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垂序商陆保肝作用及对果蝇寿命的影响



全 文 :垂序商陆保肝作用及对果蝇寿命的影响
张剑春 1 , 宓鹤鸣2 , 郑汉臣 2 , 苏中武 2
( 1.浙江省慈溪市药品检验所  315300;  2.中国人民解放军第二军医大学药学院 ,上海  200433)
提要 实验研究了垂序商陆的保肝作用及其对果蝇寿命的影响。 结果发现垂序商陆水煎剂对 CCl4所致小鼠急性肝
损伤有明显保护作用 ,其作用与给药剂量呈依赖关系 ;浓度为 25μg /ml的垂序商陆总皂甙延长雄性果蝇的平均寿命
(P < 0. 05)。
关键词 垂序商陆 ; 水煎剂 ; 总皂甙 ; 保肝作用 ; 果蝇寿命
中图分类号: R285. 5  文献标识码: A  文章编号: 1008-0805( 2000) 06-0489-02
Effects of Phylolacca amer icana ( Pokeweed) on Liver-protection
And the Influence on Life-span of Drosophila
ZHAN G Jia n-chun1 , M I He-ming2 , ZHEN G Han-chen2 , SU Zhong-wu2
( 1.Cixi Insti tute For Drug Control , Zhejiang , 315300, China
2. Second Military Medical University of PL A , Shanghai 200433, China )
Abstract  In expermiental studym aqueous ex trac tion o f pokeweed show s obv ious pr otectiv e effects on CCl4-acute-
liv er-injured mice, which r ely on the do sage , and 25μg /ml of to tal g licosides of pokew eed can leng then average life-
span o f male dr osophila (P < 0. 05) .
Key words  Phy tolacca americana;  Aqueous ex trac tion;  To ta l g lucosides;  Liver-protection;  Life-span of
dro sophila
  商陆为一较少常用传统中草药 ,始载于《神农本草经》 [1] ,具有
逐水消肿、通利二便和解毒散结等功效 ,临床用于治水肿胀满、二
便不通 ,外治痈肿疮毒。 不少地区民间习用商陆和垂序商陆根 ,经
煮后晒干作“土人参”或“土红参”用 ,据称有滋补和强壮作用。 《中
国药典》收载“商陆”为商陆科植物商陆 Phytolacca acinosa Roxb.
(P . esculentaV. Houtte ) 和垂序商陆 P . americana L. ( P .
decandra L. ) 的根。 本文以分布最广、商品药材使用最多的品种
垂序商陆根为材料 ,对其水煎剂和总皂甙分别作了保肝作用和果
蝇寿命影响试验。
收稿日期: 2000-01-17; 修正日期: 2000-02-12
作者简介:张剑春 ( 1966-) ,男 , (汉族 ) ,浙江慈溪人 ,现任慈溪市药
品检验所主管药师 ,硕士学位 .
表 1 黄芪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响 ( x-± s )
组别 n A 560 P
对照组 8 0. 116± 0. 004
药物组 8 0. 402± 0. 021 < 0. 001
3 讨论
本试验研究了黄芪对小鼠淋巴细胞增殖和 IL-2产生的影响 ,
结果表明 ,黄芪可使 Con A激发的 T淋巴细胞增殖反应明显 [3] ,表
明黄芪对 T细胞功能具有增强作用 ;同时对 B细胞免疫功能也具
有明显增强作用。已知 T细胞是机体免疫系统赖以实现细胞免疫
调节的重要成分 ,在机体特异性免疫应答中起核心作用 , T细胞功
能障碍会直接影响机体的细胞免疫应答和免疫调节。 本文研究还
发现 ,黄芪对 IL-2产生有促进作用。 IL-2主要是由辅助性 T细胞
产生的非特异性细胞因子 ,作用已活化的 T细胞促进其增殖 ,并
对 B细胞有调节作用。黄芪可明显促进小鼠脾细胞产生 IL-2的水
平 ,间接增强体液免疫应答。分析上述免疫指标改变的原因可能是
黄芪对 T淋巴细胞的直接促进作用 ,或作用于巨噬细胞促进 IL-1
产生 ,从而促进了 T淋巴细胞产生淋巴因子 ,进而促进了 T淋巴
细胞增殖及 IL-2的产生。 以上两项免疫学指标均有明显改变 ,组
间相比有非常显著性差异 (P < 0. 001)。提示机体免疫功能下降者
或肿瘤辅助治疗者可长期口服黄芪以增强免疫功能 ,预防某些疾
病 ,为临床应用黄芪提供了实验依据。
表 2 黄芪对小鼠 IL— 2产生的影响 ( x-± s )
组别 n A 560 P
对照组 8 0. 140± 0. 005
药物组 8 0. 313± 0. 014 < 0. 001
参考文献:
[1 ] 邵启祥 ,除苏红 ,夏 圣 ,等 .黄芪对小鼠免疫功能的调节作用 [ J] .中
