全 文 ：青海农林科技 ·试 验 研 究· 2010年第 2期
收稿日期:2010-04-20
作者简介:马生祥(1978-),男(回族),青海化隆人 ,助理林业工程师 ,主要从事林业推广 、生产科研工作。
不同海拔野生金露梅叶的成分分析
马生祥1 ,马明呈 2 ,张振华 2 ,谭建萍2
(1.化隆县阿什努乡林业站 ,青海　化隆　810900;2.青海大学 ,青海　西宁　810016)
摘　要:目前对金露梅叶片的研究仅限于其解剖结构 、灌丛地上部分生物量和黄酮类物质 , 对青海野生
金露梅的叶部整体成分的研究还比较少。我们以采集到的 2840m和 2510m处的两份野生金露梅叶作为样品
进行成分分析 ,结果表明:2840m处样品的黄酮含量高于 2510m处样品的;单宁含量相当;2840m处样品还原
糖含量高于 2510m处样品的 , 粗蛋白的含量低于 2510m处样品的。
关键词:不同海拔;野生金露梅叶;成分分析
中图分类号:Q595　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1004-9967(2010)02-0008-05
AnalysisofLeafIngredientinWildPotentilafruticosa
inDifferentHeight
MAShen-xiang1 , MAMing-cheng2 , ZHANGZhen-hua2 , TANJian-ping2
(1.QinghaiHualuongAshennuForestStation, Hualong810900 , China;
2.QinghaiUniversity, XiningQinghai810016, China)
Abstract:PotentilafruticosaL.bushwoodisoneofbiggestbushofQingHaiwood sareas.Atpresent
leafblade sresearchisonlyrestrictedtothedissectionstructure, thebrushaerialpartsbiomasandthefla-
vonoid, andtheresearchofthewholeleafdepartmentingredientconductstoPotentilafruticosaL.inthewild
ofQinghaiquitetobefew.WeusedthesampleofthewildBushCinquefoilleafthatwegatheredwhichgrew
in2510m, 2840minJulyof2005 toCariedontheingredientanalysis.Theresultindicatedthatthecontent
offlavonoidandsugarin2840mwasmorethanin2510m, thetannincontentwasnearlyequal, butthecon-
tentofrudeproteinin2840mwaslesthanin2510m.
Keywords:Diferentheight;WildPotentilafruticosaL.;Componentanalysis
　　金露梅(PotentilafruticosaL.)俗名边麻。又
名金老梅 ,为蔷薇科萎陵菜属落叶灌木 。高约
0.25-2m,羽状复叶或小叶集生似掌状 ,花单生
或数朵聚伞花序 ,花径 1-3cm,黄色 ,花瓣 5。果
实卵圆形密被长柔毛。金露梅喜光 ,耐寒性强 ,
耐干旱 ,对土壤要求不严 ,嫩枝萌发能力强。金
露梅广泛分布于北温带地区 ,亚洲 、欧洲 、北美均
产。我国分布于东北 、华北 、西北 、西南各地 ,生
于海拔 1000-4500m之间的水甸子 、林缘 、草地 、
草原及高山灌丛中 , 株高在几厘米到两米之
间[ 1, 2, 3, 4, 7] 。
金露梅灌丛在高寒草场中分布较多 ,是最主
要的植被之一 ,是青藏高原隆起形成高山冷湿气
候的产物 ,总覆盖度达 50-80%。金露梅灌木林
是青海 最大 的灌木 林区之 一 (资源 面积
102.469km2),北起祁连山 、南至唐古拉山 、呈东
