全 文 ：刺苋根提取物化学成分分析及其排石活性初探
陈兰妹 唐灵芝 吴雅茗 林小华
厦门医学高等专科学校，福建 厦门 361002
【摘 要】 目的:对刺苋根分部位成分进行分析及对正丁醇提取部分进行排石活性研究。方法:采用不同极性溶剂对刺苋根提取后
进行成分分析;选取正丁醇提取部位，对乙醛酸诱导的 C57BL /6 小鼠连续灌胃 5d后，取心脏血测血浆肌酐 (CＲE)及血浆尿素氮 (BUN)
浓度;取左侧肾脏测肾组织钙含量。结果:刺苋的正丁醇部位提取物，在 25mg /ml及 50mg /ml两个剂量水平均能明显降低肾脏组织的钙含
量，确实具有明确的排石效果;同时能明显降低血浆 CＲE及 BUN含量，能够明显恢复肾脏排泄功能。结论:刺苋对乙醛酸所致的小鼠草
酸钙结石模型有明确的排石活性。
【关键词】 刺苋根;乙醛酸;C57BL /6 小鼠;排石
【中图分类号】Ｒ284. 1 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2016)05 － 0006 － 03
Chemical Composition Analysis of Amaranthus spinosus Linn． Extracts
and Evaluation of the Effect of Discharging Kidney Calculus
CHEN Lanmei TANG Lingzhi WU Yaming LIN Xiaohua
Xiamen Medical College，Xiamen 361002，China
Abstract:Objecive:This study was aimed to analyze the chemical compositions of Amaranthus spinosus Linn． extracts obtained
using various solvent systems． N － butanol extract was further evaluated for the discharging effect of kidney calculus． Methods:Ama-
ranthus spinosus Linn． extracts were obtained with solvent systems of different polarity and subject to chemical composition analysis． N
－ butanol extract was selected and administered daily by oral gavage to C57BL /6 mice for five continuous days． At the time mice were
removed from the study，the heart blood plasma was collected for creatinine (CＲE)and blood urea nitrogen (BUN)level，and the left
kidney tissue was collected for Ca2 + concentration． Ｒesults:N － butanol extract of Amaranthus spinosus Linn． clearly decrease the cal-
cium level in kidney tissue at 25mg /ml and 50mg /ml doses，demonstrating the calculus discharging effect． Meanwhile，the creatinine
(CＲE)and blood urea nitrogen (BUN)levels were also clearly decreased，indicating the recovery of kidney function． Conclusion:
The result clearly indicates n － butanol extracts of Amaranthus spinosus Linn． demonstrate discharging effect of kidney calculus in glyox-
ylic acid － induced calcium oxalate calculus mice model．
Key words:Amaranthus spinosus Linn．;glyoxylic acid;C57BL /6 mice;discharging effect of urinary calculus
刺苋为苋科苋属植物刺苋 (Amaranthus spinosus L)的
全草，分布于华东、中南、西南、陕西等地。刺苋甘、凉，
归肺、肝二经，具有凉血止血，清利湿热，解毒消痈等功
效［1］。在闽西民间被广泛用于肾结石的治疗，排石效果好，
