全 文 ：第３０卷第５期
２０１２年１０月
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版）
ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＳＨＡＮＧＨＡＩ　ＪＩＡＯＴＯＮＧ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ）
Ｖｏｌ．３０Ｎｏ．５
　Ｏｃｔ．２０１２
文章编号：１６７１－９９６４（２０１２）０５－００６７－０５　 ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１－９９６４．２０１２．０５．０１４
收稿日期：２０１１－１２－０６
基金项目：中国烟草总公司云南省公司（２０１０ＹＮ４７）
作者简介：卢敏（１９８５－），男，博士生，研究方向：芳香植物研发与应用，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｕｍｉｎ１１１＠ｓｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；
姚雷（１９６３－）为本文通讯作者，女，博士，教授，博士生导师，研究方向：芳香植物研发与应用，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｏｌｅｉ＠ｓｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
柠檬草精油对烟草黑胫病的抑制活性研究
卢　敏１，韩智强２，李忠环２，詹莜国２，彭　云２，徐　云３，姚　雷１
（１．上海交通大学 农业与生物学院，上海２０１１０１；２．云南省烟草公司昆明市公司，昆明６５０２０５；
３．云南省农业科学研究院 环境资源研究所，昆明６５０２０５）
摘　要：研究了５种常见植物精油的抗烟草黑胫病活性，确定了植物精油的种类与浓度，为烟草黑
胫病防治的精油药剂的开发与应用提供理论依据。采用菌丝生长抑制法和茎秆接种法，分别评价
了植物精油对烟草黑胫病的体外和体内抑菌活性。结果表明，在体外条件下，柠檬草精油对烟草黑
胫病的抑制效果最好，具有浓度梯度抑制效应，最低抑菌浓度为３２０μｇ／ｍＬ；在体内条件下，柠檬草
精油６４０μｇ／ｍＬ时对烟草黑胫病预防与治疗效果最佳，病情指数分别为１６．６７和５６．７９，相对诱导
效果分别为８１．９３％和３８．４４％，与甲霜灵１９０μｇ／ｍＬ无显著性差异。柠檬草精油具有优越的体
外和体内抗菌活性，是有潜力的生物抗菌剂和杀菌剂，有望在今后的烟草黑胫病菌防治中进一步开
发利用。
关键词：柠檬草；精油；黑胫病菌；抑菌活性；防治效果
中图分类号：ＴＳ２７５．２；Ｓ４８２．２９２　　　　文献标识码：Ａ
Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ　Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　Ｏｉｌ　Ａｇａｉｎｓｔ
Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ
ＬＵ　Ｍｉｎ１，ＨＡＮ　Ｚｈｉ－ｑｉａｎｇ２，ＬＩ　Ｚｈｏｎｇ－ｈｕａｎ２，ＺＨＡＮ　Ｙｏｕ－ｇｕｏ２，
ＰＥＮＧ　Ｙｕｎ２，ＸＵ　Ｙｕｎ３，ＹＡＯ　Ｌｅｉ１
（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０１１０１，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｋｕｎｍｉｎｇ　Ｍｕｎｉｃｉｐａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ　ｏｆ　Ｙｕｎｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　Ｔｏｂａｃｃｏ　Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５００５１，Ｃｈｉｎａ；
３．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｙｕｎｎａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｋｕｎｍｉｎｇ　６５０２０５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｆｉｖｅ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｌａｎｔ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．
ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ，
ｗｈｉｃｈ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ａ　ｔｈｅｏｒｙ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｐ．
ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ．Ｈｙｐｈａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ａｓｓａｙ　ａｎｄ　ｓｔｅｍ　ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ
ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ｔｏ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ．
Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ，ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｆｉｖｅ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ，ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｍｏｓｔ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ
ａｇａｉｎｓｔ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｗｈｉｃｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｈｙｐｈａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎ　ａ　ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｎｎｅｒ，
ａｎｄ　ｔｏｔａｌｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｍｙｃｅｌｉａ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗｉｔｈ　ａ　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　３２０μｇ／ｍＬ．Ｉｎ　ｖｉｖｏ，６４０μｇ／ｍＬ　ｏｆ
ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｍｏｓｔ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｆｏｒ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｗｉｔｈ　ａ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎｄｅｘ　ｏｆ
１６．６７ａｎｄ　５６．７９ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　８１．９３％ ａｎｄ　３８．４４％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版） 第３０卷
ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　６４０μｇ／ｍＬ　ｏｆ　ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ａｎｄ　１９０μｇ／ｍＬ　ｏｆ　ｍｅｔａｌａｘｙｌ．Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ｈａｓ
ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｉｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ａｎｄ　ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ　ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｇｅｎｔｓ　ｗｈｉｃｈ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ
ａｓ　ｂｉｏｆｕｎｇｉｃｉｄｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｂａｃｃｏ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ；ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ；Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
