全 文 ：现代中药研究与实践 20 04 年第1 8卷增 刊
R er a s e eh
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e d ie i nes1 2
刁l J. J伪 jA i厂L 厂匕取的丹参液相色谱的指纹图谱高效 、 稳定 , 可 以用于
丹参的质量控制 。
参考文献
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杜衡 G C 指纹图谱的初步研究
张 峰 , 付绍平 ,徐 青 , 肖红斌 , 梁鑫森 关
( 中国科学院大连化学物理 研究所 ,辽 宁 大连 1 1 6 0 1 1)
摘要 : 目的 研 究中药杜衡 G C 指纹图谱 的建立 方 法 。 方法 利 用 毛细管气相 色谱 对杜衡提取物进行分
析 , 选择 适宜 的程序升 温条件 , 并利 用 G C /M S 技 术确认指纹 图谱中的特征指纹信息 。 结果 获得 了较为 理想
的包含特征信息的杜衡 G C 指纹 图谱 。 结论 用本文 确 定的分析条件所获得的 指纹图谱 可较全 面地反映杜衡
的化 学成分 , 为杜衡药材的 质量控制提供有效手段 。
关键词 : 杜衡 ; G C 指纹 图谱
中图分类号 : R 2 8 4 . l 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 4 一 2 1 9 9 ( 2 0 0 4 ) 5 0一 0 0 2 1 一 0 3
S t u d y o n G C F i n g e r P r i n t o f t h e C o n s t i t u e n t s i n A s a r u m
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·
Z H A N G F e n g
,
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L I A N G X i n
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( D a l ia n I n s t i t u t e o f C h e m i e a l P h y s ie s
,
C h i n e s e A e a d e m y o f S e i e n e e
s , D a l ia n 1 1 6 0 1 1
,
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)
A b s t r a c t : o b j e c t i v e T o d e v e l o p a G C f i n g e r p r in t i n g f o r d e t e r m i n a t i o n o f e h e m i e a l e o n
s t i t u e n t s i n
A s a r u m fo
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M e t h o d C G C a n d G C /M S w e r e u s e d t o o p t im i z e t h e f i n g e r p
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,
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f e r a b le G C f i n g e r p
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.
C o n e l u s i o n P a r a m e t e r s id e n t i f i e d b y t h i s s t u d y f o r
e h r o m a t o g r a p h i e f i n g e r p r i n t 15 a b l e t o w e l l e x p o s e e h e m i e a l i n g r e d i e n t s i n A
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s e r v i n g a r o l e i n q u a l i t y e o n t r o l
.
K e y w o r d s : A s a r u n Z fo
r b e s i i M a x im
.
; G C f in g e r p r i n t
杜衡 ( A as ur m fo br es il M a ix m . ) 是常用 中药 ,
具散风逐寒 、 消痰行水 、 活血 、 平喘 、 定痛等功效叮 。
研究表明 ,杜衡的主要化学成分是挥发油 , 包括黄樟
醚 、 甲基丁香酚等成分一 。 为了控制药材质量 ,前人
基金项 目 : 中国科学院知识创新工 程重要方向性项 目 ( K G C X Z一 SW -
2 13 )
作者简介 : ` 通讯作者 : 梁 鑫森 , 研究员 , 博士生 导师 。 T el : ( 。41 1)
8 36 99 0 ] S E
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:
1
1a n g x m 迈 d i e p . a e . c n .
建立了黄樟醚的气相色谱定量法 3j[ , 以作为杜衡质
量控制的标准 。 但这种方法不能全面反映杜衡药材
的内在质量 , 因此本文利用 G C 和 G C /M S 技术初
步建立 了杜衡 的 G C 指纹图谱法 , 可以用来控制杜
衡的质量 。
l 仪器与试药
美国 V a r ia n C P 一 3 8 0 0 气相色谱仪 (氢火焰检测
器 , F I D ) , 美国 F i n i g a n T r a e e G C 一 M S 仪 。 J P S D 一
1 0 。 粉碎机 (上海嘉定粮油检测仪器厂 ) , 索氏提取
DOI : 10. 13728 /j . 1673 -6427. 2004. s1. 007
现代 中药研究与实践2 4 0 0年第
R e芝旦 ar eh anP dr e at ie e ofC h in s e e
1 8 卷增刊
M ed ie in s e一 9ù 9`一
装置 , R E 一 52 A 旋 转 蒸发 器 (上 海 亚荣 生 化仪 器
厂 ) , JJ 5 0 0 型精密电子天平 (美 国双杰兄弟有限公
司 ) 。
试剂 : 正 己烷 (分析纯 ,北京双环化学试剂厂 ) 。
药材 : 从各地大型药材市场购得 10 个杜衡全草
样品 ,并经辽宁师范大学陈辰教授和王青讲师鉴定 。
2 实验方法
2
.
