全 文 ：细胞的增殖作用［１］；在无细胞毒浓度剂量下能够提
高白血 病 Ｋ５６２／Ａ０２ 耐 药 细 胞 内 的 柔 红 霉 素
（ＤＮＲ）浓度，下调Ｐ－ｇｐ的表达而减少药物外排，使
其对ＤＮＲ的敏感性显著增高［１］。
在本研究中，ＭＴＴ结果显示解毒化瘀药含药
血清对Ｋ５６２／Ａ０２细胞有不同程度抑制作用，呈浓
度依赖性，其浓度越高抑制作用越强，说明解毒化瘀
药含药血清能够抑制Ｋ５６２／Ａ０２耐药细胞的生长作
用。流式细胞研究显示空白牛血清培养Ｋ５６２／Ａ０２
细胞凋亡率显著低于其他经药物处理过的 Ｋ５６２／
Ａ０２细胞的凋亡率，有极显著差异（Ｐ＜０．０１），中药
含药血清高、中、低３个剂量间两两比较具有极显著
差异（Ｐ＜０．０１），以高剂量组最明显。解毒化瘀方
对Ｋ５６２及Ｋ５６２／Ａ０２细胞明显的抑制作用可能是
通过诱导其凋亡而实现的。
参考文献：
［１］　马武开，张惠臣．解毒化瘀药含药血清对白血病Ｋ５６２／Ａ０２细
胞耐药逆转作用的研究［Ｊ］．国际中医中药杂志，２００７，２９（４）：
１９５－１９７．
［２］　常宏宇，潘凯丽，马福成，等．姜黄素、红霉素逆转Ｋ５６２／Ａ０２细
胞多药耐药机制的研究［Ｊ］．中华血液学杂志，２００６，２７（４）：
２５４－２５８．
［３］　常晓慧，向阳，黄世林．中药逆转白血病多药耐药的研究［Ｊ］．
第一军医大学分校学报．２００４，２９（４），２００－２０３．
［４］　马武开，黄礼明．白血病多药耐药的中医病因病机探讨［Ｊ］．
浙江中医杂志，２００６，４１（９）：５１８．
［收稿日期］２０１２－０２－１４
［基金项目］自治区自然科学基金项目（编号：２０１０２１１Ａ２６）；国家自然科学基金项目（编号：８１０６０３２８）　［作者简介］赵翡翠，女，硕士，副主任
中药师，研究方向：中药材资源及质量标准研究，电话：１３９９９２９９１０６，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｚｆｆｃｃ＠１２６．ｃｏｍ　［通讯作者］李杰，女，博士研究生，副教授，研究
方向：中药资源及方剂剂量学研究，电话：１３８９９９５５８２２，Ｅ－ｍｉａｌ：ｚｈａｏｆｅｉｃｕｉ０００＠１６３．ｃｏｍ
新疆乌头属植物中双酯型生物碱的含量测定
赵翡翠１，姜林１，刘淑敏２，李杰２　（１．新疆医科大学附属中医医院药学部，新疆 乌鲁木齐８３００００；２．新疆医科大学中医学
院，新疆 乌鲁木齐８３００５４）
［摘要］　目的：采用高效液相色谱法测定新疆乌头属植物中双酯型生物碱（乌头碱、新乌头碱、次乌头碱）的含量。方法：采用
Ｘ　Ｂｒｉｄｇｅ　Ｃ１８色谱柱（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５μｍ），以甲醇－水－三氯甲烷（浓氨水调节ｐＨ为１０．６２）（７０∶３０∶２）为流动相，流速为１．０
ｍＬ·ｍｉｎ－１，进样量１０μＬ，检测波长为２３５　ｎｍ。结果：（１）ＨＰＬＣ法测定乌头碱在０．０２０　１～２．０１２　０　ｍｇ·ｍＬ
－１范围内线性关系
良好（ｒ＝０．９９９　９）；平均加样回收率为１００．０６％，ＲＳＤ为０．６０％；新乌头碱在０．００２　２～０．０８６　４　ｍｇ·ｍＬ－１范围内线性关系良
好（ｒ＝０．９９９　９）；平均加样回收率为９９．６９％，ＲＳＤ为１．０４％；次乌头碱在０．００２　１～０．０８４　０　ｍｇ·ｍＬ－１范围内线性关系良好（ｒ
＝０．９９９　９）；平均加样回收率为９９．６８％，ＲＳＤ为１．０８％。样品含量测定结果表明新疆乌头属植物含有双酯型生物碱，但不同
种之间含量和成分有一定的差异。（２）新疆乌头属植物中含有乌头碱、新乌头碱和次乌头碱，但不同种植物之间，成分和含量
有一定差异，准噶尔乌头、白喉乌头中双酯型生物碱含量较高。结论：本实验建立了新疆乌头属植物中双酯型生物碱的ＨＰＬＣ
含量测定方法，本法方便、准确，为进一步研究和利用新疆乌头属植物奠定了基础。新疆乌头属植物中准噶尔乌头和白喉乌
头双酯型含量较高，具有潜在药用价值，值得进一步深入研究。
［关键词］　新疆乌头属植物；双酯型生物碱；高效液相色谱法
［中图分类号］Ｒ９２７．２　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）２０－１６０３－０４
Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｄｉｅｓｔｅｒ　ｄｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ（ＤＤＡｓ）ｏｆ　Ａｃｏｎｉｔｕｍｉｎ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　ｂｙ　ＨＰＬＣ
ＺＨＡＯ　Ｆｅｉ－ｃｕｉ　１，ＪＩＡＮＧ　Ｌｉｎ１，ＬＩＵ　Ｓｈｕ－ｍｉｎ２，ＬＩ　Ｊｉｅ２（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　ｏｆ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｕｒｕｍｑｉ　８３００００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｕｒｕｍｑｉ　８３００５４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ａｃｏｎｉｔｉｎｅ，ｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ，ｍｅｓａｃｏｎｉｎｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ａｃｏｎｉｔｕｍｐｌａｎｔｓ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．ＭＥＴＨ－
ＯＤＳ　Ｔｈｅ　Ｘ　Ｂｒｉｄｇｅ　Ｃ１８ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５μｍ）ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ，ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｗａｔｅｒ－ｔｒｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ（Ｕ－
ｓｉｎｇ　ｓｔｒｏｎｇ　ａｍｍｏｎｉａ　ｔｏ　ａｄｊｕｓｔ　ｐＨ　ｔｏ　１０．６２）（７０∶３０∶２）ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ，ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｓａｍｐｌｅ　ｓｉｚｅ　ｗａｓ
１０μＬ，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ａｔ　２３５　ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ　（１）Ｂｙ　ＨＰＬＣ　ａｃｏｎｉｔｉｎｅ　ｈａｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ（ｒ＝０．９９９　９）
ｂｅｔｗｅｅｎ　０．０２０　１－２．０１２　０　ｍｇ·ｍＬ－１，ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　１００．０６％，ＲＳＤ＝０．６０％；ｍｅｓａｃｏｎｉｎｅ　ｈａｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎ－
ｓｈｉｐ（ｒ＝０．９９９　９）ｂｅｔｗｅｅｎ　０．００２　２－０．０８６　４　ｍｇ·ｍＬ－１，ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．６９％，ＲＳＤ＝１．０４％；ｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ　ｈａｄ　ａ
ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ（ｒ＝０．９９９　９）ｂｅｔｗｅｅｎ　０．００２　１－０．０８４　０　ｍｇ·ｍＬ－１，ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．６８％，ＲＳＤ＝１．０８％．
·３０６１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２０期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｏｃｔ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２０
