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苗药铁筷子挥发油抗炎作用研究



全 文 :收稿日期:2011-12-20; 修订日期:2012-03-21
基金项目:贵阳市科技计划项目(No.[2011204]22) ;
贵州省科技基金项目(No. J[2009]2150)
作者简介:钱海兵(1977-) ,男(汉族) ,河南卫辉人,现任贵阳中医学院副
教授,博士学位,主要从事中药药理学研究工作.
* 通讯作者简介:靳凤云(1954-) ,女(汉族) ,山东菏泽人,现任贵阳中医
学院教授,主要从事中药质量控制研究工作.
苗药铁筷子挥发油抗炎作用研究
钱海兵,蒲金山,王 龙,李姝臻,靳凤云*
(贵阳中医学院,贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 研究苗药铁筷子挥发油的抗炎作用。方法 选用昆明种小鼠,体质量(20 ± 2)g,随机将实验动物分为 5 组,
每组 10 只,分别为模型对照组,阿司匹林组,苗药铁筷子挥发油高、中、低剂量组(按生药量计为 20,10,5 g·kg -1) ,连续
ig给药 7d,采用小鼠耳廓肿胀法,小鼠棉球肉芽肿法,小鼠足跖肿胀法,小鼠腹腔毛细血管通透法考察抗炎作用。结果
苗药铁筷子挥发油可显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀(P < 0. 05 或 P < 0. 01)、小鼠肉芽组织增生(P < 0. 05 或 P < 0. 01) ,
抑制角叉菜胶致小鼠足跖肿胀(P < 0. 05 或 P < 0. 01)及醋酸所致小鼠毛细血管通透性增加(P < 0. 01)。结论 苗药铁筷
子挥发油具有明显的抗炎作用。
关键词:苗药铁筷子挥发油; 抗炎作用; 小鼠
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 08. 051
中图分类号:R29 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)08-1961-02
铁筷子为腊梅科腊梅属植物腊梅 Chimonanthus praecox(L.)
1ink.的干燥根,异名又称铁钢叉、瓦鸟柴,是贵州苗族常用药物。
铁筷子收载于《中华本草·苗药卷》以及 2003 版《贵州省中药
材、民族药材质量标准》,具有祛风止痛、理气解毒的功能[1],主
治胃痛、腹痛、风湿痹痛等。苗族民间医生更是多用于风湿以及
类风湿性关节炎的治疗,对于消除关节肿胀,改善关节功能具有
很好疗效。基于此,贵州不少制药企业还以铁筷子为主要原料开
发了如“筋骨伤喷剂”“通络骨质宁”等制剂。但关于铁筷子减轻
关节炎症的化学成分及相关药理作用研究报道甚少。为进一步
阐明其临床作用,为深入研究提供基础,我们对铁筷子挥发油进
行了抗炎作用的实验研究。
1 材料与仪器
1. 1 动物 SPF级昆明种小鼠,体质量(20 ± 2)g,雌雄各半,购于
第三军医大学大坪医院野战外科研究所医学实验动物中心,许可
证号 SCXK(渝)2001 - 0005。
1. 2 药品与试剂 铁筷子采自贵州龙里,经贵阳中医学院王祥培
副教授鉴定为腊梅科腊梅属植物腊梅 Chimonanthus praecox(L.)
