 08 43． 00 ± 17． 73* 50． 79 ± 6． 92＊＊ 45． 16 ± 16． 17＊＊ 42． 42 ± 12． 21*
氟哌啶醇 +松潘乌头 0． 625 + 12 ip + ig 21． 37 ± 4． 33 42． 27 ± 13． 14* 49． 47 ± 4． 59＊＊ 47． 28 ± 7． 34＊＊ 45． 11 ± 7． 82＊＊
2． 5 松潘乌头总碱对福尔马林所致的疼痛模型大鼠神经递质
的影响
2． 5． 1 大鼠外周血中单胺类神经递质含量变化 松潘乌头总
碱可显著降低疼痛模型大鼠外周血中 5-HT、NE 和 DA 含量，吗
啡显著降低 NE含量，对 5-HT、DA无明显影响。
表 4 大鼠外周血中单胺类神经递质含量变化(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
5-HT
(ng /g)
NE
(ng /g)
DA
(ng /g)
空白对照 10 135． 3 ± 39． 4 387． 3 ± 28． 0 126． 3 ± 39． 4
模型对照 10 217． 1 ± 28． 0＊＊ 418． 4 ± 41． 5* 171． 5 ± 42． 2*
吗啡 10 10 201． 6 ± 43． 7* 388． 9 ± 31． 0 169． 5 ± 46． 0*
松潘乌头 9 10 163． 1 ± 80． 0 399． 2 ± 74． 7 145． 0 ± 56． 7
2． 5 大鼠脑中单胺类神经递质含量变化 松潘乌头总碱能显
著升高疼痛模型大鼠脑中 5-HT、DA含量，降低 NE含量。
表 5 大鼠脑中单胺类神经递质含量变化(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
5-HT
(ng /g)
NE
(ng /g)
DA
(ng /g)
空白对照 10 313． 1 ± 30． 4 303． 4 ± 89． 8 290． 2 ± 57． 5
模型对照 10 270． 3 ± 55． 5* 386． 4 ± 63． 9＊＊ 215． 8 ± 41． 0＊＊
吗啡 10 10 308． 3 ± 42． 5 323． 8 ± 91． 4 288． 9 ± 76． 6
松潘乌头 9 10 309． 1 ± 38． 4 358． 2 ± 73． 8* 232． 6 ± 67． 2
3 讨论
查阅松潘乌头药理药效相关文献，党月兰［1，6］，刘铭佩［7］，
李敏［7］等均用兰州大学药学院提供的松潘乌头总碱(含量为 1．
14%)进行实验研究，其小鼠口服 LD50为 8． 66 ± 0． 58mg /kg(p =
0． 95) ，有效剂量为 0． 5mg /kg ～ 3． 0mg /kg，可看出该工艺提取的
36中药药理与临床 2014;30(6)
松潘乌头用药安全性较低。我们制备的松潘乌头总碱含量显
著提高，同时安全性也明显提高，给药剂量为 LD50的 1 /40，即
3mg /kg时能显著提高小鼠痛阈、抑制小鼠扭体反应，实验结果
表明松潘乌头总碱对化学及物理性疼痛有良好的镇痛作用，效
果与等剂量吗啡相当，比吗啡起效慢但作用时间长。
机理研究显示，纳洛酮不能拮抗松潘乌头总碱的镇痛作
用，说明松潘乌头总碱不作用于阿片受体，其镇痛作用不是通
过阿片受体介导的。利血平为肾上腺素能神经抑制药，可阻止
肾上腺素能神经末稍内递质的贮存，将囊泡中的递质耗竭，当
神经冲动到达交感神经末梢时，就没有足够的递质被释放，由
于利血平能部分减弱松潘乌头总碱的镇痛作用，表明松潘乌头
总碱镇痛作用与脑内单胺类递质有关。氟哌啶醇为 D2，D3 和
D4 多巴胺受体拮抗剂，阻断脑内多巴胺受体，并可促进脑内多
巴胺的转化，阻断锥体外系多巴胺的作用较强，可加强中枢抑
制药如镇静催眠药、镇痛药的作用。氟哌啶醇对松潘乌头总碱
的镇痛有协同作用，说明其与中枢的多巴胺受体有一定的关
系。
5-HT即是神经递质，又能直接致痛，在疼痛过程中参与了
致痛和镇痛两方面的作用。中枢和外周的 5-HT 基本上分属两
个独立系统。在外周 5-HT 属于致痛物质，在组织损伤或炎症
情况下，血小板和肥大细胞会释放 5-HT，通过第二信使(环核苷
酸、钙)作用于局部和旁分泌，刺激感觉神经末梢而产生疼痛。
因其能提高伤害性感受器对缓激肽的敏感性，所以低浓度即可
致痛。在中枢 5-HT是下行抑制系统参与镇痛作用的重要神经
活性物质，其广泛分布于各脑区，以中缝核含量最高，其下行的
传导纤维在脊髓后角与内啡肽神经元发生突触联系，从而对伤
害性信息进行调制［9］。松潘乌头对外周 5-HT含量的降低有利
于减少 5-HT的致痛效应，减轻疼痛。NE 是一种神经递质，在
中枢其神经元主要位于脑桥的蓝斑及延髓网状结果的腹外侧
部分，NE虽然在脑和脊髓均有分布，但作用各不同，脊髓中的
NE有助于镇痛，而在脑内却起抑制镇痛效果的作用。松潘乌
头显著降低脑内 NE 含量，使 NE 在中枢对抗镇痛的能力［10］。
DA在中枢神经系统为一独立介质，主要集中在锥体外系的纹
状体、苍白球、黑质等部位，是锥体外系的一个重要介质。当
DA能系统的功能增强时则痛觉过敏，使吗啡的作用降低，反之
则增强。多巴胺不仅本身可以降低痛觉敏感性，而且能够和吗
啡协同发挥止痛效应［3］。另外，减轻疼痛可以激活脑内的奖赏
通路，增加伏核内多巴胺的释放［11］。松潘乌头在中枢能升高