北—西南向带状分布 。金露梅灌木林是青藏高
原生态系统中的重要组成部分 。对金露梅的研
究具有很大经济前途[ 5, 6] 。
金露梅很久以前就闻名于东方医学界 。从
金露梅中煮出和浸泡出的汁液 ,因其镇痛 、止血
和消炎的功效被应用在胃肠疾病的治疗。在治
疗浓疮 、擦伤 、烧烫伤和疖病时 ,可外敷于伤口
上 ,且其浓汁可用于咽炎和口炎的治疗。同时 ,
这种植物对肠道感染有高效杀菌作用 ,尤其对霍
乱杆菌有极高的活性。金露梅嫩叶可代茶叶饮
用 ,以预防心脑血管疾病 。由于金露梅的预防和
治疗效果在非常广阔的领域中频频出现 ,使得其
8
包含在植物中的丰富的生物活性物质也渐渐地
显现出来 。
青海省金露梅生物资源丰富 ,但没有很好地
利用 ,尚未有系统的研究 ,尤其是对其功效的物
理基础研究存在很大空白。青海民间以金露梅
叶片代茶使用的历史悠久 ,却未曾有过科学的解
释。本文以野生金露梅叶为研究对象 ,测定了其
总黄酮 、单宁 、还原糖 、粗蛋白的含量 ,以期为金
露梅进一步的合理开发和应用提供科学依据 。
1　样品的采集与处理
本实验样品一份采自青海省互助北山森林
公园 ,海拔 2840m处 ,采集时间为 6月下旬 。另
一份样品采集于青海省大通县宝库乡林场周边
地区 ,海拔为 2510m,采集时间为 7月上旬 。摘下
叶片后 ,整理干净 ,经自然风干 ,研磨备用。
2　测定原理
2.1　总黄酮的测定原理(比色法)[ 8, 9, 10]
2.2　单宁的测定原理(氧化还原法)[ 11]
2.3　还原糖的测定原理(3, 5 -二硝基水杨酸比
色法)[ 11, 12]
2.4　粗蛋白的测定原理(双缩脲法)[ 13, 14]
3　主要试剂与仪器
三氯化铝 、醋酸钾 、石油醚 、无水乙醇 、芦丁
对照品(由中国药品生物制品检定所提供);高锰
酸钾 、靛红;分析纯葡萄糖 、3 , 5 -二硝基水杨酸 、
结晶酚 、氢氧化钠 、亚硫酸钠 、酒石酸钾钠;硫酸
铜(粉末)、酪蛋白 、无水乙醇 、氢氧化钾;离心机 、
电子天平 、721型分光光度计 、具塞刻度试管 、移
液管 、滴定管 、血糖管等 。
4　结果
4.1　总黄酮
芦丁标准曲线的绘制:取 6支具塞试管 ,按
表 1顺序分别加入各种试剂 。
将各管摇匀 ,在 420nm波长下比色 ,用 0号
管(空白对照液)调零 ,分别读取各管的吸光度值
(ABS值)见表 2。以芦丁的毫克数为纵坐标 ,吸
光度值(ABS值)为横坐标绘制回归曲线 ,见图 1。
表 1　芦丁标准曲线
Table1　Rutinstandard
管　号　　 0 1 2 3 4 5
芦丁毫克数(mg) 0 0.2336 0.3504 0.4672 0.584 0.7008
无水乙醇(ml) 5.0 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0
2.5%三氯化铝(ml) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
10%醋酸钾(ml) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
表 2　不同处理下的吸光度值
Table2　ABSunderdiferenttreatment
管　号　　 0 1 2 3 4 5
吸光度值 0 0.168 0.378 0.588 0.797 1.008
图 1　回归曲线
　　吸取供试品 0.1ml置试管中 ,加乙醇 4.9ml,
2.5%三氯化铝溶液 3.0ml, 10%醋酸钾溶液 5ml,
放置 40min,在 420nm波长下用空白调零比色 ,分
别读取各管吸光度值(ABS值)见表 3。
表 3　不同海拔样品相同重复处理下的吸光值
Table3　Sample sABSundersametreatmentof
differentheight
管　号 0 1 2 3
2840m 0 0.652 0.652 0.652
2510m 0 0.580 0.580 0.580
由曲线 y=0.5565x+0.140,得样品相应吸
9
光度的芦丁含量(即依据回归曲线计算出被测液
中 2840m处样品的黄酮含量分别为:0.5030mg;