DOI:10.13286/j.cnki.chinhosppharmacyj.2012.20.008
Ｓａｍｐｌｅ　ａｓｓａｙ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ａｃｏｎｉｔｕｍｐｌａｎｔｓ　ｃｏｎｔａｉｎｅｄ　ｄｉｅｓｔｅｒ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｋｉｎｄｓ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｈｉｇｈ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉｅｓｔｅｒ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ａｃｏｎｉｔｕｍｐｌａｎｔｓ．Ｉｎｉｔｉａｌｙ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｏｆ　Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｌｅｕｃｏｓｔｏｍｕｍ　Ｗｏｒｏｓｃｈ．
ａｎｄ　Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｓｏｏｎｇａｒｉｃｕｍＳｔａｐｆ．，ｗｈｉｃｈ　ｈａｄ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｖａｌｕｅ　ａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｗｏｒｔｈｙ　ｏｆ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｂｅｉｎｇ　ｓｔｕｄｉｅｄ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ａｃｏｎｉｔｕｍｓｏｏｎｇａｒｉｃｕｍ；ｄｉｅｓｔｅｒ　ｄｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ（ＤＤＡｓ）；ＨＰＬＣ
　　乌头类中药材具有悠久的临床运用历史，包括
附子、川乌、草乌等。中医认为乌头类药材有大热、
大毒的药性。其主要的有效成分也是毒性成分为：
双酯型生物碱，主要包括乌头碱、新乌头碱、次乌头
碱。新疆乌头属植物是新疆哈萨克民族传统民族药
和草乌的重要来源之一，在治疗新疆地区多发的风
寒湿类疾病方面有独特优势［１－２］。但目前针对新疆
乌头属植物的深入研究较少，目前尚无其活性成分
的相关报道。因此，本实验采用 ＨＰＬＣ方法测定新
疆乌头属植物中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量，
探明其化学资源状况，为新疆乌头属植物资源合理
开发利用提供科学依据。
１　材料
Ｗａｔｅｒｓ２６９５高效液相色谱仪（美国 Ｗａｔｅｒｓ公
司）；Ｄｉｒｅｃｔ－ＱＴＭ５超纯水仪（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ公司）。乌头
碱（批号１１０７２０－２００４１０）、新乌头碱（批号１１０７９９－
２００４０４）和次乌头碱（批号１１０７９８－２００４０４）均购于中
国食品药品检定研究院，其他试剂均为分析纯。
川乌、草乌样品分别购自安徽省亳州市双华中
药饮片厂（批号１０１００１，１００７１５，产地均为：四川），
以上样品经新疆医科大学附属中医医院中药药学实
验室李永和主任中药师鉴定分别为毛茛科植物乌头
（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉ　Ｄｅｂｘ．）、北乌头（Ａｃｏｎｉｔｕｍ
ｋｕｓｎｅｚｏｆｆｉｉ　Ｒｅｉｃｈｂ．）的干燥母根。
新疆乌头属植物样品于２０１０－２０１１年分别采
自新疆伊犁地区尼勒克、新源、特克斯等不同产地。
以上样品亦经李永和主任中药师鉴定分别为毛茛科
植物准噶尔乌头（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｓｏｏｎｇａｒｉｃｕｍ Ｓｔａｐｆ．）、
白喉乌头（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｌｅｕｃｏｓｔｏｍｕｍ　Ｗｏｒｏｓｃｈ．）、林地
