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第31卷第4期
2015年8月
德 州 学 院 学 报
Journal of Dezhou University
Vol.31,No.4
Aug.,2015
麦瓶草的染色体数目观察及核型分析
张 雷,姚洪庆,吴允鹏,郭明明,于凯丽,仇春梅,张 红
(德州学院 生态与园林建筑学院,山东 德州 253023)
摘 要:为了解麦瓶草的染色体数目和染色体核型特点,以麦瓶草的根尖为材料,采用常规压片法,观察其染
色体数目并进行核型分析.结果表明:麦瓶草的染色体数目为2n=2 0,核型公式为2n=2x=6m+4st,其中第1、
2、6、7对为亚端部着丝粒染色体,第3、4、5、8、9、10对为中部着丝粒染色体.核型分类为基本对称型的2A型.
关键词:麦瓶草;染色体数目;核型分析
中图分类号:S647 文献标识码:A 文章编号:1004-9444(2015)04-0080-04
收稿日期:2014-11-07
通讯作者简介:张红(1971-),女,山东平原人,博士,讲师,主要从事作物遗传育种研究.
1 引言
麦瓶草(Silene conoidea)别名梅花瓶、香炉草、
米瓦罐、净瓶,石竹科,蝇子草属(麦瓶草属),一、二
年生草本植物,主要生长在我国黄河以南、长江以北
一些地区的麦田.其幼苗(面条菜)营养丰富,气味清
香、甘甜,是一种深受城乡人们喜爱的野生蔬菜,但
由于近年来随着麦田除草剂的广泛使用,麦瓶草几
乎绝迹,目前虽有少量的人工栽培,但种植面积小,
只在大酒店、宾馆和超市有少量供应,是亟待开发的
叶菜新品种.目前,关于麦瓶草的研究仅限于其基本
特性、营养成分和栽培技术等方面的摸索[1-5],对其
遗传学方面的研究未见报道,细胞遗传学是一切遗
传育种工作的基础,对麦瓶草的染色体数目和核型
进行研究,可以为其遗传利用和细胞学分析提供参
考.对于这一野菜资源的遗传改良和新品种的培育
具有重要的意义.
2 材料方法
2.1 材料:野生麦瓶草的种子(采于山东省德州市
郊区).
2.2方法
1)染色体制片
取材:选麦瓶草充实饱满的种子浸种10h,然后
放到铺有两层滤纸的培养皿里进行催芽,温度为
16℃,上午8:30~10:30取1~2cm左右的根尖,每
隔30min取1次,分5次取完.
预处理:把根尖放到冰水混合物中预处理24h,
使染色体进一步浓缩.
固定:用卡诺氏固定液(无水乙醇:冰醋酸体积
比为3∶1)固定24h.
解离:1mol/L 的 HCL 在 60OC 水 浴 解 离
8min,解离时间过短,细胞不易压开;时间过长,则
染色困难,染色体发粘.
制片:把解离好的根尖在去离子水里漂洗两遍,
滤纸吸干水分,放到载玻片上,切取根尖分生组织部
位,滴一小滴改良卡宝品红染色液,用镊子把分生组
织敲碎,盖盖玻片,电子显微镜下镜检,选分裂相好
的细胞进行染色体计数和照相.
2)染色体计数及核型分析
随机选取30个染色体条带清晰的有丝分裂中
期的细胞,统计染色体的数目,选5个染色体分散良
好、条带清晰的细胞显微照相,照片打印后用游标卡
尺进行染色体长度的测量、换算、求平均值.根据染
色体的大小和形态特征,对同源染色体进行配对,然
后按从大到小的顺序排列粘贴,形成核型图,并画出
模式图.核型分析根据李懋学的方法进行[6];分类按
Stebbins的分类标准[7];核型不对称系数的计算按
Arano的方法(As.K=长臂总长/全组染色体总长
×100%)[8];模式图的制作根据乔永刚介绍的方法 用EXCEL和画图软件完成[9].
3 结果分析
图1 麦瓶草有丝分裂中期染色体和染色体核型图
通过对随机选取的面条菜30个有丝分裂中期细胞的染色体记数,发现所有细胞的染色体数目都是20
条,没有发现非整倍体细胞,说明面条菜的染色体数目为2n=2x=20(图1).