　 　 烟 草 黑 胫 病 由 烟 草 疫 霉 ［Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ
ｐａｒａｓｉｔｉｃａ （Ｄａｓｔ．）ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ （Ｂｒｅｄａ　ｄｅ
Ｈａａｎ）Ｔｕｃｋｅｒ］引起，是世界烟草种植中危害最严
重的病害之一，同时也是中国烟草种植区的主要病
害。据不完全统计，平均每年因该病给烟草种植造
成的损失达１亿元以上［１］。目前烟草黑胫病防治药
剂主要是甲霜灵，但由于其作用位点单一、药剂选择
压力及天然抗性群体的存在［２－４］，使烟草疫霉抗药性
逐年增强，对烟草黑胫病的大范围发生难以起到控
制作用。因此，新型烟草黑胫病防治药剂的开发与
应用势在必行。
植物源农药作为生物农药的一类，其开发利用
对有害生物防治的前景十分广阔。植物源农药与化
学农药相比具有低毒、无残留、选择性高及不易使害
虫、病菌产生耐药性的特点，是一种与环境有良好相
容性的新型环保农药［５］。精油源于植物的果实、叶
片、茎秆、种子、花和根等，是植物次生代谢的香气成
分和挥发性产物，是一种重要的植物源农药。目前
已有文献报道植物精油对疫霉属病害抑制作用的研
究［６－８］。对烟草疫霉的防治，仅Ｂｏｗｅｒｓ等通过丁香
油和胡椒芥子油混合液、肉桂提取物以及合成肉桂
油对土壤中烟草疫霉菌丝、孢子囊及厚垣孢子的抑
制作用进行了相关报道［９］，但未在烟草体内进行相
关评价。
柠檬草、罗勒、椒样薄荷、茶树和桉叶在中国普
遍种植，材料来源广泛，精油的化学成分和抗细菌、
抗真菌活性已有大量报道［１２－１４］，但其体外和体内的
抗烟草疫霉活性尚未见评价。本研究通过体外菌丝
生长抑制试验筛选抑制烟草疫霉菌丝生长的有效精
油及浓度，并结合温室体内预防和治疗试验确定烟
苗病情指数，计算相对防效，以期为新型农药的开发
与应用奠定理论基础。
１　材料和方法
１．１　材料
１．１．１　供试菌株　
烟草黑胫病菌株由云南省农业科学研究院环境
资源研究所植物病理室提供。采用燕麦培养基
（ＯＡ），培养温度２６℃。
１．１．２　接种烟草材料　
主栽品种Ｋ３２６为黑胫病接种材料。采用漂浮盘
育苗，于玻璃温室内进行。期间剪叶２次，待苗龄
６０～７０ｄ时进行接种试验。
１．１．３　精油提取材料　
柠檬草、罗勒、椒样薄荷、茶树和桉叶鲜叶均采
自上海交通大学农业与生物学院植物园，采摘后平
铺于摊晾室，待阴干后作为精油提取材料。
１．１．４　药剂对照　
以市售药剂烯酰氟吗·甲霜灵锰锌５８％可湿
性粉剂２　０００倍（推荐浓度１９０μｇ／ｍＬ，ＪＳＬ２０００）药
液为阳性对照。
１．２　方法
１．２．１　精油提取　
分别准确称取５种植物材料５００ｇ，注入蒸馏水
３Ｌ，采用水蒸气蒸馏法提取精油，３ｈ后收集精油并
用无水Ｎａ２ＳＯ４ 干燥，置于棕色瓶内４℃低温保存。
１．２．２　精油乳化　
以吐温－８０为乳化剂，无菌双蒸水为溶剂配制
成浓度为４８ｍｇ／ｍＬ的精油药剂母液，吐温－８０终
含量为０．５％。
１．２．３　菌丝生长速率试验［１０］　
（１）５种植物精油抑菌活性初步筛选：取培养３
周的烟草疫霉平板，用打孔器沿其外围取５ｍｍ菌
丝块，将其均匀摆放于精油浓度为２４０μｇ／ｍＬ的
ＯＡ培养基内，每平板接种３个菌丝块，设置３个重
复，以０．５％ 吐温－８０为对照。培养３ｄ后采用十字
交叉法测定菌落直径，计算菌落生长抑制率，计算公
式如下：
抑制率（％）＝
对照菌落直径－处理菌落直径
对照菌落直径 ×
１００
　　（２）柠檬草、罗勒和椒样薄荷精油浓度梯度试
验：选取柠檬草、罗勒和椒样薄荷精油，分别配制含
精油浓度为４００、３２０、２４０、１６０、８０、４０、２０、１０μｇ／ｍＬ
８６
第５期 卢　敏，等：柠檬草精油对烟草黑胫病的抑制活性研究
ＯＡ培养基平板。具体接种及计算方法参照（１）。
１．２．４　温室预防与治疗试验　
（１）菌落茎秆接种法：参考Ｋｅｌｅｒ等［１１］方法并
稍加改进，具体步骤如下。
预防试验：取苗龄６０～７０ｄ烟苗，使用刀片轻
轻划伤茎基部表皮，立即进行基部药剂喷施处理，覆
棉花保湿，２４ｈ后将直径０．５ｃｍ菌丝块置于基部
划伤处。治疗试验：取苗龄一致的烟苗并使用刀片
轻轻划伤茎基部表皮，将直径为０．５ｃｍ的菌丝块置
于基部划伤处，并覆棉花进行保湿，２４ｈ后去除棉
花并对基部喷药处理，并再次覆盖棉花保湿。精油
药液浓度分别为１６０、３２０、４８０和６４０μｇ／ｍＬ，以
ＪＳＬ２０００为药剂阳性对照，０．５％ 吐温－８０水溶液为
空白对照。每处理６株烟苗，设置３个重复，于７ｄ
后记录病情。
（２）烟苗活体接种病情调查：以株为单位进行
调查，病害严重程度依据茎基部病斑扩展程度分级。
病害分级标准、调查方法及病情指数、相对诱导效果
计算按照中华人民共和国国家标准（ＧＢ／Ｔ　２３２２２－
２００８）的规定进行。病情指数和相对诱导效果计算
公式如下：
病情指数 ＝
Σ（各级病株或叶数）×该病级值
调查总株×最高级值
×１００
相对诱导效果（％）＝
对照病情指数－处理病情指数
对照病情指数 ×
１００
１．２．５　数据分析　
主要由Ｅｘｃｅｌ、ＳＰＳＳ统计软件完成。
２　结果
２．１　菌丝生长速率试验