治疗周期短。目前，国内外对刺苋的药理作用研究主要集
中在抗炎镇痛、利尿、退热、改善免疫、降血糖、保肝、
抗疟、抗菌、抗氧化等方面［2］，未见有关于刺苋排石活性
的实验研究报道。同时，关于刺苋治疗肾结石的临床资料
亦较少，文献复习仅见俞艳春［3］报道用刺苋根治疗肾结石
患者 76 例，排石率达 70%以上。
研究对刺苋根进行活性成分提取并进行化学定性分析，
再利用小鼠草酸钙肾结石模型，通过测定实验动物血浆肌
酐及尿素氮的含量、测定实验动物肾脏组织的钙含量，量
化评价刺苋对乙醛酸所致的 C57BL /6 小鼠草酸钙肾结石模
型的排石作用，以期为刺苋排石活性提供依据。
1 实验材料
1. 1 药物与试剂 刺苋采集于福建省漳平市和平镇野地，
由厦门医学高等专科学校中药鉴定鲍红娟副教授鉴定为
Amaranthus spinosus L.。乙醛酸 (Sigma － Aldrich)、尿素氮
试剂盒 (脲酶法)、肌酐试剂盒 (肌氨酸氧化酶法)、Ca试
剂盒 (微板法)均为南京建成生物工程研究所产品;其它
试剂均为国产分析纯。
1. 2 动物 6 ～ 8 周龄 C57BL /6 小鼠 24 只，购自北京维通
利华实验动物技术有限公司。
1. 3 仪器 Thermo Labsystems Multiskan Spectrum 酶标仪
(芬兰 Labsystems) ;BT125D 天平 (赛多利斯) ;PHS －
3CpH计 (上海仪电科学仪器股份有限公司) ;N － 1200B 旋
转蒸发仪 (EYELA) ;Freezone 6 冷冻干燥机 (LABCON-
CO) ;ULT2186 － 4V立式超低温冰箱 (Thermo)。
2 方法
2. 1 刺苋根提取物制备 刺苋根洗净干燥粉碎，用 60%乙
醇按生药比 1∶ 4 浸渍过夜后，加热回流提取 2 次，每次 2h。
醇提液经浓缩后，药液按 1∶ 1 比例用石油醚萃取分离 4 次。
石油醚不溶物按 1∶ 1 比例用乙酸乙酯萃取分离 4 次。石油
醚不溶物按 1∶ 1 比例用水饱和正丁醇加热回流 3 次。分别
得到石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液、正丁醇萃取液、水
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液共四部分提取物。分别减压蒸馏尽可能除去溶剂得浓缩
物，浓缩物用适量水热溶，冷冻干燥。分别得石油醚提取
部分浓缩物，乙酸乙酯提取部分浓缩物，正丁醇提取部分
浓缩物，水提取部分浓缩物。各部位提取浓缩物进行氨基
酸、多肽、蛋白质、糖、多糖、苷类、生物碱类、黄酮、
蒽醌类、强心苷、酚类、植物甾醇、三萜等物质的化学定
性试验［4］ (结果见表 2)。选取正丁醇部位提取物研究其对
小鼠草酸钙肾结石模型的排石作用。
2. 2 实验动物分组给药与取材 将 C57BL/6小鼠随机分成 4
组，分别为正常对照组、模型组、刺苋低剂量组 (25mg/mL)、
刺苋高剂量组 (50mg/ml)，每组6只，适应性喂养一周后进行
实验。参照Atsushi Okada［5 －6］及贾猛［7］的方法制作 C57Bl /6小
鼠草酸钙肾结石模型。各实验组动物根据体重以 0. 2ml /10g的
剂量，每日灌胃给予药物 (刺苋正丁醇提取物水溶液)或对
照物 (超纯水)，半小时后再根据体重以 0. 2ml /10g 的剂量，
腹腔给予造模剂 (80mg/ml 乙醛酸)或对照物 (生理盐水)。
具体给药设计见表 1。连续给药造模 5d，末次给药 24h后，乙
醚麻醉实验动物，取心脏血测血浆肌酐 (CＲE)及血浆尿素氮
(BUN)浓度;取左侧肾脏测肾组织钙含量。
表 1 实验动物给药方案设计
组别 灌胃 腹腔注射
阴性对照组 超纯水 生理盐水
模型组 超纯水 80mg /ml乙醛酸
刺苋低剂量组 25mg /ml刺苋正丁醇提取物 80mg /ml乙醛酸
刺苋高剂量组 50mg /ml刺苋正丁醇提取物 80mg /ml乙醛酸
2. 3 血肌酐、尿素氮的测定 实验小鼠全血，肝素抗凝，
2400r 离心 5min 后取上层血浆待测。按试剂盒操作步骤，
用肌氨酸氧化酶测定 CＲE含量，脲酶法测 BUN含量。
2. 4 肾组织钙含量的测定 左肾组织剥除包膜后称重，按
1∶ 4 重量 /体积比，加入超纯水后匀浆，匀浆液 120℃ 干燥
至样本炭化，加 0. 2mL 浓硝酸，80℃水浴消解得黄色清亮
消解液，十倍量稀释后按照试剂盒操作步骤测定组织钙
含量。
2. 5 统计学方法 数据采用 SPSS13. 0 软件进行统计分析，
数据进行正态性检验和发差齐性检验;组间数据采用 ANO-
VA方差分析，P ＜ 0. 05 为差异有统计学意义。
3 结果
3. 1 刺苋根各部位提取物化学定性分析结果 通过化学定
性实验对刺苋根的各部位提取物进行化学定性分析 (见表
2)可知，水提取部分含糖、多糖、苷类、有机酸类、生物
碱类等物质;正丁醇提取部位含有机酸类、强心苷类、甾