乌头（Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｎｅｍｏｒｕｍ Ｍ．Ｐｏｐ）、伊梨乌头（Ａｃｏ－
ｎｉｔｕｍ　ｔａｌａｓｓｉｕｍｖａｒ．ｖｉｌｏｓｕｕｍ　Ｗ．Ｔ．Ｗａｎｇ）、空
茎乌头［Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ａｐｅｔａｌｕｍ （Ｈｕｔｈ）Ｂ．Ｆｅｄｔｓｃｈ．］
的干燥根。
２　方法与结果
２．１　色谱条件和系统适用性试验　采用Ｘ　Ｂｒｉｄｇｅ
Ｃ１８色谱柱（２５０　ｍｍ×４．６　ｍｍ，５μｍ），以甲醇－水－氯仿
（浓氨水调节ｐＨ为１０．６２）（７０∶３０∶２）为流动相，流速
为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，进样量１０μＬ，检测波长为２３５　ｎｍ。
理论板数按乌头碱峰计算应不低于２　０００。结果供试
品及对照品色谱分离度良好，见图１。
图１　新疆乌头属植物高效液相色谱图
１－新乌头碱；２－乌头碱；３－次乌头碱；Ａ．对照品；Ｂ．草乌；Ｃ．川乌；Ｄ．
林地乌头（特克斯）；Ｅ．准噶尔乌头（新源）；Ｆ．准噶尔乌头（巩留）；Ｇ．
准噶尔乌头（尼勒克）；Ｈ．伊犁乌头（塔城）；Ｉ．伊犁乌头（巴里坤）；Ｊ．
空茎乌头（特克斯）；Ｋ．白喉乌头（尼勒克）；Ｌ．白喉乌头（新源）
Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ
１－ｍｅｓａｃｏｎｉｔｉｎｅ；２－ａｃｏｎｉｔｉｎｅ；３－ｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ；Ａ．ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ；
Ｂ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｋｕｓｎｅｚｏｆｆｉｉ　Ｒｅｉｃｈｂ；Ｃ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉ；Ｄ．Ａｃｏｎｉ－
ｔｕｍ　ｎｅｍｏｒｕｍ　Ｍ．Ｐｏｐ（Ｔｅｘ）；Ｅ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｓｏｏｎｇａｒｉｃｕｍ　Ｓｔａｐｆ．
（ＸｉｎＹｕａｎ）；Ｆ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｓｏｏｎｇａｒｉｃｕｍ Ｓｔａｐｆ．（ｇｏｎｇｌｕ）；Ｇ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ
ｓｏｏｎｇａｒｉｃｕｍＳｔａｐｆ．（Ｎｉｌｅｋｅ）Ｈ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｌａｓｓｉｕｍｖａｒ．ｖｉｌｏｓｕｕｍ
Ｗ．Ｔ．Ｗａｎｇ（Ｔａｃｈｅｎｇ）；Ｉ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｔａｌａｓｓｉｕｍｖａｒ．ｖｉｌｏｓｕｕｍ　Ｗ．
Ｔ．Ｗａｎｇ（Ｂａｒｋｏｌ）；Ｊ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ａｐｅｔａｌｕｍ （Ｈｕｔｈ）Ｂ．Ｆｅｄｔｓｃｈ．
（Ｔｅｘ）；Ｋ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ　ｌｅｕｃｏｓｔｏｍｕｍ　Ｗｏｒｏｓｃｈ．（Ｎｉｌｅｋｅ）；Ｌ．Ａｃｏｎｉｔｕｍ
ｌｅｕｃｏｓｔｏｍｕｍ　Ｗｏｒｏｓｃｈ．（ＸｉｎＹｕａｎ）
２．２　对照品溶液的制备　分别精密称取乌头碱、新
乌头碱、次乌头碱对照品适量，置１０　ｍＬ量瓶中，加
二氯甲烷溶解并定容至刻度，摇匀，得乌头碱质量浓
度为２．０１２　ｍｇ·ｍＬ－１，新乌头碱质量浓度为０．１０８
ｍｇ·ｍＬ－１，次乌头碱质量浓度为０．１０５　ｍｇ·ｍＬ－１的
对照品混合溶液。
２．３　供试品溶液的制备　分别取新疆乌头属植物
粉末（粉碎后过３号筛）各约０．５　ｇ，精密称定，置锥
形瓶中，加１０％氨试液４　ｍＬ，浸润，精密加入乙醚
·４０６１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２０期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｏｃｔ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２０
