全 文 ：鲜黄连生物碱成分研究
于俊林　杨文娣　王朝辉
(通化师范学院药学系 ,通化 134002)
　　摘要　目的:研究鲜黄连所含主要有效成分。方法:多套展开剂薄层色谱法。 结果:鲜黄连所含的有效成分与
文献报道不同 ,不含小檗碱而含药根碱。
关键词　鲜黄连　TLC　小檗碱　药根碱
　　鲜黄连 Jef fersonia dubia (Max im)Benth.et
Hook.f.为小檗科多年生草本植物 ,广泛分布于吉
林省长白山区 ,其根茎具有清热解毒 、健胃止泻的作
用 ,本地朝鲜族医生将其当黄连用 ,故又称朝鲜黄
连 、常黄连 。文献报道〔1～ 3〕鲜黄连含有小檗碱 。国
内学者徐连成等亦用小檗碱作对照品用于鲜黄连药
材的鉴别〔4〕 。为开发利用鲜黄连资源 ,我们用薄层
色谱法对鲜黄连中的生物碱成分进行了研究 ,现将
结果报道如下。
1 　材料 、药品与仪器
鲜黄连:2002年 6月采自吉林省通化市郊区左
安村 , 经笔者鉴定为 Jef fersonia dubia (Maxim)
Benth.et Hook.f.。盐酸小檗碱对照品 、盐酸药根碱
对照品 、黄连(Coptis deltoide C.Y.et Hsiao)对照药
材均购自中国药品生物制品检定所 。所用化学试剂
均为分析纯。层析板为自制硅胶 G-CMC板 。
2 　方法
2.1 　对照品溶液制备　精密称取盐酸小檗碱对照
品 、盐酸药根碱对照品各约 10 mg ,分别用 1%盐酸
甲醇定容至 10 ml ,备用 。
2.2 　黄连对照药材溶液的制备　精密称取黄连对
照药材四号筛粉末约 3 g ,置索氏提取器中 ,用乙醚
回流提取 3 h ,药渣用 1%盐酸甲醇回流提取至无
色 ,回收甲醇 ,残渣用 1%盐酸甲醇定容至 10 ml ,作
为对照药材溶液。
2.3 　鲜黄连样品溶液的制备　取阴干的鲜黄连样
品 ,将地下部分与地上部分分开 ,分别粉碎成四号筛
粉末 ,按黄连对照药材溶液的制备方法操作 ,备用。
2.4 　薄层层析 　用定量毛细管分别吸取样品溶
液 、对照品溶液 、对照药材溶液各 2 ～ 4 μl ,点于同一
层析板上 , 分别用五套展开剂展开 , 展距 10 ～ 12
cm ,展开后在日光下及 365 nm 紫外光下检识 , 5套
展开剂分别是:Ⅰ号:正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)〔4〕;Ⅱ
号:乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶7∶1∶1)〔5〕;Ⅲ号:乙酸
乙酯-氯仿-甲醇-浓氨水-二乙胺(8∶2∶2∶1∶0.5)〔6〕;Ⅳ
号:乙酸乙酯-氯仿-甲醇-氨水(10∶2∶2∶2)〔7〕;Ⅴ号:苯-
乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨水(6∶3∶1.5∶1.5∶
0.5)〔8〕 。
3 　结果
图　五套展开剂展开的薄层层析图
1.鲜黄连地上部分　2.鲜黄连地下部分　3.盐酸药根碱　4.盐酸小檗碱　5.黄连对照药材
　　从图中 Ⅰ可以看出 ,药根碱对照品与小檗碱对
照品斑点的 Rf值完全相同 ,日光下均呈黄色 。在与
两对照品斑点 Rf值相同的位置上 ,黄连对照药材及
两种鲜黄连样品均有颜色与之相同的主斑点 ,这与
文献报道的相一致〔4〕 ,若没有药根碱作对照品 ,用
Ⅰ号展开剂展开的薄层层析图谱在日光下完全会作
出鲜黄连含有小檗碱的结论。但在 365 nm 紫外光
下 ,药根碱对照品斑点 、样品与药根碱对照品斑点相
同位置上的斑点均呈土黄色 ,而小檗碱对照品斑点 、
黄连对照药材与之相同位置上的斑点则均呈黄绿
色 ,二者有一定的区别 。
从图中 Ⅱ至Ⅴ可以看出 ,药根碱对照品斑点与
·727·中药材第 26 卷第 10期 2003 年 10 月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2003.10.017
小檗碱对照品斑点 Rf 值差距越来越明显。两种鲜
黄连样品在与药根碱对照品斑点相同位置上 ,总有
在可见光和紫外光下颜色均与之相同的主斑点 ,而
在与小檗碱对照品斑点相同位置上却无任何斑点 。