DA含量，加强痛敏。
综上，松潘乌头总碱有良好的镇痛作用，其与氟哌啶醇有
协同作用，纳洛酮不能对抗松潘乌头总碱的镇痛作用，利血平
能部分减弱其镇痛作用，松潘乌头总碱通过对脑内和外周血液
中单胺类递质含量的调节来达到镇痛的目的，但至于 5-HT、NE
和 DA是如何参与痛觉信息传导的则需要进一步探讨。
参考文献
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影响． 中药药理与临床，2002;18(3) :11 ～ 14
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reinforcement through activation of mesolimbic reward-valuation circuitry．
Proceedings of the National Academy of Sciences，2012;109(50)∶ 20709 ～
20713
Analgesic effect and its mechanism of the total alkaloids of
Aconitum sungpanense Hand． -Mazz．
Zhang Zheng1，Deng Yueting1，Wang Xiaofang1，Ｒen Yuan2，Zhang Ximin1
(1 Gansu Longshenrongfa Pharmaceutical Industry Co．，Ltd．，Lanzhou 730101;
2 Gansu College of Traditional Chinese Medicine，Lanzhou 730101)
Objective:The paper aims to observe the analgesic of total alkaloids of Aconitum sungpanense，and preliminary studies mechanism of
action． Methods:The two kinds of analgesic experiments of hot plate tests and writhing tests were adopted in mice． Using tool drugs to meas-
ure analgesic effect of total alkaloids of Aconitum sungpanense and detect the content of monoamine neurotransmitter by ELISA detection kit．
Ｒesults:The total alkaloids of Aconitum sungpanense 3mg、6mg、12mg /kg significantly increased the pain threshold，reduce the writhing
times． The total alkaloids of Aconitum sungpanense 9mg /kg work on coordination with haloperidol，the analgesic effect can＇t be antagonized
by naloxone，it could weaken by reserpine． Ｒats oral The total alkaloids of Aconitum sungpanense 9mg /kg also can increase 5-hydroxy
tryptamine，dopamine of brainsteem，decrease norepinephrine acid which is the metabolic product of 5-hydroxy tryptamine significantly． Con-
clusion:The total alkaloids of Aconitum sungpanense has a prominent abirritation effect． It adjusts pain through regulating the content of
46 中药药理与临床 2014;30(6)
monoamine neurotransmitter of pain model rats induced by formaldehyde．
Key words Aconitum sungpanense Hand． -Mazz．(松潘乌头) ;abirritation;mechanism action;monoamine neurotransmitter
马齿苋提取物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
方新华
(浙江中医院大学附属广兴医院·杭州市中医院，杭州 310006)
摘 要 目的:研究马齿苋提取物(Portulaca oleracea extract，PLE)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机
制。方法:将动物随机分为假手术组、心肌缺血再灌注模型对照组、马齿苋提取物(10、20、40 和 80mg /kg)预处理组，术前 4 周开始
