免费文献传递   相关文献

野木瓜片镇痛抗炎作用的实验研究



全 文 :野木瓜片镇痛抗炎作用的实验研究
张孝友 谭毓治1 赵诗云2
(深圳市恒祥天益生物技术有限公司 ,广东 518067;
 1 广东药学院药理教研室;2江西省中医药研究所)
  摘 要 野木瓜对小鼠热板法和扭体法疼痛模型和大鼠三叉神经痛模型均有显著镇痛作用;
对小鼠毛细血管通透性增高 、小鼠二甲苯耳廓炎症 、大鼠蛋清性足肿胀均有显著抑制作用。
关键词 野木瓜片;镇痛作用;抗炎作用
中图号 R 285.5
  野木瓜片具有祛风止痛功能 , 用于治疗三叉神
经痛 ,坐骨神经痛 , 风湿关节痛等痛症。为探讨其药
理作用 ,我们对其镇痛抗炎作用进行了实验研究。
1 实验材料
1.1 药物 野木瓜片 , 江西余江制药厂生产 , 批号
960301 , 本品为中药干浸膏片 , 每片含野木瓜干浸膏
0.4g ,实验时 , 加蒸馏水制成每毫升含 0.4g 干浸膏
的混悬液 , 备用。 本文野木瓜片量均以干浸膏的量
计;哌替啶注射液 , 宜昌制药厂 , 批号 940904 , 每 2ml
含 10mg。;阿斯匹林胶囊 , 福建闽清制药厂 , 批号
940708。
1.2 动物 昆明种小鼠 , Wistar 大鼠 , 均由江西省
医学实验动物中心提供 , 其体重 、性别 、数量分别见
各具体实验项下。
2 方法和结果
2.1 对小鼠热致痛的影响(热板法)[ 1] 。
在(55±0.5)℃的恒温水浴中 , 置烧杯 1 只 , 每
次取雌性小鼠 1 只 , 放入烧杯内 , 记录小鼠自放入烧
杯至出现舔后足所需时间(s), 作为该鼠正常痛阈
值。凡 30s 不出现舔后足者 , 弃之不用。取合格雌
性小鼠 40只 ,体重 19 ~ 21g , 随机均分 4 组 , 分别按
表 1 给予供试液 , 给药后 30 、60、90min 测定各鼠痛
阈值 , 并计算用药后痛阈提高百分率。结果见表 1。
表 1 野木瓜片对小鼠热致痛(热板法)的影响(n =10 , x ± s)
组 别 剂量/(g/ kg)
给药前
痛阈/ s
给药后痛阈值/ s
30min 60min 90min
痛阈提高率%
30min 60min 90min
NS - 12.8±2.7 15.4±3.2 15.9±1.9 14.2±3.8 20.3 24.2 10.9
野木瓜片 0.80 13.5±3.6 27.0±7.3** 21.5±3.1** 17.5±4.0 100.0 29.3 29.6
野木瓜片 0.40 13.0±3.3 20.0±3.8**# 19.0±4.9 16.5±1.6 53.8 46.2 26.9
哌替啶  0.025 13.7±2.9 28.1±7.6** 22.5±5.3** 19.4±3.3** 105.0 64.2 41.6
  与 NS 比较 :*P <0.05;**P <0.01;与哌替啶比较:#P < 0.05;##P <0.01
  表 1 说明 ,热板法镇痛实验表明野木瓜片对小
鼠有非常显著的镇痛作用。
2.2 扭体法镇痛实验
小鼠 40 只 , 雌雄不拘 , 体重 19 ~ 21g , 随机均分
4 组 , 各组小鼠按表 2 给予供试液 ,给药 30min后 , 各
鼠腹腔注射 0.6%乙酸溶液 0.2ml/只 , 观察注射乙
酸后 30min 内出现扭体反应次数及出现扭体反应的
时间 ,并计算镇痛的百分率。结果见表 2。
2.3 对三叉神经痛的影响[ 2]
大鼠 40 只 , 240 ~ 260g , 雌雄不拘 , 随机均分 4
组 , 按表 3 给予供试液 , 给药后 1h(哌替啶注射
30min), 乙醚麻醉 , 腹位固定 , 头颈部剪毛 , 切开皮
肤 , 分离肌肉 ,暴露枕骨及第一颈椎间的硬脑膜 , 以
微量进样器注射新配制的青霉素 G 钾(25 万 iu/ ml
溶液 3μl), 在大鼠的脑闩左下方约 1mm 处 , 相当于
三叉神经脊束核尾侧部缓慢注入 , 缝合切口 , 置笼内
195广东药学院学报(ACAD J GCP) 1998 , 14(3):195~ 196
观察。以大鼠尖叫 、甩头及左右肢快速抓同侧面部