２０　ｍＬ，超声处理（功率２５０　Ｗ，频率４０　ｋＨｚ；水温在
２５℃以下）１０　ｍｉｎ，放冷，再称定质量，用乙醚补足
减失的质量，放置过夜，滤过，并用３０　ｍＬ乙醚分３
次洗涤药渣，合并滤液，置４０℃水浴挥干，残渣用二
氯甲烷溶解并转移至５　ｍＬ量瓶中，加二氯甲烷至
刻度，摇匀，取续滤液，即得。
２．４　线性范围的考察　分别精密吸取“２．２”项下乌
头碱对照品溶液各０．１，０．２５，０．５，１．０，２．０，４．０，
５．０，１０．０ｍＬ，置１０　ｍＬ量瓶中，加二氯甲烷溶解并
定容至刻度，摇匀，再精密吸取２．２”项下乌头碱对
照品溶液１０μＬ，分别测定峰面积。以上述乌头碱
对照品溶液进样浓度为横坐标，峰面积积分值为纵
坐标，进行线性回归，得乌头碱回归方程：ｙ＝
９　４５４　６２７　ｘ－３６　１８２，ｒ＝０．９９９　９。
分别精密量取“２．２”项下新乌头碱和次乌头碱
对照品溶液各０．１，０．２５，０．５，１．０，２．０，４．０ｍＬ，置５
ｍＬ量瓶中，加二氯甲烷溶解并定容至刻度，摇匀，
分别测定峰面积。以上述新乌头碱、次乌头碱对照
品的进样浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进
行线性回归，得新乌头碱回归方程：ｙ＝９　６７７　８９８　ｘ
＋１６　７５０，ｒ＝０．９９９　９；得次乌头碱回归方程ｙ＝
１３　６３０　６４４ｘ＋２７　６９７，相关系数ｒ＝０．９９９　９。
实验表明，乌头碱进样在０．０２　０１２～２．０　１２１
ｍｇ·ｍＬ－１、新 乌 头 碱 进 样 在０．０　０２２～０．０　８６４
ｍｇ·ｍＬ－１、次 乌 头 碱 进 样 在０．０　０２１～０．０　８４０
ｍｇ·ｍＬ－１范围内与峰面积呈良好的线性关系。
２．５　精密度考察　精密吸取“２．２”项下对照品溶液
１０μＬ，连续进样５次，按上述色谱条件进行测定，结
果乌头碱、新乌头碱、次乌头碱峰面积的ＲＳＤ分别
为０．３１％、０．８７％、０．５９％，表明精密度较好。
２．６　稳定性试验　按“２．３”项下方法制备新源准噶
尔乌头样品（新源）供试品溶液，精密吸取，按上述色
谱条件进行测定，每隔２　ｈ进样一次，共考察８　ｈ，结
果乌头碱、新乌头碱、次乌头碱峰面积的ＲＳＤ分别
为１．０１％，０．９４％，１．０３％；表明上述供试品溶液稳
定性较好。
２．７　重复性试验　精密称取准噶尔乌头（新源）样
品６份，按“２．３”项下方法制备供试品溶液，按上述
色谱条件进行测定，结果乌头碱、新乌头碱和次乌头
碱峰面积的ＲＳＤ分别为１．５２％，１．７３％，１．６８％；表
明样品重复性较好。
２．８　加样回收率试验　取已知量准噶尔乌头（新
源）样品６份，每份约０．２　ｇ，精密称定，每份分别精
密加入“２．２”项下对照品溶液各１　ｍＬ，按“２．３”项下
方法制得供试品溶液。按上述色谱条件测定，计算
回收率，结果见表１。表明本测定方法的回收率符
合要求。
２．９　样品的测定　分别取新疆乌头属植物，按
“２．３”项下方法制得供试品溶液，进样１０μＬ，按上
述色谱条件测定，结果见表２。
表１　加样回收率测定结果
Ｔａｂ　１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ
编
号
取样量
／ｇ
原有量／ｍｇ 测定量／ｍｇ 加入对照品量／ｍｇ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
乌头碱
新乌
头碱
次乌
头碱
乌头碱
新乌
头碱
次乌
头碱
乌头碱
新乌
头碱
次乌
头碱
乌头碱
新乌
头碱
次乌
头碱
乌头碱
新乌
头碱
次乌
头碱
１　０．２００　２　１．７４９　６　０．０２２　２　０．０２４　４　１．９５１　１　０．０４３　９　０．０４５　５
２　０．２０１　７　１．７４９　９　０．０２３　１　０．０２４　９　１．９５０　８　０．０４４　５　０．０４５　８
３　０．２０２　４　１．７５０　２　０．０２２　９　０．０２５　４　１．９５１　２　０．０４４　２　０．０４６　１　０．２０１　２　０．０２１　６　０．０２１　０　１００．０６　９９．６９　 ９９．６８　 ０．６０　 １．０４　１．０８
４　０．２０１　９　１．７５０　２　０．０２２　６　０．０２５　１　１．９４９　８　０．０４４　１　０．０４５　９
