全 文 ：收稿日期:2009-04-14;　修订日期:2009-07-13
作者简介:夏侯国论(1975-),女(汉族), 江西吉安人, 现任赣南医学院讲
师 ,硕士学位 ,主要从事药物分析研究工作.
＊通讯作者简介:范小娜(1964-), 女(汉族),福建上杭人 , 现任赣南医学
院教授 ,学士学位 ,主要从事中草药分析工作.
寻骨风中微量元素的测定及其对药物配伍的影响
夏侯国论1 ,李小花 2 ,范小娜2＊
(1.赣南医学院 ·药学院 ,江西 赣州　341000;　2.赣南医学院·基础医学院 ,江西 赣州　341000)
摘要:目的 测定中草药寻骨风中 Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Ca的含量 。方法 样品经微波消解 , 采用火焰原子吸收法测定 Fe,
Cu, Zn, Mn, Mg, Ca的含量。结果 该方法快速 、简便 、准确 , 回收率为 99.07% ～ 101.05%, RSD为 0.250 3% ～ 0.967 6%。
结论 寻骨风中 Ca, Mg, Fe含量极高 ,不宜与四环素类药物配伍使用。
关键词:寻骨风;　火焰原子吸收光谱法;　微量元素;　药物配伍
中图分类号:R284.1　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)03-0749-01
　　寻骨风 HerbaAristolochiaeMolissimae为马兜铃科草本植物
绵毛马兜铃 AristolochiamollissimaHance的全草 , 别名清骨风 、猫
耳朵 、穿地节 、毛香 、白毛藤 、地丁香 、黄木香 、白面风 、兔子耳 ,具
有祛风除湿 、活血通络 、止痛的功能。用于治疗风湿痹痛 、疟疾 、
胃痛 、睾丸肿痛 、跌打伤痛 、外伤出血 、乳痈及多种化脓性感染。
药理实验证明其有抗肿瘤作用。 寻骨风中的主要有机成分已被
确定 , 但对其无机微量元素的研究尚未见报道。在对中草药治病
机理的研究中 , 微量元素的协同作用是不容忽视的 [ 1] 。测定中
药中微量元素的含量及相对比值能够为阐明中药的作用机理 ,探
讨中西药配伍提供一定的信息和理论依据 [ 2] 。 本文采用火焰原
子吸收光谱法对寻骨风中 Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Ca的含量进行了
测定 , 为分析寻骨风的药效与微量元素的关系提供实验依据。
1　仪器与试剂
TAS-990型原子吸收分光光度计(北京普析);Fe, Cu, Zn,
Mn, Mg, Ca空心阴极灯(威格拉斯仪器有限公司);NewHuman
Up900(韩国)超纯水器 , WX-4000型微波快速消解系统(上海
屹尧分析仪器有限公司)。
浓硝酸 、氯化锶均为优级纯;双氧水为分析纯;Fe, Cu, Zn,
Mn, Mg, Ca标准溶液 , 1 000 μg· ml-1(国家标准物质研究中
心);寻骨风采自江西赣南地区。
2　方法
2.1　样品制备 取寻骨风全草用超纯水淋洗 , 晾干 ,切成小段 ,置
于烘箱中 80℃烘干至恒重 , 研磨成细粉 , 装入称量瓶 , 置干燥器
中备用。准确称取样品 0.500 9 g, 加浓硝酸 5ml, 双氧水 0.5ml
放入微波消解罐中进行消解。消解采取控温多步 , 参数如下:①
110℃, 5.066 25 ×105Pa, 6 min, 300 W;② 130℃, 1.013 25 ×
106Pa, 8min, 500 W;③150℃, 1.013 25 ×105Pa, 10 min, 400 W。
消解结束后 , 冷却 ,缓缓放气 , 取出内罐 , 冷却后 , 摇匀 , 把消解液
用 1%HNO3溶液清洗 ,合并洗液定容至 50 ml待测。
2.2　样品测定
2.2.1　仪器工作条件 Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Ca均采用空气 -乙炔
火焰原子吸收光度法 ,各元素测定条件见表 1。
2.2.2　标准曲线 取 1 000 μg· ml-1的 Fe, Cu, Zn, Mn标准储备
液分别用 1%HNO3稀释并配制成相应标准溶液;取 1 000 μg·
ml-1的 Mg, Ca标准储备液用 0.1%SrCl2和 1%HNO3混合溶液稀
释并配制成相应标准溶液。各元素相应标准浓度见表 2。