的次数之和为发作次数 , 记录大鼠翻正反射恢复后
40min 内总发作次数 , 结果列于表 3。
表 2 野木瓜片扭体法镇痛实验结果(n =10 , x ± s)
组别 剂量/(g/ kg) 扭体次数 扭体出现时间/ min 镇痛率%
NS  -  41.2±17.6 3.6±2.4 
野木瓜片  0.8 24.0±11.1*# 8.9±2.7**## 41.7
BH〗野木瓜片  0.4 26.5±10.8## 5.5±1.7## 35.7
哌替啶  0.025 8.6±5.6** 18.3±5.2** 79.4
   与 NS 比较 :*P <0.05;**P <0.01;与哌替啶比较:#P <0.05;##P <0.01
  从表 2 可见 ,野木瓜片扭体法镇痛实验表明 , 该
药有显著的镇痛作用但不及哌替啶。
表 3 野木瓜片对大鼠三叉神经痛的影响( x ±s)
组 别 鼠数 剂量/(g/ kg) 总发作次数
NS 10  -  261.8±63.7  
野木瓜片 10  0.80 122.6±20.3**##
野木瓜片 10 0.40 155.4±21.5**##
哌替啶 10 0.025 30.9±17.3** 
  与 NS 比较 :*P <0.05;**P <0.01;
与哌替啶比较:#P <0.05;##P <0.01
表 3说明 ,野木瓜片对大鼠三叉神经痛有非常
显著的镇痛作用 ,但不及哌替啶。
2.4 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[ 3]
小鼠 40 只 , 雌雄不拘 , 体量 18 ~ 20g , 随机均分
4 组 , 分别给予供试液 , 给药后 1h , 各鼠尾静脉注射
伊文斯蓝(2%)0.1ml/只 , 并同时腹腔注射 0.6%乙
酸 0.2ml/只 , 20min 后 , 断头处死小鼠 ,剪开腹腔 , 用
蒸馏水冲洗数次 , 收集冲洗液 , 调整体积为 10.0ml ,
离心(1000r/min)5min , 用 UV-120-01 型紫外-可见
分光光度计在 590nm 处测定吸收度。结果列于表
4。
表 4 野木瓜片对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
组 别 鼠数 剂量/(g/ kg) 吸收度( x ± s)
NS 10  -  0.272±0.039
野木瓜片 10 0.80 0.132±0.055**
野木瓜片 10 0.40 0.193±0.048**#
Asprin 10 0.30 0.138±0.056**
  与 NS 比较 :*P <0.05;**P <0.01;
与 Asprin比较 :#P <0.05;##P0.01
  表 4 说明 , 野木瓜片大 、小两个剂量组对小鼠腹
腔毛细血管通透性增高均有显著的抑制作用。
2.5 野木瓜片对小鼠二甲苯耳廓炎症的影响[ 4]
小鼠 40 只 ,雌雄兼用 , 体重 20 ~ 22g随机分成 4
组 , 分别按表 5 给予供试液 , 给药 45min 后以二甲苯
棉球接触小鼠右耳 5s , 15min 后处死小鼠 , 以直径
5mm 打孔器将小鼠双耳同部位等面积切下 , 扭力天
平称重 , 以左耳为 100%, 计算右耳重量的百分率 , 结
果列于表 5。
表 5 野木瓜片对小鼠廓二甲苯炎症的影响
组 别 鼠数 剂量/(g/ kg)右耳重量百分率%
NS 10 - 179.1±15.5
野木瓜片 10 0.80 126.7±12.8**
野木瓜片 10 0.40 145.2±13.4**##
Asprin 10 0.30 123.3±5.4**
  与 NS 比较 :*P <0.05;**P < 0.01;
与 Asprin比较 :#P <0.05;##P <0.01
表 5 说明 , 野木瓜片大 、小剂量组对小鼠二甲苯
耳廓炎症均有非常显著的抑制作用。
2.6 野木瓜片对蛋清所致大鼠足肿胀的影响[ 3]
取 Wistar 大鼠 40 只 , 雌雄兼用 , 体重 180 ~
200g ,随机分成 4 组 , 给药前先测定各鼠右后足跖的
体积 , 采用毛细管放大装置测定足体积。按表 6 给