序号
Number
绝对长度(μm)
Absolute length
相对长度(%)
Relative length
短臂 长臂 总长 短臂 长臂 总长
Short arm Long arm Total length Short arm Long arm Total length
着丝粒指数
Centromere index
臂比
Arm ratio
类型
type
1 1.13 4.18 5.31 2.66 9.82 12.48 21.30 3.69 st
2 0.78 4.07 4.84 1.82 9.56 11.39 16.01 5.25 st
3 2.13 2.60 4.73 5.01 6.12 11.13 45.03 1.22 m
4 1.80 2.56 4.36 4.24 6.01 10.25 41.33 1.42 m
5 1.63 2.72 4.35 3.82 6.40 10.22 37.40 1.67 m
6 0.90 3.33 4.23 2.12 7.82 9.94 21.30 3.69 st
7 0.95 3.18 4.12 2.22 7.47 9.69 22.94 3.36 st
8 1.95 2.11 4.05 4.58 4.95 9.53 48.02 1.08 m
9 1.38 1.90 3.28 3.25 4.46 7.71 42.14 1.37 m
10 1.49 1.77 3.26 3.51 4.15 7.66 45.78 1.18 m
总计(Total) 14.12 28.38 42.5 33.22 66.78 100.00
表1 面条菜染色体核型分析
麦瓶草全组染色体的总长度为42.5μm,平均
长度为4.25μm,最长染色体的长度为5.31μm,最
短染色体长度为3.26μm,最长与最短染色体比值
为1.6.相对长度的变化范围为7.66% ~12.68%,
10对染色体中,6对为臂比值大于1.01小于1.7的
中部着丝粒染色体,4对为臂比值大于3.01小于7
的亚端部着丝粒染色体,其染色体的核型公式为2n
=2x=6m+4st(见表1,图2).核型不对称系数为
66.78%,最长染色体与最短染色体之比为1.63,臂
比大于2∶1的染色体占的百分比为0.4,按Steb-
bins的核型不对称标准,属于“2A”型.
18 第4期 张雷,等:麦瓶草的染色体数目观察及核型分析
图2 面条菜染色体核型模式图
4 讨论
李志敏等[10]报道横断山区细蝇子草染色体数
为2n=24,核型为2A型.王汉屏等[11]报道内蒙古
的蝇子草属(麦瓶草属)植物Silene ningxiaensisC.
L.Tang的核型为2A型,染色体数目为2n=24;
Silene repens Patr.的染色体数目为2n=48,为四倍
体.并对蝇子草属(麦瓶草属)已知染色体资料进行
了统计,认为该属主要维持在二倍体水平上的进化.
王汉屏[12]研究分析表明:麦瓶草属的染色体基数有
X=6,8,9,10,12,14,15,17,其中有307种为
X=12,占95%,X=10和X=15的均只有两种,X
=17的仅一种.本研究表明:德州市郊区的的野生
麦瓶草为二倍体,核型属于2A型,染色体数目为2n
=20,麦瓶草的核型不对称系数为66.78%.根据
Stebbins[7]的核型进化基本趋势是由对称向不对称
发展的观点,作为一种野菜,麦瓶草的进化地位应该
是比较低的,这和王汉屏的研究结论比较一致.
5 结论
麦瓶草的染色体数目为2n=2 0,核型公式为
2n=2x=6m+4st,核型不对称系数为66.78%,核
型分类为基本对称型的2A型.
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28 德州学院学报 第31卷
Observation Of Chromosome Number And Karyotype Analysis Of
Silene Conoidea L.
ZHANG Lei,YAO Hong-qing,WU Yun-peng,GUO Ming-ming,
YU Kai-li,QIU Chun-mei,ZHANG Hong
(School of Environmental Garden and Building,Dezhou University,Dezhou Shandong 253023,China)
Abstract:In order to know wel chromosome number and karyotype characteristics of silene conoidea,Ob-
servation of chromosome number and karyotype analysis of silene conoidea were carried out by conventional
pressed disc method making root tips as materials.It indicated that:the chromosome number of Silene
conoidea was 2n=20;the karyotype formula were 2n=2x=6m+4st,with 6pairs of metacentric chromo-
somes(3,4,5,8,9,10)and 4pairs of subterminal centromere chromosomes(1,2,6,7);The karyo-
type belongs to 2A,presented a ultimately symmetry karyotype.
Key words:silene conoidea;chromosome;karyotype analysis
(上接第51页)
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Research and Application of Mesoporous Material in Electrochemical Biosensor
YANG Lei 1,ZHANG Hui 2,GAO Teng1,YAN Zhao-qing1,
ZHANG Yong1,WEI Qin1*
(1.Key Laboratory of Chemical Sensing &Analysis in Universities of Shandong,School of Chemistry and
Chemical Engineering,University of Jinan,Jinan 250022,China;
2.Department of Municipal and Environmental Engineering,Shandong Urban Construction Vocational
Colege,Jinan 250103,China)
Abstract:The development history of biosensor are reviewed.The characteristics of mesoporous material
are briefly described.The sol-gel method and hydrothermal synthesis method in synthesizing the meso-
porous materials are mainly introduced.By summarizing the application of mesoporous material in enzyme
sensor,DNA sensor and immunosensor in recent years,we point out the problems faced of the mesoporous
materials in electrochemical biosensor applications.Also the application of mesoporous material in electro-
chemical biosensor is prospected.
Key words:biosensor;mesoporous material;enzyme sensor;DNA sensor;immunosensor
38 第4期 张雷,等:麦瓶草的染色体数目观察及核型分析