２．１．１　５种植物精油抑菌活性筛选　
将直径５ｍｍ菌落置于精油浓度为２４０μｇ／ｍＬ
的ＯＡ培养基平板上，采用菌丝生长速率法，３ｄ后
进行统计。结果图１所示：５种植物精油对烟草疫
霉均有一定程度的抑制作用。其中，柠檬草和椒样
薄荷效果明显，菌落生长百分抑制率分别为９０．０６％
和８９．８６％，两者之间无显著性差异，但与另外３种
精油有极显著差异；罗勒精油次之，抑制率为
８４．４２％，与其他４种植物精油有极显著差异；茶树
和桉叶油效果最差，菌丝生长抑制率分别为３２．１％
和２７．３％。由此可见，柠檬草、椒样薄荷和罗勒精
油在２４０μｇ／ｍＬ浓度下抑菌效果较好，均在８０％以
上。
图１　５种植物精油抑菌药剂筛选
　　注：柱形图顶部相同小写字母表示５％无显著差异，相同大写字
母表示１％无极显著差异。
Ｆｉｇ．１　Ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ　ｓｃｒｅｅｎ　ｆｒｏｍ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｆｉｖｅ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ
ｏｉｌｓ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ
　　Ｎｏｔｅ：Ｍｅａｎｓ　ｗｉｔｈｉｎ　ａ　ｂａｒ　ｆｏｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ｓａｍｅ　ｓｍａｌ　ａｎｄ　ｌａｒｇｅ
ｌｅｔｔｅｒｓ　ａｒｅ　ｎｏｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｔ　０．０５ａｎｄ　０．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
２．１．２　柠檬草、罗勒和椒样薄荷精油抑菌浓度梯度
试验　
为进一步确定柠檬草、罗勒和椒样薄荷精油最
低抑菌浓度，将其分别配制成浓度为４００、３２０、２４０、
１６０、８０、４０、２０和１０μｇ／ｍＬ的ＯＡ培养基平板上，３
ｄ后进行统计。结果如图２所示：３种含精油药液平
板随其浓度的降低，对烟草疫霉的菌丝生长抑制率
均呈现逐渐降低的趋势。柠檬草、椒样薄荷和罗勒
精油分别在３２０、４００、４００μｇ／ｍＬ时可以完成抑制
菌丝生长。由此可见，柠檬草精油抗烟草疫霉效果
最好，最低抑菌浓度为３２０μｇ／ｍＬ。
图２　柠檬草、罗勒和椒样薄荷精油抑菌浓度梯度试验
Ｆｉｇ．２　Ｄｏｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ，ｂａｓｉｌ　ａｎｄ
ｐｅｐｐｅｒｍｉｎｔ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ａｇａｉｎｓｔ
Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ
２．３　温室烟草疫霉活体茎秆接种试验
２．２．１　预防试验　
预先对烟苗茎基部刀片划伤处喷施精油药剂处
９６
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版） 第３０卷
理，２４ｈ后进行菌丝接种，７ｄ后统计结果。结果如表
１所示：病情指数随柠檬草精油浓度的升高而呈现逐
渐降低的趋势，相对诱导效果呈现逐渐升高的趋势。
柠檬草精油６４０μｇ／ｍＬ时病情指数为１６．６７，与１６０、
３２０μｇ／ｍＬ 存 在 显 著 性 差 异，与 ４８０μｇ／ｍＬ 和
ＪＳＬ２０００（１９０μｇ／ｍＬ）无显著性差异；柠檬草精油６４０
μｇ／ｍＬ时相对诱导效果为８１．９３％，与１６０、３２０μｇ／
ｍＬ存在显著性差异，但与４８０μｇ／ｍＬ和ＪＳＬ２０００无
显著性差异。
２．２．２　治疗试验　
预先对烟苗茎基部伤口处进行菌丝接种，２４ｈ
后进行药剂喷施处理，７ｄ后进行结果统计。结果
如表１所示：病情指数随精油浓度升高呈现逐渐降
低的趋势，相对诱导效果呈现逐渐升高的趋势。柠
檬草精油６４０μｇ／ｍＬ病情指数最低，为５６．７９，与柠
檬草４８０μｇ／ｍＬ和ＪＳＬ２０００无显著性差异，与柠檬
草１６０、３２０μｇ／ｍＬ存在显著性差异，与１６０μｇ／ｍＬ
存在极显著差异；柠檬草６４０μｇ／ｍＬ相对诱导效果
最高，为３８．４４％，与柠檬草４８０μｇ／ｍＬ、ＪＳＬ２０００
无显著性差异，与柠檬草１６０、３２０μｇ／ｍＬ存在极显
著性差异。
表１　柠檬草精油对烟草疫霉的温室预防效应和治疗效应
Ｔａｂ．１　Ｔｈｅ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ
ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅｉｎ　ｔｈｅ　ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
浓度／
（μｇ·ｍＬ－１）
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