表 1　仪器工作条件
元素 波长λ/nm
灯电流
I/mA
燃烧器高度
l/mm
负高压
V/V
光谱带宽
λ/nm
燃气流量
V/L· min-1
Fe 248.3 4.0 8 406.75 0.2 1.7
Cu 324.7 3.0 6 270.50 0.4 2.0Zn 213.9 3.0 6 316.75 0.4 1.5
Mn 279.5 2.0 6 390.00 0.2 1.7
Mg 283.3 2.0 6 291.50 0.4 1.5
Ca 422.7 3.0 6 286.50 0.4 1.7
表 2　标准溶液浓度 、线性方程及相关系数
元素 标准溶液浓度 /μg· ml-1 线性方程 相关系数
Fe 0.00　4.00　8.00　12.00　16.00 C=13.175 7A+0.612 2 0.999 9
Cu 0.00　0.02　0.04　0.08　1.00 C=6.279 1A+0.005 1 0.999 6Zn 0.00　0.10　0.20　0.30　0.40 C=1.914 2A-0.027 1 0.998 6
Mn 0.00　0.20　0.40　0.60　0.80 C=4.187 9A+1.052 2 0.997 7
Mg 0.00　1.00　1.50　2.00　3.00 C=14.471 7A-0.105 0 0.999 1
Ca 0.00　4.00　8.00　12.00　16.00 C=45.911 7 A-0.081 9 0.999 9
3　结果
3.1　测量结果 按表 1选定的仪器工作条件进行测定 , 各样品
重复测定 5次。测定 Ca、Mg时 ,采用稀释 10倍的样品。测定结
果表明 , 寻骨风中 Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Ca含量分别为 1 277.60 ,
9.68 , 26.95 , 57.80, 1 498.30, 13 916.95 μg· g-1。所有测定
结果均通过试剂空白校正。
3.2　回收率与精密度实验 在已知含量的样品中分别加入一定
量的 Fe, Cu, Zn, Mn, Mg, Ca的标准溶液测定其回收率及精密度 ,
结果见表 3。实验结果表明 ,加标回收率为 99.07% ～ 101.05%,
RSD为 0.250 3% ～ 0.967 6%, 说明该方法准确 、可靠。见表 3。
表 3　回收率及精密度
元素 样品含量C/μg· ml-1
加标量
C/μg· ml-1
总量测定
C/μg· ml-1 回收率(%) RSD(%)
Fe 12.799 12.00 24.811 100.05 0.250 3
Cu 0.097 1.00 1.094 99.73 0.967 6Zn 0.270 0.30 0.576 101.05 0.718 0
Mn 0.579 0.60 1.168 99.07 0.541 2
Mg 1.501 1.50 3.011 100.33 0.392 8
Ca 13.942 12.00 25.999 100.22 0.465 5
　　n=5
4　讨论
实验测量结果表明 , 与通常中草药相比 [ 3 , 4] , 寻骨风中各微
量元素含量都很高。其中 Ca、Mg、Fe的含量高出普通中草药的
十倍甚至百倍。钙离子对血液凝固 、细胞的粘着 、细胞膜功能的
维持有重要作用 ,能增加毛细血管壁致密度 , 降低其通透性 ,减少
渗出 [ 5] , 镁能帮助血液循环及舒缓神经 , 维持正常的肌肉及神经
活动。寻骨风具有活血通络 、消肿止痛的功效与其钙 、镁含量高
有关。铁主要存在于血红蛋白 、肌红蛋白和多种酶内 , 直接参与
能量释放过程 ,对免疫系统产生影响。缺铁可影响淋巴组织的发
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.3 时珍国医国药 2010年第 21卷第 3期
育和对感染的抵抗力。寻骨风能治疗化脓性感染可能与含铁量
高有直接联系。
当中药与西药配伍时 ,中药中的金属元素可能会与西药产生
配合物而使药效降低或产生毒副作用。寻骨风中含 Ca, Mg, Fe
丰富 , 故不能与含有酰胺基和多个酚羟基的四环素类抗菌素配伍
服用 , 以免形成难溶解的络合物 , 减少吸收 ,降低药效。
参考文献:
[ 1] 　廖自基.微量元素的环境化学及生物效应 [ M] .北京:中国环境科
学出版社 , 1992:231.