1 杜衡样品的制备
分别将 10 种杜衡药材 于 60 C下恒温干燥 20
m in
, 粉碎至 50 目 , 准确称取 20 9 ,置于索氏提取器
中 , 加人 2 0 0 m L 正己烷 , 提取 l o h , 过滤 ,浓缩 , 定
容至 25 m L ,制得杜衡样品溶液备用 (密闭冷藏 ) 。
2
.
2 G C 分析
色谱条件 : V a r i a n C P 一 3 8 0 0 ; H P 一 5 石英毛细管
柱 ( 3 O m 火 0 . 2 5 m m 1. d . ) ; 程序升温 : 以 I O C / m i n
的速率从 60 C 升至 1 60 C并保持 5 m in ,接着以 10
C / m in 的速率升至 25 O C并保持 10 m in ;气化室温
度 : Z OO C ; F I D 温度 : 2 5 O C ; 空气压力 : 2 0 0 k P a ;
氢气压力 : 1 5 0 k P a ; 载气 ( N Z )流速 : 1 m L / m i n ,分
流 比 : 3。 , 1 ;进样量 : 2 拌L 。 杜衡的 G C 指纹谱见图
2
.
3 G C
一
M S 分析
G C
一
M S 条件 : 美 国 F i n ig a n T r a e e G C 一 M S 仪 ,
H P SM S 石英毛细管柱 ( 3 O m 只 0 . 2 5 m m 1. d . ) ; 载
气 : H e ; 程序升温同上 ; 分流比 : 10 0 : 1 ;进样量 : 0 . 6
拜L 。 电子轰击 ( E D 离子源 ,离子能量 70 e V , 离子源
温 度 2 5 o C , 质 量 扫 描 范 围 : 1 1 胖一 4 0 1 拌 。 经
N I S T 9 8 数据库检索及文献对照 , 确定了图 1 中 6
个共有峰的结构
4 15 6
2 3
r ~ , ~ 甲
-
~ ~ ~ , ~ ~ . ~ ~ ~ ~ ~ ~门~ ~ , 尸
-一目~ , . . , -一吮 - r ~ ~ ~ - - , 一 ,- ,5 1 0 1 5 2 0 2 5
1
. 黄樟醚 2 . 甲基 J 香酚 3 . 细辛醚 4 . 异榄香脂 素 乃 . 细辛脑
6
.
N
一异 丁基 一 2 , 4 , 8 , 1于十二碳四烯酞胺
圈 l 杜衡的 G C 指纹图谱
F i g
.
1 T h e G C r i n g e r P r i n t o f A s a
r u 从 of 犷 b亡 5 1 ; M a x im .
.2 4 稳定性实验
取同一样品 ,相 同色谱条件下连续 s d 每天进
行检测 ,考察其保 留时间和色谱峰面积的一致性 , 6
个共有峰保留时间的 R S D 分别为 0 . 19 % , 。 . 07 % ,
0
.
1 2%
,
0
.
2 2%
,
0
.
6 5% 和 0 . 71 % , 色谱 峰面积 的
R S D 分 别 为 2 . 1 6% , 2 . 1 4% , 3 . 1 1% , 2 . 5 6% ,
6
.
7 7% 和 7 . 5 8% 。
2
.
5 精密度实验
取同一样品 , 相同色谱条件下连续进样 5 次 , 考
察色谱峰保留时间和色谱峰面积的一致性 , 6 个共
有 峰 保 留时 间 的 R S D 分 别 为 0 . 08 % , 0 . 肠 % ,
0
.
1 0%
,
0
.
1 4%
,
0
.
4 5 %和 0 . 5 3% , 色谱 峰 面积 的
R S D 分 别 为 2 . 0 6% , 2 . 0 3% , 2 . 9 1% , 2 . 2 6% ,
5
.