预防试验Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｔｒｅａｔ 治疗试验Ｃｕｒａｔｉｖｅ　ｔｒｅａｔ
病情指数
Ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎｄｅｘ
相对诱导效果／％
Ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ
ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
病情指数
Ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎｄｅｘ
相对诱导效果／％
Ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ
ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ
柠檬草精油
Ｌｅｍｏｎｇｒａｓｓ
ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ
１６０　 ３２．１０±４．２８ｄＣ　 ６５．２０±４．６４ｄＣ　 ８２．７２±２．１４ｂＢＣ　 １０．３３±２．３２ｂＢ
３２０　 ２５．９３±７．４１ｃｄＢＣ　 ７１．９０±８．０３ｃｄＢＣ　 ８０．２５±５．６６ｂＡＢＣ　 １３．０１±６．１３ｂＢ
４８０　 ２０．９９±２．１４ｂｃＡＢＣ　 ７７．２５±２．３２ｂｃＡＢＣ　 ５９．２６±３．６０ａＡＢ　 ３５．７６±４．０１ａＡ
６４０　 １６．６７±１．８６ａｂＡＢ　 ８１．９３±２．０１ａｂＡＢ　 ５６．７９±１６．７０ａＡ　 ３８．４４±１８．１０ａＡ
ＪＳＬ２０００　 １９０　 ９．２６±４．８９ａＡ　 ８９．９６±５．３１ａＡ　 ６１．７３±１３．１０ａＡＢ　 ３３．０９±１４．１０ａＡＢ
空白对照Ｃｏｎｔｒｏｌ　 ０．５％吐温 ９４．８３±４．４７ｅＤ　 ９４．８３±４．４７ｃＣ
　　注：同一列相同小写字母表示５％水平无显著差异，相同大写字母表示１％水平无极显著差异。
　　Ｎｏｔｅ：Ｍｅａｎｓ　ｗｉｔｈｉｎ　ａ　ｃｏｌｕｍｎ　ｆｏｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ｓａｍｅ　ｓｍａｌ　ａｎｄ　ｌａｒｇｅ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ａｒｅ　ｎｏｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ａｔ　０．０５ａｎｄ　０．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
３　讨论
柠檬草、椒样薄荷、罗勒、茶树和桉叶精油抑制
植物致病真菌活性已有大量研究［１２－１４］，它们对不同
致病菌的抑制活性具有较大差异。本研究发现，柠
檬草精油对烟草疫霉菌丝生长具有显著的抑制活
性。有研究证实植物精油的抑菌活性主要取决于它
的主要成分［１２，１５］。本研究中柠檬草精油主成分的
定性定量分析及其抑菌活性有待进一步研究。
精油体外抗植物致病菌试验已有很多报道，但
很少研究应用于活体植株中。本研究通过温室预防
和治疗试验发现柠檬草精油对烟草疫霉有一定的控
制作用。这或许归因于的柠檬草精油对烟草疫霉菌
丝生长的直接抑制作用，另外植物精油对真菌的孢
子囊、厚垣孢子和孢子发芽抑制活性也有大量报
道［９，１２］。另外本研究发现柠檬草精油对烟草黑胫病
的预防效果明显优于治疗效果，主要是由于喷施精
油药剂后其吸附于伤口、茎秆表面及土壤中，从而直
接阻止致病菌的感染；另外植物精油药剂喷施烟草
叶片后可提高烟草抗性［１６，１７］，间接抑制病原菌的
侵染。
４　结论
柠檬草适应性强，种植范围广，精油提取率高，
在中国广泛种植。另外柠檬草精油是一种兼有香
料、药用及工业原料物质，是一种环境友好型的天然
产物。本研究通过菌丝室内生长抑制试验和温室烟
草疫霉茎秆接种试验，发现柠檬草精油具有抑制菌
丝生长，活体接种减轻烟草病害症状的作用。因此，
柠檬草精油有希望进一步开发作为抗烟草疫霉的生
物杀菌剂进行商业化使用。
参考文献：
［１］　马国胜，高智谋，陈娟．烟草黑胫病研究进展［Ｊ］．烟草
科技，２００１，１７０（９）：４４－４８．
０７
第５期 卢　敏，等：柠檬草精油对烟草黑胫病的抑制活性研究
［２］　周明国．病原物抗药性［Ａ］／／中国农业百科全书（植
物病理学卷）［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９６：
４８－４９．
［３］　Ｆｅｒｒｉｎ　Ｄ　Ｍ，Ｋａｂａｓｈｉｍａ　Ｊ　Ｎ．Ｉｎｖｉｔｒｏｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｔｏ
Ｍｅｔａｌａｘｙｌ　ｏｆ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｃｉｔｒｉｃｏｌａ　ａｎｄ
Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ　ｆｒｏｍ　ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ　ｈｏｓｔｓ　ｉｎ
Ｓｏｕｔｈ　Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｄｉｓｅａｓｅ，１９９１，７５：
１０４１－１０４４．
［４］　Ｃｈａｎｇ　Ｔ　Ｔ，Ｋｏ　Ｗ　Ｈ．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ　ａｎｄ　ａｎ－
ｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　ｉｎ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｐａｒａｓｉｔｉｃａ：ｇｅｎｅｔｉｃ　ｎａｔｕｒｅ
ａｎｄ　ｕｓｅ　ｉｎ　ｈｙｂｒｉｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，
１９９０，８０：１４１４－１４２１．
［５］　李典鹏，张厚瑞，陈海珊．植物源农药的研究利用［Ｊ］．
广西植物，２００３，２３（４）：３７３－３７８．
［６］　张知侠．短毛独活精油提取及抑菌作用研究［Ｊ］．咸阳
师范学院学报，２００７，２２（２）：３３－３４．
［７］　Ｏｌａｎｙ　Ｏ　Ｍ，Ｌａｒｋｉｎ　Ｒ　Ｐ．Ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｏｆ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ａｎｄ
ｂｉｏｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｏｎ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｉｎｆｅｓｔａｎｓ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｉｎ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ａｎｄ　ｇｒｏｗｔｈ　ｃｈａｍｂｅｒ　ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｏｎ－
ｔｒ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００６，１６：９０１－９１７．
［８］　Ｙｅｇｅｎ　Ｏ．Ｕｓｅ　ａｎｄ　ｓｉｄｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｏｉｌ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｆｒｏｍＴｈｙｍｂｒａ　ｓｐｉｃａｔａｔｏ　ｃｏｎ－
ｔｒｏｌ　ｐｅｐｐｅｒ　ｂｌｉｇｈｔ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｃａｐｓｉｃｉ　Ｚｅｉｔｃｈｒｉｆｔ　Ｆｕｒ
Ｐｆｌａｎｚｅｎｋｒａｎｋｈｅｉｔｎ　ａｎｄ　Ｐｆｌａｎｚｅｎｓｃｈｕｔｚ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｄｉｓ－
ｅａｓｅ　Ｐｒｏｔ，１９９８，１０５：６０２－６１０．
［９］　Ｂｏｗｅｒｓ　Ｊ　Ｈ，Ｌｏｃｋｅ　Ｊ　Ｃ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ　ｐｌａｎｔ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｓ　ａｎｄ　ｏｉｌｓ　ｏｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ
ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ　ｉｎ　ｓｏｉｌ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｂｌｉｇｈｔ
ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｄｉｓｅａｓｅ，２００４，８８（１）：
１１６１－１１７１．
［１０］　袁宗胜，张广民，刘延荣，等．烟草黑胫病菌对甲霜灵
的敏感性测定［Ｊ］．中国烟草科学，２００１，１２（４）：９－１２．
［１１］　Ｋｅｌｅｒ　Ｈ，Ｐａｍｂｏｕｋｄｊｉａｎ　Ｎ，Ｐｏｎｃｈｅｔ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｐａｔｈｏ－
ｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｅｌｉｃｉｔｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　ｔｏｂａｃｃｏ