５　０．２０１　５　１．７５０　１　０．０２２　４　０．０２４　８　１．９５３　４　０．０４３　８　０．０４６　１
６　０．２００　４　１．７４９　２　０．０２２　２　０．０２４　６　１．９５０　８　０．０４４　１　０．０４５　４
表２　含量测定结果（ｎ＝３）
Ｔａｂ　２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ（ｎ＝３）
序号 样品
乌头碱 新乌头碱 次乌头碱
质量浓度
／ｍｇ·ｍＬ－１
含量
／ｍｇ·ｇ－１
质量浓度
／ｍｇ·ｍＬ－１
含量
／ｍｇ·ｇ－１
质量浓度
／ｍｇ·ｍＬ－１
含量
／ｍｇ·ｇ－１
合计
／ｍｇ·ｇ－１
１ 尼勒克白喉乌头 ０．４３０　４　 ４．３０３　５　 ０．０１６　１　 ０．１６０　６　 ０．０５０　２　 ０．５０２　３　 ４．９６６　５
３ 新源白喉乌头 ０．３３１　１　 ３．３０９　３　 ０．０２０　１　 ０．２０１　４　 ０．０３５　３　 ０．３５３　０　 ３．８６３　６
４ 尼勒克准噶尔乌头 ０．９５５　９　 ９．５３８　４　 ０．０１３　３　 ０．１３２　５　 ０．０１８　９　 ０．１８８　５　 ９．８５９　３
５ 巩留准噶尔乌头 ０．９９６　０　 ９．９３８　４　 ０．０１１　９　 ０．１１９　１　 ０．０１３　２　 ０．１３１　４　 １０．１８９　０
６ 新源准噶尔乌头 ０．８７６　４　 ８．７４８　０　 ０．０１１　１　 ０．１１１　１　 ０．０１２　２　 ０．１２１　９　 ８．９８１　１
７ 特克斯林地乌头 ０．１８６　９　 １．８６６　４ － － － － １．８６６　４
８ 塔城托里伊犁乌头 ０．３５８　２　 ３．５７７　３ － － － － ３．５７７　３
９ 巴里坤松树塘伊犁乌头 ０．３４４　２　 ３．４３９　５ － － － － ３．４３９　５
１０ 特克斯空茎乌头 ０．４６６　３　 ４．６６１　０　 ０．０１１　０　 ０．１０９　９　 ０．０４２　４　 ０．４２４　０　 ５．１９５　０
１１ 川乌 ０．０１３　２　 ０．１３１　２　 ０．０２６　３　 ０．２６１　９　 ０．０６３　９　 ０．６３７　０　 １．０３０　１
１２ 草乌 ０．０１９　８　 ０．１９７　８　 ０．０３３　２　 ０．３３１　５　 ０．０４７　４　 ０．４７３　０　 １．００２　３
·５０６１·中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２０期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｏｃｔ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２０
３　讨论
由于新疆乌头属植物与川乌、草乌为同属植物，
所以本实验先参照２０１０年版中国药典一部川乌项
下的 ＨＰＬＣ方法［３］，结果图谱分离效果不理想，对
照品图谱分离效果也较差。因此，参考文献［４－８］方
法对供试品前处理方法：包括药材粉碎粒度（分别考
察药材粉末过３号筛、４号筛、５号筛、粗粉，其中以
过３号筛的样品色谱峰分离较好）、药材取样量（以
０．５　ｇ取样量时峰形较小，杂质峰少；１　ｇ峰形清晰，
杂质峰多；２　ｇ峰形清晰，有杂质峰拖尾、干扰、叠峰
出现。）、提取溶剂（分别考察了氨水、乙醚、苯等提取
溶剂，结果以氨水和乙醚较好）、提取方法等进行了
考察，根据结果确定了峰形和分离效果较好的“２．３”
项下供试品前处理方法。
又分别对流动相［采用甲醇－水－乙腈（６７∶３３∶
２）、甲醇－水－氯仿－氨水（７０∶３０∶２∶０．１）、甲醇－０．３％
三乙胺－氯仿（６９∶３０∶１）、乙腈－０．０４　ｍｏｌ·Ｌ－１三乙胺
（ｐＨ３）（３５∶６５）、乙腈－四氢呋喃（２５∶１５）Ａ－０．１
ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸铵溶液（每１　０００　ｍＬ 加冰醋酸０．５
ｍＬ）Ｂ等不同流动相进行了考察，并对初步确定的
流动相的比例进行了调整，最终确定了峰形较好、分
离度较好的色谱条件。
所确定的色谱方法无需梯度洗脱，３种双酯型
生物碱色谱峰分离度好，可同时测定样品中３种双
酯型生物碱含量，经方法学验证表明该法简便、可
行。根据不同品种、不同产地的新疆乌头属植物样
品含量测定结果表明，其中准噶尔乌头、白喉乌头与
已有法定药材标准的川乌同样含有双酯型生物碱
（乌头碱、新乌头碱和次乌头碱），其中准噶尔乌头乌