1ink.铁筷子挥发油按药典水蒸气蒸馏法制备,得率为 0. 4%,实
验时用金龙鱼调和油稀释。二甲苯,成都东金化学试剂有限公司
产品;冰醋酸,天津致远化学试剂有限公司产品。
1. 3 仪器 721 - B型分光光度计,上海精密仪器仪表有限公司
产品;ALC - B 型电子天平,北京科勒有限公司产品;游标卡尺
(0. 02 mm) ,上海微川精密仪器有限公司产品。
2 方法
2. 1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 取小鼠 50 只,雌雄各半,
随机分为 5 组,每组 10 只,分别为模型对照组,阿司匹林组(0. 2
g·kg -1)和铁筷子挥发油高、中、低剂量组(按生药量计为 20,
10,5 g·kg -1)。每日 ig给药 1 次,连续给药 7d,模型组给予等体
积蒸馏水。于末次给药后 1 h后,于小鼠右耳两面均匀涂二甲苯
0. 05mL致炎,左耳不涂为正常耳。致炎后 40 min 后,脱颈处死
动物,沿耳廓基线剪下两耳,用 8 mm打孔器在两耳对称取耳片,
于分析天平上称重,以左右耳片质量差值表示炎症肿胀度,计算
抑制率。
抑制率(%)=(模型组肿胀度 -给药组肿胀度)/模型组肿
胀度 × 100%
2. 2 对小鼠棉球肉芽肿的影响 取昆明种小鼠 50 只,雌雄各半,
用乙醚麻醉后,将 20 mg 灭菌脱脂棉球一个植入小鼠右侧腋下,
伤口处给予金霉素眼膏处理。术后随机分为 5 组,每组 10 只,分
组及给药同“2. 1”项。于第 8 天脱颈处死小鼠,剥离棉球肉芽
肿,于 80 ℃烘箱过夜烘干后称重,减去原棉球质量即为肉芽肿重
量,并计算抑制率。
肉芽组织增生抑制率(%)=
(模型组肉芽组织干质量 -给药组肿肉芽组织干质量)/模型组
肉芽组织干质量 × 100%
2. 3 对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响 取昆明种小鼠 50 只,
雌雄各半,分组及给药同“2. 1”项。末次给药后 1 h,千分尺测量
小鼠正常足掌厚度,每只小鼠右后肢足爪皮下注射 0. 1%角叉菜
胶 0. 05ml /只致炎。随后第 1,2,4,6 h各测量 1 次,记录结果,计
算肿胀度。
肿胀度 =致炎后足掌厚度 -致炎前足掌厚度
2. 4 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 给药体积 0. 2
ml /10g,末次给药后 1 h,尾静脉注射 0. 5%伊文思蓝生理盐水溶
液 0. 1 ml /10g,随即腹腔注射 0. 6%醋酸溶液 0. 1 ml /10g,20min
后脱颈处死小鼠,腹腔注射生理盐水 5 ml,充分冲洗后,抽取腹腔
冲洗液,2 500 r /min离心 5 min,取上清液,紫外分光光度计 590
nm处测定吸收度(OD值) ,进行组间比较。
2. 5 统计学处理 试验数据采用统计学软件 SPSS13. 0 处理,组
间作 t 检验。P < 0. 05 有统计学意义。
3 结果
3. 1 铁筷子挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[2] 由表 1
可见,铁筷子挥发油高、中、低剂量对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀
均有明显抑制作用,与模型对照组比较有统计学意义(P <0. 01)。
3. 2 铁筷子挥发油对小鼠棉球肉芽肿增生的影响[3] 与模型组
比较,铁筷子挥发油各剂量组对小鼠棉球肉芽肿有抑制作用(P
< 0. 01)。见表 2。
3. 3 铁筷子挥发油对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响[2] 与模
型组比较,铁筷子挥发油可抑制角叉菜胶所致小鼠足肿胀,并呈
现一定的剂量依赖性及时间依赖性(P < 0. 01)。见表 3。
3. 4 铁筷子挥发油对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影
响[3] 与模型组比较,铁筷子挥发油高、中剂量组均可以显著抑
制醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高,与模型组比较有显
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 8 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 8 期
著差异(P < 0. 05)。见表 4。
表 1 铁筷子挥发油对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珋x ± s)