34 % 和 6 . 5 5% 。
3 结果与讨论
中药指纹图谱建立 目的是全面反映中药所含内
在化学成分的种类和数量 ,进而反映其内在质量 。在
目前中药的药效成分尚未完全阐明的情况下 , 利用
中药指纹图谱作为质量控制指标是一种有效的质量
控制方法 。 为使该方法具有可行性 ,建立中药样品的
指纹图谱应体现以下 3 个原则 : 指纹谱信息量大 ,指
纹谱稳定性好 , 指纹信息特征 。 根据这 3 个要求我们
对杜衡指纹图谱的建立条件进行了优化选择 。
3
.
1 指纹谱信息量 在 G C 指纹图谱中 ,指纹谱信
息量主要是指色谱峰的数 目 。 为了全面体现药材的
药效化学物质基础 ,应获得包含尽可能多色谱峰的
指纹图谱用来作为质量控制的标准 。 因此我们对影
响色谱峰数 目的实验条件进行了考察和优化 。 对于
杜衡这种化学成分极其复杂的中药样 品 , 高分离能
力 、 高分析速度 、 高灵敏度的毛细管气相色谱柱较之
填充气相色谱柱有不可比拟的优势 , 因此我们选择
了前者 。 程序升温条件的优化选择也是保证获得尽
可能多色谱峰的重要因素 , 而选择程序升温条件要
按以下原则进行 : 一是在所选择的升温程序下难分
离物质对能得到分离 ,二是该升温程序的最终温度
在仪器允许的前提下尽可能高 , 以便高沸点化合物
也可以出峰 。本着以上原则 ,我们选择了实验中所述
的升温程序 。
3
.
2 指纹谱 的稳定性 指纹谱的稳定性也就是指
在规定的实验条件下同一样品在不同时间 、 不同仪
器 、 不同实验室所得指纹谱的重现性 。指纹谱的稳定
性是其用于中药质量控制的前提 , 因此 ,我们对本文
所获得的指纹图谱的稳定性进行了考察 。 精密度实
验和稳定性实验的数据表明 ,分析方法可靠 , 可以获
现代中药研究与实践 2 0 0 4年第 1 8卷增 刊
Re e e s a rh
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n e e sMe die in e s一 3 2一
得稳定的指纹谱 。
3
.
3指纹信息的特征性 指纹图谱 中蕴藏了很多
特征的指纹信息 , 这些特征信息在中药的质量控制
中将起着重要作用 。为了阐明指纹图谱的内在本质 ,
挖掘其中的特征指纹信息 , 本文利用 G C /M S 对 10
个样品进行 了分析 ,确定了共有的 6 个特征指纹信
息 : 1 . 黄樟醚 2 . 甲基丁香酚 3 . 细辛醚 4 . 异榄香脂
素 5 . 细辛脑 6 . N 一异丁基 一 2 , 4 , 8 , 1 0一十二碳 四烯酞
胺 。 这些成分都具有明确的药理活性 。
综上所述 , 本文建立的杜衡 G C 指纹谱方法稳
定 、 可靠 , 可较全面地反映杜衡 的化学成分 ,为杜衡
药材的质量控制提供有效手段 。
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2 0 0 5 年《现代中药研究与实践 》杂志征订启事
《现代中药研究与实践 》杂志是经国家科技部 、 国家新闻出版署批准 , 重点宣传和报道国家
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会天然药物资源专业委员会 、 中国药材 G A P 研究促进会 (香港 )联合主办 , G A P 首席专家周荣
汉教授担任主编 。
本刊主要设有 : 专论 、 政策与法规 、 G A P 基地建设 、 药用植物栽培 、 药用动物养殖 、 采收与
加工 、 包装与贮运 、 质量控制与管理 、 资源保护与利用 、 制药工艺 、 S O P 制定与讨论 、 G A P 知识
讲座 、 经验交流 、 综述 、信息传递等栏 目 。 适宜各地制药企业 、 药材经营企业 、 中药材种植养殖企
业 以及中医药研究院所 、 各类 医药院校 、 药品监督局 、 药品检验所 、 医 院等单位及个人订阅 。
本刊为 国际标准大 16 开本 , 64 页 , 双月刊 , 彩色封面 , 内页铜版纸精美印刷 ,逢双月下旬
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志 2 0 0 3 年 ( 6 期 ) 、 2 0 0 4 年 ( 6 期 )全刊 , 每册 8 元 , 共 1 3 6 元一套 ;另 有 20 0 3 年增 刊 8 元 , 2 0 0 4
年增刊 20 元 , 共计 28 元一套 ,如需要者可一并邮购 。
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