醇三萜类、生物碱类等物质;乙酸乙酯提取部分含黄酮类、
蒽醌类、植物甾醇三萜类、生物碱类等物质;石油醚提取
部分含黄酮类、植物甾醇类物质。
3. 2 血浆 CＲE及 BUN浓度、肾组织钙含量 模型组小鼠
血浆 CＲE、BUN浓度及肾组织钙含量均显著高于阴性对照
组小鼠。刺苋低剂量组及高剂量组血浆 CＲE、BUN 浓度及
肾组织钙含量均显著低于模型组小鼠，与阴性对照组小鼠
相比差异无统计学意义。提示刺苋正丁醇提取物的 25mg /
ml及 50mg /ml口服剂量均能显著减少乙醛酸导致的小鼠肾
脏草酸钙结石沉积，并对肾脏排泄 CＲE及 BUN有明显的改
善作用。实验结果见表 3 及图 1 ～ 3 示。
表 2 刺苋根各部位提取物化学定性分析
定性成分 试验方法
定性结果
水提取部分 正丁醇提取部分 乙酸乙酯提取部分 石油醚提取部分
氨基酸、多
肽、蛋白质
①茚三酮试验
②双缩脲反应
糖、多
糖、苷类
①Fehling反应
②α －萘酚试验
+
+
生物碱类
①pH试纸检查
②溴甲酚绿
+
+
+
+
黄酮类
①盐酸 －镁粉反应
②三氯化铝反应
+
+
+
+
蒽醌类
①碱性试验
②醋酸镁试验
+
+
强心苷类
①3，5 －二硝基苯甲酸
②碱性苦味酸试验
③间二硝基苯试剂
+
+
+
酚类
植物甾醇
三萜
①三氯化铁试验
②醋酐 －浓硫酸反应
③氯仿 －浓硫酸反应 +
+ +
生物碱
①碘化汞钾试验
②碘化铋钾试验
③硅钨酸反应
+
+
+
+
+
+
+
+
+
注:“ +”表示鉴别反应呈阳性;空格表示鉴别反应呈阴性
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表 3 刺苋正丁醇提取物对肾结石模型小鼠血浆 CＲE、BUN浓度以及肾组织 Ca含量的影响 (x ± s，n = 6)
组别 CＲE/umol /L BUN/mmol /L 钙含量 /nmol /g肾脏
阴性对照组 78. 22 ± 33. 88 8. 91 ± 1. 31 3. 73 ± 0. 63
模型组 149. 05 ±47. 07# 11. 79 ± 1. 01# 15. 33 ± 3. 18#
刺苋低剂量组 76. 55 ± 27. 24△ 9. 40 ± 1. 03△ 5. 53 ± 1. 21△
刺苋高剂量组 92. 15 ± 23. 70△ 9. 55 ± 0. 46△ 5. 29 ± 0. 77△
注:与阴性对照组相比，#P ＜ 0. 05;与模型组相比，△P ＜ 0. 05。
4 讨论
泌尿系结石是泌尿外科的常见病，其发病率居高不下，
结石引起的尿路梗阻可严重影响肾脏的泌尿功能，对患者
的生活质量产生严重影响。随着“体外冲击波碎石术 (ES-
WL)”的发展，尿路结石患者不需传统的开放式尿路取石
手术即可在损伤很小的情况下去除结石，解除病痛。但 ES-
WL仍可能会造成肾损伤，且碎石后的残余结石碎片也为新
结石成核提供机会从而造成结石复发。而中药对于停留时
间短暂、横径 ＜ 0. 6cm 的小结石有良好的治疗效果，其排
石率明显高于单纯西医治疗。因此寻找预防结石形成及复
发的有效药物具有积极意义。刺苋分布范围广泛，廉价易
得，在闽西民间被广泛用于肾结石的治疗，但目前关于刺
苋排石活性及其机制的研究报道极少，值得深入开展研究。
大约 3 /4 的泌尿系结石含有草酸钙的成分［8］，故研究
选取小鼠草酸钙肾结石模型，研究刺苋提取物的排石活性。
通过给药组与模型组实验数据相比较，结果显示刺苋的正
丁醇部位提取物，在 25mg /ml (相当于 36g 生药 /kg 体重)
及 50mg /ml (相当于 72g生药 /kg体重)两个剂量水平均能
明显降低肾脏组织的钙含量，具有明显的排石效果，同时
能明显降低血浆 CＲE及 BUN含量，能够明显恢复肾脏排泄
功能。
实验研究证实刺苋对乙醛酸所致的小鼠草酸钙结石模
型有明确的排石活性，但其排石的作用机制仍有待进一步
研究。Arul Amuthan 等［9］报道了刺苋具有利尿作用且其利
尿作用机理类似于噻嗪类利尿剂，而噻嗪类利尿剂是临床
上常用的一类含钙结石的治疗药物，考虑刺苋的排石作用
可能是通过其利尿作用实现，在此基础上刺苋对肾脏是否
存在其它途径的保护作用仍有待进一步研究证实。
参考文献
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［9］ Arul Amuthan，Bharti Chogtu，K． L． Bairy，et al． Evaluation of diuretic ac-
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Ethnopharmacology，2012 (140) :424 － 427．
(收稿日期:2015. 12. 16)
·8· 中国民族民间医药 2016年 3月第 25卷第 5期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 5