全 文 ：基金项目:四川省中医管理局课题 (编号:2003A06)
作者简介:王战国 , 男 , 1981年生;药学硕士;研究方向:中药品质评价与质量标准研究。
川木香质量标准研究
王战国　赖先荣　肖莹莹　张艺
(成都中医药大学民族医药研究所, 四川 成都　610075)
　　摘　要　目的:建立川木香的质量标准 。方法:采用硝酸银薄层和HPLC 法对川木香进行了定性 、 定
量分析。薄层色谱条件:2.5%硝酸银薄层板 , 展开剂环己烷-乙酸乙酯-丙酮 (8∶1∶1), 喷 5%香草醛-
浓硫酸溶液在 105℃烘至显色。定量分析:色谱柱为 C18柱 , 流动相为甲醇-水 (70∶30), 检测波长 220
nm 。结果:采用硝酸银薄层鉴别的分离效果明显优于硅胶G薄层。含量测定中去氢木香内酯的平均回收率
为97.51%;RSD 值为 2.38%。结论:所建立的定性鉴别和定量方法可用于控制川木香的质量 。
关键词:川木香;硝酸银;TLC;去氢木香内酯;HPLC;质量标准
中图分类号:R284.1;R931.5　　　文献标识码:A 文章编号:1004-0668(2006)01-054-03
Quality Standard of Radix Vladimiriae
WANG zhan-guo , LAI xian-rong , XIAO yin-gying , ZHANG-yi
(Ethnomedicine Institute of Chengdu University of TCM , Chengdu , 611730 , China)
Abstract:Objective:To establish the Quality Standard of Radix Vladimiriae.Methods:The quality was deter-
mined by TLC and the content was determined by HPLC.The conditions of TLC were:the 2.5% silver nitrate folium ,
developer agent:cyclohexane -ethyl acetate- acetone (8∶1∶1);Developer:the solution of 5% vanillic aldehyde -
concentrated sulfuric acid , displaying color in 105℃.The conditions of HPLC were:C18 column , methanol-water(70
∶30)as the mobile phase , wavelength set at 220nm.Results:The TLC indicated that in the silver nitrate folium , the
separate level of costunolide and dehydrocostuslactone was higher than that in the silica gel folium.In the content determi-
nation , the average recovery of dehydrocostuslactone was 97.51%(RSD =2.38%).Conclusion:This article estab-
lished the methods of TLC and HPLC for Radix Vladimiriae , which could be used for controlling the quality of Radix
Vladimiriae.
Key words:Radix Vladimiriae;AgNO3;TLC;Dehydrocostuslactone;HPLC;Quality Standard
　　川木香为菊科川木香属植物川木香 Vladimiria
souliei (Franch.)Ling.及灰毛川木香 Vladimiria
souliei (Franch.)Ling var.cinerea Ling.的干燥根[ 1] ,
为中医和藏医等民族医交叉用药品种[ 2] , 中药用川
木香为菊科川木香属植物川木香及灰毛川木香的干
燥根 , 藏药用川木香为川木香干燥根。
川木香具有行气止痛的功效 , 是治疗胃肠疾病
的常用药。川木香中主要含倍半萜内酯类化合物 ,
其中木香烃内酯和去氢木香内酯的含量较高 , 并且
二者的药理活性比较明显[ 3] 。本文首次以硝酸银薄
层法对川木香进行薄层分析 , 其薄层斑点分离度
高 , 同时以去氢木香内酯作为定量指标进行川木香
质量标准研究。
