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不同海拔条件下竹节参中人参皂苷含量的比较



全 文 :第 23卷第 2期 (第 1页)
2006年       湖北民族学院学报 医学版Journa l o fH ube i Institu te forN ationalities Medica l Edition      Vo .l 23 No. 2 P. 12006
基金项目 湖北省教育厅重点科研项目(2004X090)
作者简介 尹文仲(1969 - ),男 , 湖北建始人 ,主治医师 , 主要研究方向:民族民间医药与临床应用。
不同海拔条件下竹节参中人参皂苷含量的比较
尹文仲 1 ,童学飞 2 ,陈科力2
1.湖北民族学院附属医院(湖北 恩施 445000)
2.湖北中医学院(湖北 武汉 430061)
【摘要】目的 比较高海拔和低海拔栽培竹节参中人参皂苷的含量。方法 以人参皂苷 Rg
1
、Re为对照品对不同海
拔栽培的竹节参进行 TLC鉴别;参照人参的含量测定以人参皂苷 Rg1 、Re为对照品进行定量分析。结果 在选定
的薄层条件下 , 对照品与供试品的薄层图谱清晰 , 分离度好;在选定的 HPLC色谱条件下 ,对照品在 0. 48 ~ 2. 40μg
范围内具有良好的线性关系 , 回归方程为:Y=336182x - 30241  r=0. 9998。结论 高海拔与低海拔栽培的竹节
参的主要皂苷类成分基本相似。高海拔竹节参根茎中人参皂苷 Rg1、 Re的含量略高于低海拔茎 , 但根中人参皂苷
Rg1 、 Re的含量则基本相近。
【关键词】:不同海拔;竹节参;人参皂苷 Rg1、Re;TLC;HPLC
【中图分类号】R282. 2  【文献标识码】A  【文章编号】1008 - 8164(2006)02 -0012 - 03
Determ ination ofG insenoside in Rh izoma panac is
Japonnici at D ifferentA ltitude
YIN Wen - zhong, TONG Xue - fei, CHEN Ke - li
(The affilia ted hospita l ofHubei Institute for Nationa lities, Enshi 445000 , Ch ina)
【Abstract】Objective To determ ine G insenos ide in Rh izoma panacis Japonnic i from lower alti-
tude and higher altitude a reas. MethodsAs contro l by G insenos ide Rg1 and Re, To distingu ish
Rh izoma panac is Japonn ic i from lower a lt itude and h igher altitude areasw ith TLC;Tomensurate
the content ofG insenos ide in Rh izoma panac is Japonn ic iw ith the contro l by Panax. Resu lt:On
the cond ition of Th in - Layer, Rh izoma panac is Japonnic i group and contro l group w ere good
th in - layer graph, The ca libration curves of G insenoside in Rh izoma panac is Japonnic iw ere
good linearity over the range of 0. 96 to 4. 80 μg w ith HPLC, The regress ive equation is Y =
61759X+21963, r=0. 9995. Conclusion The bas ic compoment ofG insenos ide was smi ilitude in
Rh izoma panac is Japonnic i from lower altitude and higher altitude areas, the content ofG insen-
os ide Rg1 and Re in stem from high a lt itude areaswere slightly h igher, butwere smi ilitude in
root.
【Keywords】Rh izoma panac is Japonn ic i;G insenoside Rg1;G insenos ide Re, TLC, HPLC
  竹节参为五加科植物竹节参 Panax japonicusC.