灌胃给药，每天一次。分别测定各组大鼠心肌梗死面积;检测血清中总抗氧化能力(T-AOC)和谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶
(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量;测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、过氧
化物酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量;采用 HE染色方法观察心肌组织病理学改变和 TUNEL染色观察心肌细胞凋亡状况。结
果:与模型对照组相比，马齿苋提取物(40、80mg /kg)预处理组大鼠心肌梗死面积均显著降低;马齿苋提取物(20、40、80mg /kg)预处
理组大鼠血清中 AST、CK、LDH、MDA含量显著降低、T-AOC显著升高，心肌组织中 SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高，MDA含量显著
降低，心肌组织病理学改变程度和细胞凋亡程度均明显较轻，并且该作用具有剂量依赖性。结论:马齿苋提取物能够有效减小心肌
梗死面积、抑制心肌组织病理学改变和细胞凋亡，提示马齿苋提取物对心肌缺血再灌注损伤具有剂量依赖性的保护作用，该作用可
能马齿苋提取物能够改善抗氧化酶活性、减轻自由基损伤有关。
关键词 马齿苋提取物;心肌;缺血再灌注损伤
急性心肌梗死是导致人类死亡主要疾病之一，溶栓、介入以
及建立冠脉旁路等方法是比较理想的治疗手段，能够挽救半暗带
心肌细胞、减小心肌梗死面积、改善心功能;但恢复血流而诱发的
大量自由基的生成，将对心肌细胞造成进一步的损伤，即再灌注
损伤［1］。马齿苋为马齿苋科草本植物马齿苋 (Portolaca olera-
cea)的干燥地上部分，首载于《神农本草经》，现代药理学研究发
现，马齿苋提取物具有抗氧化、抗血栓、降血脂等作用［2］，本实验
将通过建立大鼠心肌缺血再灌注模型，研究马齿苋提取物对心肌
缺血再灌注损伤的保护作用，并探讨其作用机理。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 取马齿苋(河北天道助康中药材有限公司，由
中药师张华鉴定为马齿苋科植物马齿苋)适量，粉碎，过 10 目
筛，取过筛细粉 50g，以 70%乙醇浸泡(料液比为 1:10)提取两
次，过滤、减压浓缩并挥干，得马齿苋提取物［3］，含量测定:以槲
皮素为对照品(中国药品生物制品检定所，批号:100081-
201204，含量:97． 4%) ，通过高效液相色谱方法进行检测，测得
其含量为 90． 6%，高效液相图谱见图 1。
图 1 马齿苋总黄酮液相色谱图
1． 2 动物 清洁级雄性 Wistar 大鼠，200 ～ 250g，许可证号:冀
医动字第 1304035 号，由河北省实验动物中心提供。
1． 3 试剂 AST试剂盒、CK 试剂盒、LDH 试剂盒、T-AOC 试剂
盒、MDA试剂盒、SOD试剂盒、GSH-Px 试剂盒、CAT 试剂盒(南
京建成生物工程研究所) ，TUNEL细胞凋亡原位监测试剂盒(北
京博奥森生物工程有限公司) ;红四氮唑(TTC，美国 Sigma 公
司)。
1． 4 仪器 DH-1 型动物人工呼吸机(浙江大学医学仪器有限
公司) ;BL-410 生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司) ;
BI-2000 医用图像分析系统。
1． 5 方法 将 120 只大鼠随机分为 6 组:假手术组;心肌缺血
再灌注模型组;马齿苋提取物 10、20、40 和 80mg /kg 预处理组。
手术前 4 周开始灌胃给药，假手术组和模型对照组分别给予等
体积的生理盐水，每天一次。以 10%水合氯醛腹腔注射麻醉(3
mg /kg) ，仰位固定，持续记录肢体二导联心电图;气管插管并连
接人工呼吸机，调节呼吸频率为 60 次 /分钟，潮气量 20ml /kg，
呼吸比 1． 5:1;于左侧第三、四肋间打开胸腔以暴露心脏，稳定
5min后，于左心耳下缘约 2mm处用无创动脉夹夹闭冠状动脉，
心电图显示 ST段抬高或 T波高耸者表示心肌缺血;缺血 30min
后，松开动脉夹，抬高的 ST段降低或高耸的 T 波得以恢复表示
心肌缺血再灌注模型造模成功;恢复血流灌注 60min后，腹主动
脉取血和心脏组织标本，-20℃保存待检。假手术组除不夹闭冠
状动脉外，其余操作与试验组完全一致。
1． 5． 1 心肌梗死面积的测定 缺血 30min、再灌注 60min后，取
心脏组织，-20℃冷冻 30min，由心尖部位向上切成 1mm 后的切
片，置于 1% TTC 溶液中，避光 37℃水浴 15min，正常组织为红
色、梗死区为灰白色，通过 BI-2000 医用图像分析系统计算心肌
组织梗死面积。
1． 5． 2 血清 AST、CK、LDH、MDA 含量以及 T-AOC 的检测 取
56中药药理与临床 2014;30(6)
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2014.06.020