2510m处:0.4630mg)。根据标准曲线 ,求出相当
于样品吸光度的芦丁含量按下式计算总黄酮的
含量 。
样品一总黄酮含量(mg/g)=
0.5030mg×25ml
1.0g×0.1ml =125.75(mg/g)
样品二总黄酮含量(mg/g)=
0.4630mg×25ml
1.0g×0.1ml =115.75(mg/g)
4.2　单宁
准确称取金露梅叶末 1.0g,用 70ml蒸馏水通
过漏斗小心的移入 100ml容量瓶中 ,充分振荡后加
水至刻度混匀 ,离心并过滤。吸取过滤后的样品液
5.0ml放入 100ml三角瓶中 ,准确加入 0.1%靛红
溶液 5.0ml,蒸馏水 10ml,用0.01mol/L高锰酸钾溶
液快速滴定至黄绿色时 ,再缓慢滴定 ,至金黄色即
为终点。另取样品液 5.0ml,加入活性炭 0.5g,置
水浴加热搅拌 10min,趁热过滤 ,并用热水洗涤数
次 ,于滤液中准确加入靛红溶液 5.0ml, 蒸馏水
10ml,同上法滴定 ,记录滴定体积 ,见表 4。
表 4　不同海拔样品滴定结果
Table4　sample stitrationresultsofdifferentheight
样　品 2840m 2510m
样品量(ml) 5.0 5.0
靛红溶液(ml) 5.0 5.0
蒸馏水(ml) 10.0 10.0
V1 4.0 3.9V2 1.0 0.9
样品一
单宁% =0.01(4-1)×0.0416
5
×100
1
×100
=2.496%
样品二
单宁% =0.01(3.9-0.9)×0.0416
5
×100
1
×
100=2.496%
4.3　还原糖
葡萄糖标准曲线的制作:取 7支血糖管 ,按
表 5顺序分别加入各种试剂 。
表 5　葡萄糖标准曲线
Table5　Glucosestandard
管号 0(空白) 1 2 3 4 5 6
DNS试剂(ml) 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
葡萄糖标准液(ml) 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4
蒸馏水(ml) 4.0 3.6 3.2 2.8 2.4 2.0 1.6
　　混匀后置 100℃恒温水浴保温 5min,立即用
流动水冷却 ,最后加蒸馏水稀释至 25ml刻度线 。
各管摇匀后在 540nm波长下用 0号管调零 ,分别
读取各管的吸光度值(ABS值)表 6。
表 6　不同处理下的吸光度值
Table6　ABSunderdiferenttreatment
管号 1 2 3 4 5 6
吸光度值 0.060 0.200 0.341 0.481 0.622 0.762
比色:待测液 2.0ml、蒸馏水 2.0ml、3, 5-二
硝基水杨酸(DNS试剂)3.0ml沸水浴 5min,立即
用流动水冷却。最后加蒸馏水稀释至 50ml,在
540nm波长下调零比色 ,分别读取各管的吸光度
值(ABS值),见表 7。
由曲线 y=2.847x+0.299,得 2840m处样品
还原糖的毫克数分别为:0.894mg;2510m处:
图 2　回归曲线
表 7　不同海拔样品相同重复处理下的吸光值
Table7　Sample sABSundersametreatment
ofdiferentheight
管　号 0 1 2 3
2840m 0 0.209 0.209 0.209
2510m 0 0.145 0.145 0.145
10
0.712mg。提取液总体积为 5 00ml, 测定时
体积为 2.0ml,样品毫克数为 2000mg,还原糖计
算样品一
还原糖(%)=0.894mg×
500ml
2ml
2000mg ×100
　　　　　=11.2%
样品二
还原糖(%)=
0.712mg×500ml
2ml
2000mg ×100
　　　　　=8.9%
4.4　酪蛋白
标准曲线的制作 ,见表 8。
表 8　标准曲线
Table8　Standard
编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
