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短萼黄连的生药学研究



全 文 :收稿日期:2012-02-14; 修订日期:2012-05-31
基金项目:安徽省教育厅科研项目( No. 20092RZ214) ;
安徽中医药高等专科学校( No. ZRKX1001)
作者简介:茆菁华( 1985-) ,女( 汉族) ,安徽滁州人,现任马鞍山市十七冶
医院药师,学士学位,主要从事医院药事管理工作.
* 通讯作者简介:刘学医( 1983-) ,男( 汉族) ,江苏东海人,现任安徽中医
药高等专科学校教师,硕士学位,主要从事中药鉴定学教学和科研工作.
短萼黄连的生药学研究
茆菁华1,刘学医2*
(1.安徽省马鞍山市十七冶医院 243000; 2.安徽中医药高等专科学校,安徽 芜湖 241000)
摘要:目的 对短萼黄连进行生药学研究,为其使用和鉴定提供依据。方法 从基源鉴定、形状鉴定、显微鉴定和理化鉴定
四个方面对短萼黄连进行研究。结果 短萼黄连生药学特征和黄连相似,但可以从性状和横切面特征区别,短萼黄连成
分和黄连一致,主要为小檗碱,含量为 5. 29% ~ 8. 52%。结论 生药学研究表明短萼黄连符合药典对黄连药材的要求,可
以作为黄连药用。
关键词:短萼黄连; 性状鉴定; 显微鉴定; 高效液相色谱
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 09. 048
中图分类号:R284. 2 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2012) 09-2219-02
黄连为常用药材,来源于毛茛科植物黄连 Coptis chinensis
Franch.,三角叶黄连 C. deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao 或云连 C.
teeta Wall的干燥根茎,有清热燥湿,泻火解毒等功效[1]。黄连和
三角叶黄连主要产于四川、湖北等地,多系栽培,是市场上黄连的
主流品种,云连主产云南,产量极少,市场上罕见。中国分布有黄
连属植物 6 种,其根茎均含有较多的小檗碱而可供药用。据王德
群等[2]考证,历史名药宣黄连,系主产安徽宣州地区的短萼黄连
C. chinensis Franch. var. brevisepala W. T. Wang et Hsiao,曾经备受
医家推崇,后因资源匮乏而变迁为上述黄连属植物。为开发这一
安徽历史名药,为其使用和鉴别提供依据,我们对短萼黄连进行
了生药学研究。
实验材料均为作者自采并经安徽中医药高等专科学校刘晓
龙研究员鉴定。
1 基源鉴定
短萼黄连 Coptis chinensis Franch. var. brevisepala W. T. Wang et
Hsiao,为毛茛科黄连属植物,分布于安徽、浙江、福建、广东、广西
等地。
为多年生草本;根状茎节结状,表面黄褐色,断面黄色,有多
数须根。叶基生,叶片稍带革质,卵状三角形,长 3 ~ 11 cm,宽
2. 5 ~ 9 cm,3 全裂,中央全裂片卵状菱形,有 3 ~ 6 对羽状深裂,侧
生全裂片作不等 2 深裂或全裂,各裂片又作羽状深裂,边缘有细
锐齿,两面无毛或上面叶脉被微毛;叶柄长 3 ~ 15 cm。花葶 1 ~ 2
枝,高 5 ~ 20 cm,有花 3 ~ 8 朵,苞片披针形,羽状深裂,花小,黄绿
色,萼片 5 片,卵状披针形,长约 4. 5 mm;花瓣 9 ~ 12 片,线状披
针形,长约 3 mm;雄蕊 12 ~ 20 枚;心皮 6 ~ 9 枚,花柱微外弯。蓇
葖果长 5 ~ 8 mm,约与果柄等长;种子数个,长圆形,长约 2 mm,
褐色。花期 1 ~ 2 月,果期 2 ~ 3 月。见图 1。
2 性状鉴定
本品为短萼黄连的根茎,表面有多数棕黄色须根或除去,残
存根痕。根茎圆柱形,长 3 ~ 6 cm,直径 2 ~ 5 mm,有时有弯曲,顶
端带有残留的叶柄基部,表面粗糙,随处有不规则的节结状隆起,
偶见“过桥”,节间长 3 ~ 8 mm。质地坚实,折断面不平整,有时
有空隙,木栓层呈灰黄棕色,向内为鲜黄色,髓部为灰黄棕色。气
微,味极苦。见图 2。
3 显微鉴定
3. 1 横切面 有木栓层、皮层、中柱鞘、韧皮部、形成层、木质部和
髓部组成。木栓层为数列木栓细胞;皮层较宽,石细胞单个散在,
可见根迹或叶迹维管束;中柱鞘纤维束断续环列,少数伴有石细
胞;维管束外韧型,韧皮部较窄,形成层不明显,不成环,木质部较
宽,木纤维发达,木射线宽窄不一;髓部由薄壁细胞构成,无石细
胞(见图 3)。拍摄条件(下同)OLYMPUS CX41 光学显微镜;三
星 SCC - 101AP彩色摄像机)。