[ 2 ] 　王懿萍 ,张小荣 ,杨巧艳 , 等.中药微量元素与药效的关系 [ J] .陕
西中医 , 2006, 27(12):1573.
[ 3 ] 　韩金土 ,刘彦明 ,王　辉.原子吸收光谱法测定清热解毒类中草药
中的 11种微量元素 [ J] .光谱学与光谱分析 , 2006, 26(10):1933.
[ 4 ] 　薛国庆 ,韩玉琦 ,周生寿.火焰原子吸收法测定不同产地栽培黄芪
中 13种金属元素含量 [ J] .药物分析杂志, 2006, 26(11):1635.
[ 5 ] 　孙远明 ,余群力.食品营养学 [ M].北京:中国农业大学出版社 ,
2005:67.
收稿日期:2009-04-27;　修订日期:2009-12-30
作者简介:卫景沛(1971-),男(汉族),河北邢台人 ,现任航空工业中心医
院主治医师 ,硕士学位 ,主要从事脑血管病的临床工作.
灯盏细辛注射液对兔动脉粥样硬化
病变进展的抑制作用
卫景沛1 ,李　剑 1 ,史　哲 1 ,王拥军2
(1.北京航空工业中心医院 ,北京　100012;2.北京天坛医院 ,北京　100050)
摘要:目的 观察灯盏细辛对兔动脉粥样硬化病变进展的抑制作用。方法 将 35只雄性新西兰白兔随机分为正常对照组
(n=9)及高脂饮食组(n=26)。高脂饲料组以 1%胆固醇饲料 , 喂养 6周 , 6周后随机抽取 2只 , 观察主动脉组织病理形
态 , 以明确动脉粥样斑块形成。 6周时高脂组依据兔子体质量随机分为高脂组(高脂饮食)(n=12)、灯盏细辛组(5 ml/
kg/d腹腔注射)(n=12), 药物与高脂饮食同步干预。实验前 、6周 、14周取血清 ,测定血脂浓度(TC, TG, LDL, HDL)。 14
周时取胸主动脉行苏木精伊红染色(HE), 测定内膜 、中膜厚度;测粥样斑块面积;免疫组化测定 IL-6的阳性细胞百分
比 , 染色结果行定量分析。结果 高脂饮食各组血脂显著增高 ,主动脉见典型脂质条纹 , 局部斑块形成 ,病变处 IL-6显著
表达。与单纯高脂组相比 , 中药灯盏细辛治疗组主动脉内膜增厚显著减轻 , 粥样斑块面积缩小(P<0.05);灯盏细辛治
疗组能减低斑块中 IL-6百分数 , 两者之间差异有显著性;灯盏细辛不能降低血清中胆固醇水平。结论 中药灯盏细辛有
抑制内膜增生和动脉粥样硬化病变进展的作用 ,中药灯盏细辛不能降低血清中胆固醇水平。
关键词:动脉粥样硬化;　炎症;　白细胞介素 -6;　灯盏细辛
中图分类号:R285.5　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)03-0750-02
　　脑血管疾病(cerebrovasculardiscases, CVD)具有发病率 、死
亡率 、致残率和复发率高的特点 , 是导致全球人口死亡的三大疾
病之一。我国每年新发脑卒中患者约 200万人 , 每年死于脑卒中
的患者约 150万;存活的患者人数 600万 ～ 700万 [ 1] 。在所有脑
血管疾病中 , 缺血性脑血管疾病(ischemiccerebrovasculardiseases,
ICVD)占了大约 85%[ 2] 。动脉粥样硬化被认为是缺血性脑血管
病独立重要的危险因素 ,因此积极干预动脉粥样硬化形成是预防