A. Mey的干燥根茎 。主产于云南 、贵州 、四川 、湖北
等省 ,现以湖北恩施自治州为集中分布地带 , 20世
纪 90年代当地野转家驯化栽培获得成功 ,现为国家
科技部创新基金支持的产业化推广项目。恩施目前
已成为全国竹节参规范化种植研究示范基地和药
材 、种子 、种苗集散地[ 1] 。竹节参具有滋补强壮 、散
瘀止痛 、止血祛痰的功效 ,用于病后虚弱 、劳嗽咯血 、
咳嗽痰多 、跌扑损伤等病症 [ 2] 。竹节参主要成分包
括竹节人参皂苷 、人参皂苷 、三七皂苷 R[ 3] ,其药理
作用和临床应用引起研究者的普遍关注 [ 3 ~ 5] 。为缓
解药材资源的不足 ,已采用将竹节参由野生转家种 ,
且表现抗逆性强 ,生产成本低 ,是一味极具开发潜力
的名贵中药材 ,当地药农掌握了丰富的种植经验。
由于栽培品生长环境不尽相同 ,在化学成分上可能
存在差异。为此 ,我们对栽培在同一地区不同海拔
的竹节参所含的人参总皂苷进行了比较。
1 仪器与材料
(1)仪器 WATERS 600高效液相色谱仪;WA-
TERS TM 600 PUNMP;WATERS 2996 PDA二极管阵
列检测器 ;EMPOWER化学工作站。
(2)试剂:乙腈为光谱纯 , 重蒸水 ,磷酸及其他
试剂均为分析纯 。
(3)对照品:人参皂苷 Rg1、Re由中国药品生物
制品检定所提供 。
(4)样品:高海拔栽培竹节参 (海拔 1560m)采
自宣恩县椿木营乡 、低海拔栽培竹节参 (海拔 950
m)采自建始县景阳镇偏袒村 ,经湖北民族学院张万
福教授鉴定为五加科植物竹节参 Panax japonicusC.
A. M ey的干燥根茎 。
2 方法和结果
2. 1 薄层色谱鉴别  参照人参薄层色谱鉴别
法 [ 2] ,取上述三地的药材样品 ,将其下部根与根茎
分开 ,碾成粗粉 ,各取约 1.0 g,精密称定 ,置 50m l圆
底烧瓶中 ,加氯仿 40m l加热回流 1 h,弃去氯仿液 ,
药渣挥干溶剂 ,加水 0.5m l拌匀湿润后 ,加水饱和
的正丁醇 10m l,超声处理 30m in,吸取上清液 ,加 3
倍量氨试液 ,摇匀 ,放置分层 ,取上层液蒸干 ,残渣加
甲醇 1m l溶解 ,作为供试品溶液。取人参皂苷 Rg1 、
Re对照品 ,加甲醇制成每 1m l含 1mg的溶液 ,作为
对照品溶液 。吸取上述 8种溶液各 5μl,分别点于
同一硅胶 G薄层板上 ,以正丁醇 -乙酸乙酯 -水(4
∶1;5)上层液为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,喷 10%硫
酸乙醇溶液 ,在 105℃烘数分钟 。供试品色谱中 ,在
与对照品色谱相应位置上 ,显相同的紫红色斑点 。
结果见图 1。
2. 2 含量测定 参照人参中人参皂苷 (Re+Rg1)
的含量测定进行 [ 2] 。
2. 2. 1 色谱条件:色谱柱:250mm ×4. 6mm不锈钢
柱 ,填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶(5μm)。流动
相:乙腈 — 0.1%磷酸溶液 (25∶75)。检测波长:203
nm;柱温:30℃。流速 1.0m l /m in。
2. 2. 2 对照品溶液的制备:因人参皂苷 Re与人参
皂苷 Rg1出峰时间相同 ,在配制对照品溶液时各精
密称定 1.2mg用甲醇溶解 ,定容至 10m l,即得 0.24
mg /m l的对照品溶液 。
2. 2. 3 供试品溶液制备:分别取上述两个产地栽培
图 1 竹节参根茎和根人参皂苷薄层色谱图
1.高海拔栽培竹节参根茎  2.低海拔栽培竹节参根茎
3.高海拔栽培竹节参根  4.低海拔栽培竹节参根
5.人参皂苷 Rg1对照品 6.人参皂苷 Re对照品
的竹节参的根和根茎药材粗粉 1.0 g,精密称定 ,按