ｇｅｎｅｒａｔｅｓ　ａ　ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ａｎｄ　ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｄｉｓｅａｓｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌ，１９９９，１１：２２３－２３５．
［１２］　Ｓｏｙｌｕ　Ｅ　Ｍ，Ｋｕｒｔ　Ｓ，Ｓｏｙｌｕ　Ｓ．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ａｎｔｉ－
ｆｕｎｇａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｐｌａｎｔｓ
ａｇａｉｎｓｔ　ｔｏｍａｔｏ　ｇｒｅｙ　ｍｏｕｌｄ　ｄｉｓｅａｓｅ　ａｇｅｎｔ　Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉ－
ｎｅｒｅａ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｉｇｙ，
２０１０，１４３：１８３－１８９．
［１３］　Ａｎｔｈｏｎｙ　Ｓ，Ａｂｅｙｗｉｃｋｒａｍａ　Ｋ，Ｗｉｊｅｒａｔｎａｍ　Ｓ　Ｗ．Ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｐｒａｙｉｎｇ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌｓ　ｏｆ　Ｃｙｍｂｏｐｏｇｏｎ　ｎａｒ－
ｄｕｓ，Ｃｙｍｂｏｐｏｇｏｎ　ｆｌｅｘｕｓｕｓ　ａｎｄ　Ｏｃｉｍｕｍ　ｂａｓｉｌｉｃｕｍｏｎ
ｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ａｎｄ　ｓｔｏｒａｇｅ　ｌｉｆｅ　ｏｆ　Ｅｍｂｕｌ　ｂａｎａｎａ
［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
２００３，７８：７８０－７８５．
［１４］　胡忆雪，姚雷，黄健，等．茶树油对３种痤疮致病菌的
抑制作用研究［Ｊ］．上海交通大学学报（农业科学版），
２０１１，２９（１）：８８－９２．
［１５］　叶舟．林木精油对几种植物病原菌抑制作用的初步研
究［Ｊ］．江西农业大学学报，２００７，２９（６２）：９２８－９３２．
［１６］　陈启建，刘国坤，吴祖建，等．大蒜挥发油抗烟草花叶
病毒机理［Ｊ］．福建农业学报，２００６，２１（１）：２４－２７．
［１７］　Ｂｉｓｈｏｐ　Ｃ　Ｄ．Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｏｆ
Ｍｅｌａｌｕｃａ　ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ（Ｍｄｉｄｅｎ　＆Ｂｅｔｃｈｅ）ｃｈｅｅｌ（ｔｅａ
ｔｒｅｅ）ａｇａｉｎｓｔ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｍｏｓａｉｃ　ｖｉｒｕｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｓ－
ｓｅｎｔｉａｌ　Ｏｉｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９５，７：
櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅
６４１－６４４．
（上接第６６页）
［５］　Ｒｅｄｄｙ　Ｇ　Ｖ　Ｐ，ＵＲＳ　Ｋ　Ｃ　Ｄ．Ｍａｓｓ　ｔｒａｐｐｉｎｇ　ｏｆ　ｄｉａ－
ｍｏｎｄｂａｃｋ　ｍｏｔｈ　Ｐｌｕｔｅｌｌａ　ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ　ｉｎ　ｃａｂｂａｇｅ　ｆｉｅｌｄｓ
ｕｓｉｎｇ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｓｅｘ　ｐｈｅｒｏｍｏｎｅ［Ｊ］．Ｉｎｓｅｃｔ　Ｐｅｓｔ　Ｃｏｎ－
ｔｒｏｌ，１９９７，３９：１２５－１２６．
［６］　李武权，葛中霞，王太高，等．性诱剂与树枝把对棉铃
虫的诱蛾效果比较［Ｊ］．安徽农业科学，２００１，２９（５）：
６１７－６１９．
［７］　苏建伟，肖能文，戈峰．昆虫雌性信息素在害虫种群监
测和大量诱捕中的应用与讨论展［Ｊ］．植物保护，
２００５，３１（５）：７８－８２．
［８］　李惠明．蔬菜病虫害防治实用手册［Ｍ］．上海：上海科
学技术出版社，２００１：４４８－４５１．
［９］　李惠明．蔬菜病虫害预测预报调查规范［Ｍ］．上海：上
海科学技术出版社，２００６：３２１－３２７．
［１０］　宋昌琪，潘跃星，徐火忠，等．性诱剂在蔬菜害虫测报
上的应用［Ｊ］．昆虫知识，２００４，４０（１）：７７－７８．
［１１］　朱佩瑾，沈红然，李惠明，等．小地老虎性诱剂的筛选
及适用诱捕器的评价［Ｊ］．长江蔬菜，２０１０（２４）：．
１７