酪蛋白(g) 0 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.10 0.11 0.12 0.13 0.14
碳酸铜(g) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
无水乙醇(ml) 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0
10%氢氧化钾(ml) 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0
　　取 11个干燥的 100ml三角瓶 ,编号后按表 8
次序添加试剂 。每次加试剂时均注意摇匀 ,勿使
试剂与瓶底粘结 。之后 ,盖上瓶塞振荡 10min。
静置片刻 ,离心 ,将上清液过滤到另一组有相应
编号的 100ml三角瓶中 ,随即在 580nm波长下用
0号管调零 ,分别读取各管的吸光度值(ABS值)
见表 9。
表 9　不同处理下的吸光度值
Table9　ABSunderdiferenttreatment
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
ABS值 0.299 0.360 0.420 0.481 0.539 0.600 0.660 0.719 0.780 0.840
　　以酪蛋白含量 (g)为纵坐标 , 吸光度值
(ABS)为横坐标绘制回归曲线 ,见图 3。
准确称取 0.5g金露梅叶末 ,放入干燥的三角
瓶中 。另取一个三角瓶作空白。然后在各瓶分
别加入碳酸铜 1.0g,无水乙醇 20ml, 10%氢氧化
钾 20ml。每次加试剂后均注意摇匀 。振荡
10min,静置片刻 ,分别离心 ,取滤液在 580nm波
长下调零比色 ,分别读取各管的吸光度值 (ABS
值),见表 10。
图 3　回归曲线
表 10　不同海拔样品相同重复处理下的吸光值
Table10　Sample sABSundersametreatment
ofdiferentheight
管号 0 1 2 3
2840m 0 0.262 0.262 0.262
2510m 0 0.339 0.339 0.339
由曲线 y=0.1666x+0.000054,得不同海拔
处样品酪蛋白的含量分别为:2840m, 0.043703g;
2510m, 0.056531g;样品重均为 0.5g。
样品一　酪蛋白(%)=8.741%
样品二　酪蛋白(%)=11.306%
4.5　黄酮的比较
由图 4可以看出 , 2840m处样品中黄酮的含
量比 2510m处样品中黄酮含量高 。见图 4。
4.6　单宁比较
由图 5可看出 , 2840m处样品中单宁的含量
与 2510m处样品中单宁的含量相等。见图 5。
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图 4　黄酮含量
(1、2分别为 2840m和 2510m处样品黄酮含量)
图 5　单宁含量
(1、2分别为 2840m和 2510m处样品单宁含量)
4.7　还原糖的比较
图 6　还原糖含量
(1、2分别为 2840m处 、 2510m处样品)
图 7　粗蛋白含量
(1、2分别为 2840m处 、 2510m处样品)
由图 6看出 , 2840m处样品中还原糖的含量
高于 2510m样品的 。
4.8　粗蛋白的比较
由图 7看出 , 2840m处样品中粗蛋白的含量
低于 2510m处样品中的 。
5　结论
5.1　2840m处样品黄酮的含量明显高于样品中
2510m处样品中的含量 ,即表明:金露梅叶中黄
酮的含量随着海拔的升高而增加 。
5.2　2840m处样品中单宁的含量与 2510m处样
品中单宁的含量相当 ,即表明:金露梅叶中单宁
的含量基本不受海拔因素的影响 。
5.3　2840m处样品中还原糖的含量高于 2510m
处样品中的含量 ,即表明:金露梅叶中还原糖的
含量随着海拔的升高而增加 。
5.4　2840m处样品中粗蛋白的含量低于样品中
2510m处样品中的含量 ,即表明:金露梅叶中粗
蛋白的含量随着海拔的升高而降低。
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