全 文 ：收稿日期:2003-12-12
基金项目:云南省应用基础研究基金资助(批准号:65C009M).
作者简介:郭仕平(1978—),男 ,江西万载人 ,现为云南大学生命科学学院硕士研究生.
山西师范大学学报(自然科学版)
第 18卷第 1 期 Journal of Shanxi Teacher′s University Vol.18　No.1
2 0 0 4年 3 月 Natural Science Edition Mar.　2004
文章编号:1009-4490(2004)01-0082-03
川八角莲内生真菌及根际真菌的分离和鉴定
郭仕平 , 张玲琦 , 蒋 斌 , 徐成东 , 刘仕平
(云南大学生命科学学院 , 云南 昆明 650091)
摘　要:对生长于云南省嵩明县的川八角莲植株及其根际土壤进行了内生真菌与根际真菌的分
离.结果共获得内生真菌 29 株 , 分别属于 2科 4 属;获得根际真菌 29 株 ,分别属于 6 科 9 属 ,并对
这两组真菌类群作了比较研究 ,对植物内生真菌的起源作了初步探讨.
关键词:川八角莲;内生真菌;根际真菌
中图分类号:949.746.8　　　文献标识码:A
　　川八角莲(Dysosma veitchii)为小檗科八角莲属多年生草本植物 ,全草入药 ,有滋阴补
肾 ,追风散毒 ,清肺润燥 ,祛淤消肿 ,止痛等功效[ 1 ,2] ,对其内生真菌的研究已作过报道 ,并
证明了川八角莲某些内生真菌能够产生和其宿主相同或相似的生理活性成分———鬼臼毒
素[ 1 ,3] .目前 ,对于植物内生真菌能够产生和其宿主植物相同或相似的活性成分已有较多
的研究报道[ 4 , 5] ,但对于内生真菌的起源的探讨尚极少见有报道.有学者用“内共生理论”
或“基因的侧向转移”来解释内生真菌的起源及其生理现象[ 5 ,6] ,但都因缺乏直接的证据 ,
而无法得到证实.本文对川八角莲内生真菌及根际土壤真菌进行了分离 、鉴定和两组真菌
类群的比较研究 ,对于探讨植物内生真菌的起源提供了一些基础资料和一条新的思路.
1　材料和方法
1.1　材料　新鲜川八角莲野生植株及其根际土样来源于云南嵩明县.
1.2　培养基 :马铃薯葡萄糖培养基 ,查氏培养基 ,促孢培养基 ,马丁氏培养基.
1.3　真菌的分离
1.3.1　内生真菌的分离　按常规无菌操作 ,取新鲜川八角莲地下茎 ,切成长约 1 ～ 2cm小
段 ,并从中央纵剖 ,按下列程序表面消毒:自来水冲洗※75%酒精漂洗(3min)※无菌水冲
洗4次※0.1%升汞漂洗(4min)※无菌水冲洗 4次.
将上述处理过的茎剥除木质部 ,再剪切成 0.5×0.5cm2的小片 ,然后将小片种植于
PDA平板上 ,置 28℃温箱中培养3 ～ 7天后 ,即可见样品边缘处有菌丝长出 ,经纯化后转接
到PDA斜面上备用.
1.3.2　根际真菌的分离　将各采样点采集到的川八角莲根际土样混匀 ,称取 5g 倒入盛
有45ml的无菌水带玻璃珠的三角瓶中 ,混匀 ,然后按常规土壤霉菌分离与纯化方法对土
样稀释 ,涂布平板 ,计数及挑取菌落 、纯化[ 7] .
1.3.3　菌种鉴定　按常规方法进行[ 8—10] .
2　结果与讨论
分离得到 29株内生真菌和 29株根际真菌 ,对其作了鉴定 ,并对这两组真菌类群进行
了分类汇总 ,结果见表 1和表 2.
表 1　29 株内生真菌的分类汇总
Tab.1　The classification and the collection of the fungus inside of 29 plants
亚　门
Subdivision
目
Order
科
Family
属
Genus
菌株数
Number
半知菌亚门 丛梗孢属 丛梗孢科 丛梗孢属 12
半知菌亚门 丛梗孢属 丛梗孢科 青霉属 9
半知菌亚门 无孢目 无孢科 无孢类群 7
半知菌亚门 丛梗孢目 丛梗孢科 拟青霉属 1
表 2　29 株根际真菌的分类汇总
Tab.2　The classification and the collection of the fungus between the roots 29 plants
亚　门
Subdivision
目
Order
科
Family
属
Genus
菌株数
Number
半知菌亚门 丛梗孢目 丛梗孢科 木霉属 13
半知菌亚门 丛梗孢目 丛梗孢科 青霉属 9
半知菌亚门 丛梗孢目 丛梗孢科 丛梗孢属 1
半知菌亚门 丛梗孢目 瘤痤孢科 镰刀菌属 1
半知菌亚门 丛梗孢目 暗丛梗孢科 枝孢属 1
半知菌亚门 无孢目 无孢科 无孢类群 1
半知菌亚门 球壳目 球壳孢科 革壳孢属 1
接合菌亚门 毛霉目 毛霉科 毛霉属 1
半知菌亚门 球壳目 球壳孢科 茎点霉属 1
　　从以上 2个表可以看出 ,29株内生真菌分布在 2科 4属;29株根际真菌分布在 6科 9
属 ,显示出川八角莲内生真菌及根际真菌有着丰富的多样性.从表 3和表 4还可看出 ,存
在于川八角莲植株内的真菌类群在根际土壤中同样存在 ,而有的根际真菌在植物体内却
不一定有 ,这说明川八角莲的内生真菌与根际土壤真菌之间存在着密切联系.为此 ,我们
可以假设 ,内生真菌是土壤根际真菌在与植物长期适应过程中有选择性地进入到植物体
内的.对于寄生性病原真菌来说 ,活的寄主组织不仅提供了它们生长发育的最适生境 ,也
是它们逃避同腐生性真菌竞争的一种理想方式 ,因为一般来说 ,腐生性真菌是不进入活体
组织的.所以 ,以菌丝体长期生存于宿主植物中 ,是寄生性真菌逃避竞争的一种有效手段.
从这一点来看 ,根际真菌是可能进入到宿主植物体内的 ,并被选择性地生存下来 ,成为植
物的内生真菌.目前 ,对植物内生真菌与其根际真菌之间的关系研究尚未见报道 ,有待深
83　第 1 期　　　　　　郭仕平 , 等:川八角莲内生真菌及根际真菌的分离和鉴定
入开展这方面的工作 ,还应更广泛地比较不同植物的内生真菌与其根际真菌之间的关系 ,
这对于探讨植物内生真菌的起源具有积极的意义.
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Separating and Appraising the Fungus between the
Roots of Dysosma Veitchinii and inside the Fruit of the Plant
GUO Shi-ping , Zhang Ling-qi , JIANG Bin , XU Cheng-dong , LIU Shi-ping
(Life Science Institute , Yunnan University , Kunming , Yunnan , 650091 , China)
　　Abstract:After separating the fungus between the roots of dysosma veitchii and inside the fruits of the plant
growing in Songming county , Yunnan province , the experiences show that there are 29 fungus plants;as well as 29
plants of fungus btween the roots belonging to 6 families and 9 genus seperately.The paper probs into the origin of the
fungus which grow inside the plants and does some inside the plants and does some comparing researches on the two
kinds of the fungus.
　　Key words:Dysosma veitchii;The fungus insideof the plant;The fungus between the roots of the plants
84 山西师范大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　2004 年