组别
给药剂量
C / g·kg -1
耳廓肿胀
度 m /mg
肿胀抑制率
(%)
模型 - 15. 4 ± 2. 8 -
阿司匹林 0. 2 8. 2 ± 3. 32) 46. 8
铁筷子挥发(高) 20 8. 9 ± 2. 52) 42. 2
铁筷子挥发(中) 10 10. 2 ± 3. 02) 33. 8
铁筷子挥发(低) 5 11. 9 ± 3. 81) 22. 7
与模型对照组比较,1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;n = 10
表 2 铁筷子挥发油对小鼠棉球肉芽肿增生的影响(珋x ± s)
组别
给药剂量
C / g·kg -1
肉芽肿干质量
m /mg
肿胀抑制率
(%)
模型 - 26. 3 ± 6. 1 -
阿司匹林 0. 2 11. 2 ± 2. 92) 57. 4
铁筷子挥发油(高) 20 12. 8 ± 3. 22) 51. 3
铁筷子挥发油(中) 10 18. 4 ± 4. 02) 30. 0
铁筷子挥发油(低) 5 22. 0 ± 5. 41) 16. 3
与模型对照组比较,1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;n = 10
表 3 铁筷子挥发油对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响(珋x ± s)
组别
给药剂量
C / g·kg -1
足肿胀度 l /mm
0h 1h 2h 4h 6h
模型 - 2. 07 ± 0. 38 1. 72 ± 0. 33 1. 77 ± 0. 38 1. 81 ± 0. 38 1. 57 ± 0. 22
阿司匹林 0. 2 2. 05 ± 0. 44 1. 22 ± 0. 252) 1. 21 ± 0. 222) 1. 16 ± 0. 182) 0. 73 ± 0. 182)
铁筷子挥发油(高) 20 2. 08 ± 0. 46 1. 27 ± 0. 281) 1. 30 ± 0. 231) 1. 17 ± 0. 272) 0. 81 ± 0. 312)
铁筷子挥发油(中) 10 2. 05 ± 0. 38 1. 51 ± 0. 19 1. 47 ± 0. 10) 1. 34 ± 0. 131) 0. 92 ± 0. 222)
铁筷子挥发油(低) 5 2. 04 ± 0. 51 1. 63 ± 0. 42 1. 52 ± 0. 21 1. 38 ± 0. 111) 1. 31 ± 0. 361)
与模型对照组比较,1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;n = 10
表 4 铁筷子挥发油对醋酸致小鼠
腹腔毛细血管通透性的影响(珋x ± s)
组别 给药剂量 C / g·kg -1 OD
模型 - 0. 70 ± 0. 11
阿司匹林 0. 2 0. 49 ± 0. 05
铁筷子挥发油(高) 20 0. 50 ± 0. 041)
铁筷子挥发油(中) 10 0. 57 ± 0. 061)
铁筷子挥发油(低) 5 0. 67 ± 0. 12
与模型对照组比较1)P < 0. 05;n = 10
4 讨论
苗药铁筷子为腊梅科腊梅属植物腊梅 Chimonanthus praecox
(L.)1ink.的干燥根,在我国分布广泛,其化学成分主要以挥发
油、生物碱和香豆素类化合物为主,药理研究表明其具有很好的
杀菌和抑菌活性以及清除自由基等作用,为我国特有的观赏树
种、传统香料和药用植物。本课题组已经对铁筷子挥发油成分进
行了气相色谱 -质谱连用分析,并鉴定出 30 个化学成分[4],但对
其药理作用尚未进行报道,不利于进一步探索铁筷子临床应用的
物质基础以及铁筷子资源的深入利用。
本研究应用二甲苯、冰醋酸、角叉菜胶建立小鼠耳廓肿胀模
型、腹腔毛细血管通透性增加模型以及小鼠足肿胀,结果与模型
组比较,铁筷子挥发油可以减轻小鼠耳廓肿胀与足肿胀,降低小
鼠腹腔毛细血管通透性。二甲苯和角叉菜胶能通过化学刺激,引
起局部血管扩张、通透性增加,进而引起局部渗出、水肿,属急性
和亚急性炎症反应。本研究表明,铁筷子挥发油可以降低模型动
物局部组织的肿胀度,减轻毛细血管通透性,其机制可能是通过
抑制炎症早期毛细血管通透性,减少炎性物质渗出以及组织水肿
等病理改变。棉球肉芽肿为炎症后期,毛细血管新生,肉芽组织
生成以及细胞外基质增生所致,为炎症的慢性增殖相的病理改
变。本研究表明,铁筷子挥发油可以抑制模型小鼠的肉芽肿增
生。综上研究表明,铁筷子挥发油对急性、早期炎症和晚期炎症
均具有良好的抗炎作用,为其临床常用于风湿以及类风湿性关节
炎的治疗提供了药理学研究基础。
参考文献:
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