缺血性卒中发生的重要措施。本实验研究灯盏细辛注射液对兔
动脉粥样硬化病变进展的抑制作用。
1　材料与方法
1.1　药品和试剂 总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋
白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)(中生北控生物科技股
份有限公司);IL-6单克隆鼠抗人抗体(SantCruz公司)、PV-
9000二步法免疫组化检测试剂盒(北京中杉试剂公司)。
1.2　动物分组和模型建立 健康新西兰纯种雄性大白兔 35只
(质量在 2.0 ～ 3.0 kg), 单独喂养并检疫 3 d备用 , 随机分为两
组:正常对照组为 A组:9只白兔 , 予正常饲料 、普通饮水饲养 14
周。余 26只给予 1%胆固醇饲料 , 普通饮水饲养 6周 ,随机处死
2只兔 ,近主动脉弓处取约 2 cm的血管 , 肉眼观察和病理形态学
检查 , 了解主动脉处斑块形成情况。然后依据 24只白兔体重随
机分组 , 依次为 B、C组。 B组为单纯高脂组 12只 ,每日上午给予
高脂饮食 , 普通饮水。 C组为灯盏细辛组 12只白兔 , 上午给予高
脂饮食喂养 ,同期给予灯盏细辛 5 ml/(kg· d)(腹腔注射)。
1.3　血脂检测 实验前 、 6周 、14周(实验结束时)耳缘静脉取
血 , 测量兔子血脂情况。
1.4　病理形态学观察 饲养 14周处死动物后细分离主动脉 , 观
察动脉大体形态 , 包括内膜是否光滑 、有无增厚及斑块形成等。
激光摄影 , 利用图像分析技术和分析软件 , 计算斑块面积及整个
内膜面积。取主动脉弓起始部约 3.0 cm动脉段 , 选取较长的一
段置液氮中保存 ,用于进行免疫组化染色。 较短的一段(约 1.0
cm)置入 4%多聚甲醛中固定 48 h,常规酒精脱水 , 石蜡包埋制成
蜡块。动脉的苏木精伊红(HE)染色 ,从每张 HE染色片上随机
选取 5个病变视野 ,图像分析仪测定内膜和中膜厚度 , 并计算内
膜 /中膜厚度比 , 取其平均值。
1.5　免疫组化 胸主动脉的常规二步法 IL-6免疫组化染色。
1.6　结果观察 阳性为棕黄色或棕褐色 , 并呈颗粒壮。每只家兔
观察 3张石蜡切片 , 每张切片随机选取 5个视野 ,所有切片采用
IM50显微摄像系统 、NiKON数码相机 、SimplePCI细胞图象分析
系统 、医学图象分析软件进行图象分析 , 计算阳性染色百分比 , 取
其均值 。
1.7　统计处理 所有指标数据都以 x±s表示 , 数据处理采用统
计软件 SPSS11.5分析。 各处理组间比较用 one-wayANOVA
方差分析 ,以 P<0.05为统计学上差异有显著性意义 , P<0.01
表示有非常显著性差异。
2　结果
2.1　血脂检测结果 实验结束时动物死亡及其他原因剔除后 , 每
组留动物 9只。各组之间体质量在实验开始时 、 6周及 14周时
无显著性差异(P>0.05)。实验开始时 , 各组之间血脂水平无差
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 3期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.3