1　仪器 、试剂及材料
岛津LC-10Avp高效液相色谱仪(SPD-10Avp紫
外检测器 ,CTO-10Asvp柱温箱 ,Lc-10Atvp双泵 ,N2000
色谱数据工作站);Auto Science AS5150A超声波清洗器;
德国Sartorius公司BP211D ,BS200S电子天平。
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成都中医药大学学报
Journal of Chengdu University of TCM
2006 年 3月第 29 卷第 1期
Mar.2006 , Vol.29 , No.1
DOI :10.13593/j.cnki.51-1501/r.2006.01.020
薄层色谱硅胶 G (青岛海洋化工有限公司)。
硝酸银 (成都科龙化工试剂厂), 甲醇为色谱纯 ,
水为重蒸馏水 , 其它试剂均为分析纯。
去氢木香内酯 , 中国药品生物制品检定所提供
(111525-200404 , 供含量测定用);木香烃内酯 ,
中国药品生物制品检定所提供 (111524-200402 ,
供含量测定用);川木香对照药材 , 中国药品生物
制品检定所提供 (1091-200001 , 供鉴别用)。
川木香药材 , 13个样品:200501 ～ 200513 (成
都市荷花池药材市场购买 , 以购买顺序编号)。
2　方法与结果
2.1　硝酸银薄层鉴别
取川木香药材[ 4] , 粉碎 , 过 40 目筛 , 混匀 ,
称取约 1 g , 置具塞三角瓶中 , 加乙酸乙酯 20 mL ,
密塞 , 超声30 min , 滤过 , 取滤液 , 挥干溶剂 , 残
渣加甲醇 1 mL 使溶解 , 取上清液作为供试品溶液。
另取木香烃内酯 、去氢木香内酯对照品 , 加甲醇制
成每 1 mL 含 1 mg的溶液作为对照品溶液;取川木
香对照药材 , 称取约 1 g , 置具塞三角瓶中 , 加乙
酸乙酯20 mL , 密塞 , 超声 30 min , 滤过 , 取滤液 ,
挥干溶剂 , 残渣加甲醇 l mL 使溶解 , 取上清液作
为对照药材溶液。照薄层色谱法 (《中国药典》
2000年版一部附录 VI B)试验 , 吸取供试品溶液 5
μL , 木香烃内酯 、 去氢木香内酯对照品溶液各 5
μL , 川木香对照药材溶液 5μL , 分别点于同一以含
2.5%硝酸银的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G
薄层板上 , 以环己烷-乙酸乙酯-丙酮 (8∶1∶1)
为展开剂 , 置展开缸内 , 在 20℃左右展开 , 取出 ,
晾干 , 喷 5%香草醛-浓硫酸溶液 , 105℃烘至显
色 , 置可见光下观察 , 供试品色谱中 , 在与对照品
色谱相应的位置上 , 显相同颜色的斑点 。见图 1。
2.2　含量测定
2.2.1　色谱条件
色谱柱:DiamonsilTM钻石 (C18 , 250 mm ×4.6
mm , 5μm);流动相:甲醇 -水 (70∶30);流速:
1.0 mL/min;柱温:35℃;检测波长:220 nm;灵
敏度:0.08AUFS 。
2.2.2　色谱行为
测定波长的选择　取去氢木香内酯对照品的甲
醇溶液 , 在 200 ～ 700 nm 波长进行扫描测定 , 在
204 nm波长处有最大吸收 , 为末端吸收 , 此波长下
检测 , 由于流动相为甲醇-水系统 , 甲醇的截止波
长为 210 nm , 在流动相中甲醇的干扰较大 , 为减少
流动相的吸收干扰 , 结合仪器条件以及预试结果 ,
将测定波长选定为 220 nm 。
1～ 4　川木香药材　5　川木香对照药材
6　木香烃内酯对照品　7　去氢木香内酯对照品
图 1　川木香药材 TLC鉴别
　　对照品和样品色谱行为　将对照品与样品液各
10μL注入色谱仪 , 样品分离度以去氢木香内酯峰
计不低于 2.5 , 理论塔板数以去氢木香内酯峰计不
低于 6000 , 色谱峰见图 2和图 3。
图 2　去氢木香内酯对照品
图 3　川木香药材样品
2.2.3　线性关系的考察
第 1期 王战国等　川木香质量标准研究 · 55　 ·
精密称取去氢木香内酯对照品适量 , 加甲醇制
成每 1 mL 含 0.0214 mg的溶液 。
分别精密吸取上述去氢木香内酯对照品溶液 5
μL 、 7.5 μL 、 10μL 、 12.5 μL 、 15 μL 注入液相色谱
仪 , 记录色谱图及其峰面积积分值 , 以峰面积 (A)
为纵坐标 , 进样量 (C)为横坐标 , 进行回归 , 得
回归方程A=1962241.29C+145.00 , r=0.9999 , 线