图 1 短萼黄连植物
图 2 短萼黄连药材
图 3 短萼黄连根茎横切面
3. 2 粉末 短萼黄连粉末和黄连粉末相似。粉末黄色,气微,味
极苦。石细胞鲜黄色,类圆形或四角形,直径 30 ~ 81 μm,壁略增
厚,壁孔明显。多单个存在,少数两个在一起。中柱鞘纤维鲜黄
色,纺锤形,直径 20 ~ 30 μm,常 2 ~ 3 个,壁厚。木纤维近无色,
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL . 23 NO. 9 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 9 期
细长,直径 10 μm,壁薄,有稀疏点状纹孔。鳞叶表皮细胞淡黄色
或红棕色,细胞长方形,壁作连珠状增厚。木薄壁细胞类长方形,
壁略增厚。导管多为孔纹,短节状。见图 4。
4 理化鉴定
用 HPLC法测定短萼黄连根茎中小檗碱的含量[1]。
4. 1 仪器与试药 高效液相:Waters 600 检测器:Waters2489 UV /
Visible Detoctor工作站:N200 色谱柱:Waters C18。
试剂:乙腈、甲醇 色谱纯;其余均为分析纯;水为去离子水
(实验室自制)。
对照品:盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定所,纯度86. 8%
批号 110713 - 200911)。
药材样品:短萼黄连根茎,粉碎过 2 号筛备用。
图 4 短萼黄连显微图
4. 2 方法
4. 2. 1 色谱条件与系统适用性实验 以十八烷基硅烷键合硅胶
为填充剂,以乙腈 - 0. 05 mol /L 磷酸二氢钾溶液(50 ∶ 50) (每
100 ml中加十二烷基硫酸钠 0. 4 g,再以磷酸调节 pH 值为 4. 0)
为流动相;检测波长为 345 nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算
应不低于 5 000。
4. 2. 2 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量,精密称
定,制成每毫升含 90. 5μg 的溶液,即得。保存于 4℃冰箱中备
用。
4. 2. 3 供试品溶液的制备 取本品粉末约 0. 2 g,精密称定,置具
塞锥形瓶中,精密加入甲醇 -盐酸(100∶ 1)的混合溶液 50 ml,
密塞,称定重量,超声处理(功率 250 W,频率 40 kHz)30 min,放
冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续
滤液 2 ml,置 10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤
液,即得。
4. 2. 4 测定法 分别精密吸取对照品与供试品溶液各 10 μl,注
入液相色谱仪,测定,以盐酸小檗碱对照品的峰面积为对照,计算
小檗碱的含量。
4. 3 结果
4. 3. 1 对照品和样品 HPLC色谱图 见图 5 ~ 6。
图 5 盐酸小檗碱色谱图
图 6 短萼黄连根茎色谱图
4. 2. 2 样品小檗碱含量 测定了 5 个批次的短萼黄连根茎,其小
檗碱含量为 52. 90 ~ 85. 22 mg /g。
5 讨论
短萼黄连为黄连的变种,生药学特征和黄连十分相似。性状
上,短萼黄连多为单枝,黄连多聚集成簇;横切面特征近似,但短
萼黄连木栓层较窄,石细胞少,只有皮层偶见散在石细胞,髓部较
小;粉末特征几乎相同,短萼黄连石细胞少而散在;化学成分上,
比较黄连和短萼黄连色谱图,主要成分完全一致,通过测定其小
檗碱含量,幼嫩植株根茎小檗碱含量较低,最低为 5. 29%,多年
生植株根茎小檗碱含量较高,最高达到 8. 522%,按照药典 5. 5%
标准,多数短萼黄连根茎均达到药典标准,而多年生根茎的含量
远远超过药典标准,也高于市售黄连的小檗碱含量。
通过生药学研究,认为短萼黄连完全符合药典对黄连药材的
要求,可以作为黄连药用,建议药典将短萼黄连作为黄连来源之
一收录。本研究为短萼黄连的使用和鉴别提供了依据。
致谢:安徽中医药高等专科学校赵波、王启海老师在含量测
定中给予帮助!
参考文献:
[1] 中国药典编委会.中国药典,一部[S].北京:中国医药科技出版社,
2010:285.
[2] 王德群,彭华胜.历史名药宣黄连的兴衰沿革[J]. 中华医史杂志,
2008,38(3) :137.
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 9 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 9