头碱的含量远高于川乌、草乌药材，可能具有更好的
抗炎镇痛等作用［９－１０］，但白喉、林地、伊梨、空茎乌头
与川乌、草乌所含的双酯型生物碱成分、含量相差较
大，其确切的药理作用和毒性，以及与川乌、草乌药
材的亲缘性仍有待进一步深入研究。
致谢：本实验中新疆乌头属植物样品采集得到
了新疆伊梨州尼勒克县草原站、新源县草原站、特克
斯县草原站的大力支持与帮助。
参考文献：
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含量的影响［Ｊ］．中国现代应用药学杂志，２００９，２６（４）：２８８－
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［９］　李文兰，于莹莹，赵培，等．乌头总生物碱贴片抗炎镇痛药效学
研究［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００８，２０：３３９－３４２．
［１０］赵启鹏，王张，蒲友明，等．康定乌头及其炮制品的急性毒性和
抗炎镇痛作用研究［Ｊ］．中药药理与临床，２００９，２５（１）：４２－４４．
［收稿日期］２０１２－０３－０７
［基金项目］山东省科技攻关项目 （编号：２００８ＧＧ１０００２０２８）　［作者简介］陈萍，女，主管药师，本科，研究方向：药物新剂型、临床药学方面研
究，电话：０５３１－８５１８６３２５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｐｐｃｈｅｎｇｏｏｄ＠１６３．ｃｏｍ　［通讯作者］李凌冰，男，教授，研究方向：纳米靶向制剂的研究，电话：１５８６５２５２２９２，
Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｎｌｂｌｉ＠ｓｄｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
紫杉醇普朗尼克稳定化胶束的制备
陈萍１，李娜２，胥洪娟２，李凌冰２　（１．山东大学附属省立医院，山东 济南２５００２１；２．山东大学药学院，山东 济南
２５００１２）
［摘要］　目的：制备载紫杉醇的普朗尼克（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）稳定化胶束。方法：采用插入交联的方法，以普朗尼克Ｐ１２３为材料插入
交联剂聚氰基丙烯酸正丁酯制备紫杉醇稳定化胶束。并对其理化性质如粒径，载药量，体外释放度等进行了测定。同时测定
了该胶束对 ＨｅｐＧ－２肝癌细胞的细胞毒性。结果：所制备的载药胶束，多倍冲稀后仍能稳定存在。细胞毒性实验结果表明，稳
定胶束对 ＨｅｐＧ－２肝癌细胞的细胞毒性显著高于原料药。结论：所制备的载紫杉醇胶束性质稳定，细胞毒性增加。
［关键词］　胶束；稳定性；普朗尼克；聚氰基丙烯酸正丁酯
［中图分类号］Ｒ９４３　　［文献标识码］Ａ　　［文章编号］１００１－５２１３（２０１２）２０－１６０６－０５
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ－ｌｏａｄｅｄ　Ｐｌｕｒｏｎｉｃ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ　ｍｉｃｅｌａｅ
ＣＨＥＮ　Ｐｉｎｇ１，ＬＩ　Ｎａ２，ＸＵ　Ｈｏｎｇ－ｊｕａｎ２，ＬＩ　Ｌｉｎｇ－ｂｉｎｇ２（１．Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎ－
ｄｏｎｇ　Ｊｉｎａｎ　２５００２１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｊｉｎａｎ　２５００１２，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ－ｌｏａｄｅｄ　Ｐｌｕｒｏｎｉｃ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ　ｍｉｃｅｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ－ｌｏａｄｅｄ　Ｐｌｕｒｏｎｉｃ
·６０６１· 中国医院药学杂志２０１２年第３２卷第２０期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，２０１２Ｏｃｔ，Ｖｏｌ　３２，Ｎｏ．２０