性范围为 0.127 ～ 0.321μg 。
2.2.4　精密度试验
精密吸取去氢木香内酯对照品溶液 5 μL , 连续
进样 5次 , 测得峰面积积分值 RSD 为 0.91%。
2.2.5　提取方法考察
溶剂的选择:对甲醇 、 75%甲醇 、 无水乙醇 、
75%乙醇 、 50%乙醇进行试验 , 甲醇较好 , 选择甲
醇为溶剂 。
提取方法的确定:超声和水浴回流提取方法进
行试验 , 回流较好 , 选择回流法提取。
提取时间的考察:选择回流提取 30 min , 45
min , 60min进行试验 , 去氢木香内酯含量在 45min
时提取完全 , 故确定提取时间为 45 min。
2.2.6　稳定性试验考察
取样品 (批号 200506)供试液与去氢木香内酯
对照品溶液 , 于 0 h 、 1 h 、 2 h 、 4 h 及 8 h 分别进
样 , 峰面积积分值 RSD 分别为 0.77%和 1.74%。
2.2.7　重现性试验
取样品 (批号 200506)5份 , 分别按含量测定
项下方法测定 , 计算去氢木香内酯含量 , 含量 RSD
为1.19%。
2.2.8　回收率试验
分别取6份已知含量的样品 (批号 200506)约
0.25 g , 分成 3组 , 分别精密加入高 、 中 、 低 3组
剂量的去氢木香内酯对照品 (5.2 mg 、 6.5 mg 、 7.8
mg), 照样品测定项下方法测定 , 本品回收率在
95%-105%之间 , 平均回收率为 97.51%, RSD =
2.38%。结果见表 1。
表 1　川木香药材加样回收率试验结果
取样量
(g)
样品中去氢木香
内酯含量 (mg)
加入量
(mg)
测得总
量 (mg)
回收率
(%)
0.2503 6.49 5.2 11.51 96.64
0.2502 6.49 5.2 11.61 98.47
0.2563 6.64 6.5 12.91 96.45
0.2514 6.52 6.5 12.72 95.46
0.2513 6.51 7.8 14.22 98.76
0.2584 6.70 7.8 4.44 99.25
2.2.9　样品测定
取本品[ 5] , 粉碎 , 过 40目筛 , 取 0.5 g , 精密
称定 , 置烧瓶中 , 精密加入甲醇50mL , 称定重量 ,
回流提取 45 min , 放冷 , 称定重量 , 用甲醇补足减
失的重量 , 摇匀 , 滤过 , 取续滤液 1 mL 稀释到 10
mL的量瓶中 , 用微孔滤膜 (0.45 μm)滤过 , 作为
供试品溶液 。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶
液各 10 μL , 注入液相色谱仪 , 记录色谱图 , 计算 ,
即得。结果见表 2。
表 2　样品中去氢木香内酯含量测定 (n=2)
编号 样品产地 去氢木香内酯含量 (mg/ g)
200501 甘孜丹巴 18.55
200502 阿坝壤塘 19.27
200503 阿坝小金 28.71
200504 阿坝小金 28.27
200505 凉山木里 12.31
200506 阿坝小金 26.11
200507 阿坝小金 38.30
200508 阿坝小金 28.36
200509 凉山木里 10.83
200510 阿坝黑水 18.99
200511 甘孜炉霍 18.23
200512 阿坝金川 24.50
200513 阿坝小金 25.67
3　讨论
3.1　在薄层鉴别中选择普通硅胶 G板时 , 木香烃
内酯和去氢木香内酯分离不理想 , 有斑点重叠现
象;在用含有硝酸银的硅胶板中 , 木香烃内酯和去
氢木香内酯的分离度良好 。
3.2　在含量测定分析中 , 不同编号的药材的去氢
木香内酯含量差异较大 , 这可能是不同产地药材质
量不同的具体体现。
参考文献
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化学工业出版社 , 2005:25
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报 , 2001 , (32)2:146
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研究 [ J] .成都中医药大学学报 , 2001 , (24)2:35-37
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烃内酯和去氢木香内酯的含量 [ J] .西北药学杂志 ,
2000 , 15 (1):250
(收稿日期:2005-09-03)
· 56　 · 成都中医药大学学报 2006 年第 29 卷