黄连对照药材在与两种对照品斑点相同位置上总有
颜色与之相同的斑点 。
参 考 文 献
1 　江苏新医学院.中药大辞典(下册).上海:上海科学技
术出版社 , 1986∶2569
2 　吉林省中医中药研究所.长白山植物药志.长春:吉林
人民出版社 , 1982∶441
3 　吉林省野生经济植物志编辑委员会.吉林省野生经济
植物志.长春:吉林人民出版社 , 1961∶84
4 　徐连成 ,等.鲜黄连的生药学鉴定.中药材 , 1992 , 15(4)
∶16
5 　王坤 ,等.双波长薄层扫描法测定黄檗中盐酸小檗碱的
含量.中国中药杂志 , 1994 , 19(12)∶712
6 　方忻英 ,等.国产黄连五种生物碱的含量测定.中国中
药杂志 , 1989 , 14(2)∶33
7 　王秀萍 ,等.盐酸小檗碱及其复方制剂含量测定方法研
究概述.中草药 , 1998 , 29(2)∶132
8 　国家药典委员会.中国药典薄层图谱.广州:广东科技
出版社 , 1995∶70
(2003-04-04收稿)
·药理·
川芎嗪对缺氧缺糖损伤的血管内皮
细胞周期和前列环素的影响
林　蓉　刘俊田　甘伟杰
(西安交通大学医学院药理教研室 ,西安 710061)
　　摘要　目的:研究在缺氧缺糖条件下 , 血管内皮细胞活性 、前列环素生成和细胞周期的变化及川芎嗪对它们的
影响 。方法:缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤 , MTT 比色法 、流式细胞仪观察川芎嗪对血管内皮细胞作用及细胞
周期的影响 ,放射免疫法测定细胞培养液中前列环素含量。结果:川芎嗪抑制缺氧缺糖引起的血管内皮细胞减少 ,
其作用主要使 S 期和 G2M 期细胞比率增加 , 促进损伤的血管内皮细胞释放前列环素。结论:川芎嗪具有保护缺氧
缺糖诱导血管内皮细胞损伤 ,其作用主要是通过增加 S 期和 G2M 期细胞和前列环素的水平。
关键词　川芎嗪　缺氧缺糖　细胞周期　血管内皮细胞损伤
　　内皮细胞不仅是血管内膜的重要屏障 ,而且具
有分泌功能。当血管内皮细胞受损时 ,其功能失调 ,
导致动脉粥样硬化 、高血压等心血管疾病的发
生〔1〕 。自由基 、活性氧 、H2O2 、脂质过氧化物 、缺氧
等均可引起内皮细胞的损伤。川芎嗪(ligust razine)
是从中药川芎总生物碱中得到的一种有效活性生物
碱 ,具有改善心血管功能 ,扩张小动脉 、静脉 ,抗血小
板聚集 ,改善微循环及抑制血管平滑肌增殖等药理
作用〔2、3〕。本文利用体外细胞培养的方法 ,研究川
芎嗪对缺氧缺糖诱导内皮细胞增殖周期和细胞内前
列环素产生的影响。
1 　试剂和仪器
1.1 　药品及试剂　川芎嗪为常州制药厂产品(批
号 991027),DMEM 培养基为美国 Gibco公司产品 ,
四氮唑蓝(MTT)为 Sigma公司产品 ,新生小牛血清
为杭州四季青生物工程材料研究所 , [ 125 I] 6-酮前列
腺素 F1α(6-keto-prostaglandin F 1α)。
1.2 　实验仪器　Shel-lab 2300 CO2 培养箱为美国
Sheldon 公司产品 , Olympus 相差显微镜为日本
Olympus公司产品 , 960 全自动酶标仪为美国 Me-
tertech 公司产品 , Epice Elite 流式细胞仪为美国
Coulter CO公司产品。
2 　方法
2.1 　内皮细胞培养 　人脐静脉内皮细胞系 ECV-
304引自美国组织培养库(ATTCC CRI-1998),培养
于 DMEM 培养液中 ,其中含超级小牛血清 10%、青
霉素(100 μ/ml)和链霉素(100 mg/L), 37℃下置
5%的 CO2培养箱中。
2.2 　MTT 比色法检测川芎嗪对缺氧缺糖损伤
ECV 活性的影响　取 ECV 2×104/孔 , 接种于 96
孔培养板内 ,在含 5%小牛血清的培养液中培养 24
h ,然后分正常对照组(DMEM 培养基常规培养)、缺
氧缺糖组(模型组)和缺氧缺糖加药物组(分别加入
0.1 ,0.3 , 0.9 mmol/L 川芎嗪),后两组培养基用预
·728· 中药材第 26 卷第 10 期 2003年 10 月