中国药典 2000年版人参含量测定法制备供试品溶
液。
2. 2. 4 线性关系考察:精密吸取浓度为 0.24mg /m l
的人参皂苷 Rg1、 Re的对照品溶液 2、4、6、8、10μl,
分别注入色谱仪 , 测定峰面积 ,以峰面积为纵坐标
(Y),进样量为横坐标 (X),计算得回归方程 Y =
336182x - 30241 r=0.9998。结果表明 ,进样量在
0.48 ~ 2.40μg范围内与峰面积呈良好的线性关系 。
2. 2. 5 精密度试验:精密吸取同一浓度的对照品溶
液 ,按上述色谱条件测定 ,重复进样 5次 。测定峰面
积 , RSD=0. 76%,表明精密度良好 。
2. 2. 6 稳定性试验:分别精密吸取同一份对照品溶
液 ,分别于配制 0、2、4、8、12、24 h进样 ,记录峰面积
积分值 , RSD=1.46%。结果表明 ,供试品溶液在 24
h内基本稳定。
2. 2. 7 回收率试验:精密吸取高海拔竹节参根茎供
试品溶液 ,加入精密称定的人参皂苷 Re、Rg1对照
品 ,依法测定回收率 =98.47%, RSD=2.44%。
2. 2. 8 样品测定:高海拔竹节参供试品溶液和人参
皂苷对照品溶液的色谱图见图 2,在选定的条件下
供试品溶液中有一个色谱峰对照品色谱峰的保留时
间一致。取 4种药材供试品溶液按上述色谱条件分
别进行测定 ,其相应位置人参皂苷的含量见表 1。
表 1 不同海拔栽培竹节参中以人参皂苷
(Re +Rg1)为对照品测定的含量 (n=3, x ±s)
样 品 (Re+Rg1)
高海拔根茎 0. 448±0. 012
低海拔根茎 0. 347±0. 017
高海拔根 0. 329±0. 013
低海拔根 0. 336±0. 008
13第 2期              湖北民族学院学报 医学版         
图 2 竹节参根茎和人参皂苷
(Re +Rg1)HPLC色谱图
A:高海拔栽培竹节参根茎 B:人参皂苷对照品
3 小结
根据我们的实地调查 ,恩施地区野生竹节参的
分布主要集中在平均海拔 1500m左右的山地 ,海拔
1200m以上即有发现 , 1000m以下罕见 ,可能高海
拔山区适宜竹节参生长是一个原因。从含量测定结
果看高海拔栽培竹节参根茎中对应于对照品位置的
人参皂苷含量略高于低海拔根茎 , 而高海拔栽培竹
节参的根与低海拔根的含量相近(相差仅为 1%左
右)。竹节参中根茎占绝大部分 ,测定结果显示高
海拔栽培竹节参的质量略优于较低海拔的栽培品。
但从薄层色谱的比较看 ,两者的人参皂苷的种类和
含量没有发现明显的差异 ,因此 ,考虑到栽培的产量
和栽培的便利性 ,较低海拔栽培竹节参也是可取的。
竹节参在民间得以广泛应用 ,作为珍稀的道地药材 ,
它的资源保护以及药用价值的开发和利用具有重要
和长远的意义 。
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[收稿日期 2006 -02 - 15]
(上接第 11页 )导 ICAM - 1的合成 ,进一步加重炎
症反应 [ 7] 。本研究证实了参附注射液对 NF - кB、
ICAM - 1和 IL -6有明显的抑制作用 ,减轻缺血再
灌注心肌组织损伤。这可能与其抑制 NF - кB表
达 ,从而调节 ICAM - 1和 IL - 6的转录 、合成和较
低 IL -6的基因表达间接诱导 ICAM - 1的合成减
少等因素有关。
心肌缺血再灌注损伤的发生有多种机制参与 ,
作为一种炎性反应 ,其发展取决于机体内促炎和抗
炎因子的动态平衡 ,过度抑制炎性因子的活性会破
坏此种平衡 ,降低机体的防御能力 ,反而加重病情的
发展。参附注射液无毒副作用 ,是一种安全 、有效的
治疗方法。
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