予供试液 , 给药后 30min , 于右后足跖皮下注射新鲜
鸡蛋清 0.05ml/只 , 分别测定致炎后 0.5 、1、2 、4 、6h
大鼠足跖体积 , 计算足肿胀百分率 ,结果列于表 6。
表 6 说明:野木瓜片对大鼠蛋清性足肿胀有显
著的抑制作用。在 1 、2 、4 、6h 作用不及 Asprin。
(下转第 198 页)
196 广东药学院学报(ACAD J GCP) 1998 , 14(3)
表 2 样品含量测定结果
批  号 含量(标示量%)
B2704 100.7
B2724 101.1
B2734 101.3
B279 99.8
1.6 回收率试验
精密称取依曲替酯对照品适量 , 加入一定量已
知浓度的样品中 , 按样品测定项下方法操作 , 根据上
述回归方程计算 , 求得平均回收率为 100.14%, RSD
为 0.33%。结果见表 3。
表 3 加样回收率试验结果
样品测得量/ mg 对照品投入量/ mg 总测得量/ mg 对照品测得量/ mg 回收率%
7.18 10.36 17.56 10.38 100.19
7.02 10.44 17.51 10.49 100.47
7.02 10.21 17.20 10.18 99.70
3.76 13.43 17.25 13.49 100.44
4.78 12.78 17.55 12.77 99.92
2 讨论
2.1 原法采用乙酸乙酯避光操作提取 5 次(每次
10min), 再用比色法测定 , 操作繁琐 , 且往往由于提
取不完全 ,结果偏低 , 重现性差。本法简便 、快速 、准
确 ,重现性好。
2.2 本品见光易分解 , 但样品溶液于棕色瓶中室温
放置 6h 后测定 , 与立即测定相比较 , 主峰面积几乎
无变化 , 也无明显杂质峰出现。
2.3 改变流动相比例对保留时间有影响 , tR随甲醇
比例增大而减小。
参考文献
1 王泽民主编.当代结构药物全集.北京:科学技术
出版社 , 1993.1821
[ 收稿日期 1998-04-24]
(上接第 196 页)
   表 6 野木瓜片对蛋清所致大鼠足肿胀的影响(n =10 , x ± s)
组 别 剂量/(g/kg)
致炎后不同时间肿胀率%
0.5h 1h 2h 4h 6h
NS - 69.9±19.5 66.9±20.0 65.9±21.3 59.9±21.7 47.3±20.6
野木瓜片 0.80 40.3±9.0** 53.8±8.7## 45.6±7.9*## 35.6±9.9** 30.2±12.7**
野木瓜片 0.40 46.8±10.2**# 63.8±19.3## 53.2±16.3## 42.3±14.6**# 35.9±9.8**#
Aspirin 0.30 30.4±14.6** 31.5±8.7** 25.8±7.8** 14.5±4.3** 12.1±6.1**
 与 NS 比较 :*P <0.05;**P <0.01;与 Asprin 比较 :#P <0.05;##P <0.01
  
3 讨论
上述实验结果表明:野木瓜片对多种疼痛模型
(热板法 、扭体法 、三叉神经痛)均有显著的镇痛作
用;对小鼠毛细血管通透性增高 、二甲苯耳廓炎症 、
大鼠蛋清性足肿胀均有显著的抑制作用。从临床的
功用来看 ,野木瓜片主要是镇痛方面的疗效 , 因此 ,
我们主要从镇痛方面着手 , 既考虑到物理性致痛(热
板法),又考虑到化学性致痛(扭体法), 并针对临床
应用 , 对大鼠三叉神经痛模型进行了实验 , 针对性
强。辅之抗炎实验 ,进一步阐明了该药的疗效基础。
参考文献
1 陈奇主编.中药药理实验.贵州:贵州人民出版
社 , 1988.119
2 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生
出版社 , 1993.384
3 谭毓治 , 胡因铭 ,赵诗云 ,等.龙肝泻肝泻药理作用
研究.中药药理与临床 , 1991 , 7(1):5
4 卫生部药政局编.中药新药研究指南.1994.132
[ 收稿日期 1998-04-20]
198 广东药学院学报(ACAD J GCP) 1998 , 14(3)