国实验临床免疫学杂志 , 1996, 8( 1)∶ 48
[2 ] 龙振洲 .医学免疫学 (第 2版 ) [M ] .北京:人民卫生出版社 , 1996∶
219
[3 ] 高 梅 ,贾 镭 ,陈 芬 ,等 .虎尿对小鼠淋巴细胞增殖和 IL-2产生
的影响 [ J ].中国实验临床免疫学杂志 , 1999, 11( 3)∶ 39
[4 ] 武建国 .实用免疫学临床检验 (第 1版 ) [M ] .南京:江苏科学技术出
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LIS HIZHEN M EDICINE AND M ATERIA M EDICA RESEARCH 2000 VO L. 11 N O. 6 时珍国医国药 2000年第 11卷 6期
1 垂序商陆水煎剂对 CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用
1. 1 实验材料: 垂序商陆根 ( 1992-02采自本院药圃 ) ,水煎提 2
次 , 30 min /次 ,合并提取液 ,过滤 ,浓缩至每 ml相当于 0. 4 g , 0. 2 g
和 0. 1 g生药 ,此为供试样品液 ;昆明种小鼠 ,雄性 ,体重 18~ 22 g
(本校动物中心提供 )。
1. 2 方法与结果: 小鼠 60只 ,随机分成 6组 ,每组 10只 ,分为生
理盐水正常对照组 , CCl4致肝损伤组 ,齐墩果酸阳性药物组和高、
中 、低 3个剂量的垂序商陆水煎剂给药组 ,分别给予生理盐水、
1. 36 mg /ml齐墩果酸、 2%吐温 -80混悬液、 0. 4 g /ml, 0. 2 g /ml,
0. 1 g /ml垂序商陆水煎液 ,以 10 ml /kg体重灌胃给药 , 1次 /d,连
续 8 d,第 8 d下午除生理盐水对照组外 ,其余 5组小鼠均由腹腔注
射 0. 1% CCl4橄榄油溶液。 于第 9 d上午经眼眶取血 ,收集血液 ,
置冰箱内 30 min, 4 000 r /min离心 10 min,分离血清 ,用赖氏法分
别测定 GPT和 GOT。 结果见表 1。
2 垂序商陆总皂甙对果蝇寿命影响试验
2. 1 实验动物:黑腹果蝇 (Drosophila nolarcogaster )美国野生型
( Ame rican Widtype) O regon品系。
2. 2 培养基配方:基础培养基 100 g内含玉米粉 10 g ,白糖 10 g ,
琼脂 1. 2 g,干酵母粉 1. 5 g ,丙酸 0. 8 ml,水约 76 ml,自然 p H。
2. 3 培养环境: 室温 ( 25± 1)℃恒温 ,相对湿度 60% ~ 70% ,暗温
箱培养。 培养管规格 2. 5 cm× 13 cm ,海绵作管塞 ,竖管培养。
2. 4 试验方法
表 1 垂序商陆水煎剂对 CCl4致小鼠急性肝损伤的影响
组别 GPT活力 GO T活力
生理盐水对照组 99. 9± 15. 7  106. 3± 24. 1 
CCl4损伤对照组 249. 9± 18. 7  230. 5± 43. 7 
齐墩果酸 1. 36 mg /ml组 96. 8± 15. 6  100. 1± 32. 0 
垂序商陆水煎剂 0. 1 g /ml组 201. 3± 13. 7* * 173. 5± 6. 2* 
垂序商陆水煎剂 0. 2 g /ml组 143. 0± 15. 3* * 147. 2± 20. 2* 
垂序商陆水煎剂 0. 4 g /ml组 117. 1± 9. 4* * 115. 6± 26. 1* *
  *   P < 0. 05  * *   P < 0. 01(与 CCl4损伤组对照比较 )
2. 4. 1 供试药物制备:垂序商陆根 ( 1992-02采自本院药圃 )干燥
粗粉 ,甲醇回流提取 ,回收甲醇 ,残渣用水溶解 ,过滤 ,滤液用等量
水饱和正丁醇萃取 3次 ,回收正丁醇 ,真空干燥得皂甙粗品 ;粗品
用 95%乙醇重结晶 ,得白色结晶 , 60℃烘干 ,并测得总皂甙含量为
94. 5% ,其中主要含商陆皂甙甲 ( Esculentoside A)。
2. 4. 2 果蝇麻醉及分组:收集 10 h内孵化出的羽化成虫 ,用乙醚
浅度麻醉后 ,迅速挑选大小一致的个体 ,雌雄分清 ,分设空白对照
组和浓度分别为 10μg /ml, 25μg /ml和 40μg /ml的垂序商陆总皂
甙组 ,每组用果蝇 120只 ,雌雄各 60只 ,分养 ,每个培养管 30只。
2. 4. 3 转管: 每隔 4 d更换 1次培养基 ,利用果蝇的趋光性 ,配合
振动及转动原培养管 ,避免用麻醉的办法转管 ,以免对果蝇的自然
寿命有影响。
2. 4. 4 寿命统计与观察指标:实验开始后 ,在生存期最初 40 d,每
24 h统计 1次果蝇死亡数 ; 40 d后 ,每 12 h统计 1次死亡数直到
全部死亡。每组果蝇生存的总天数除以该组果蝇数 ,得到该组果蝇
平均生存时间 ,即平均寿命 ;以每组最后 1个死亡的果蝇的生存时
间为最高寿命 ,每组果蝇有一半数量死亡的天数作为半数死亡时
间。以半数死亡时间、平均寿命和最高寿命为指标评价各浓度组对
果蝇寿命的影响 [2]。
2. 5 实验结果:浓度为 25μg /ml的总皂甙对雄性果蝇平均寿命
延长约 2. 7 d,与对照组有显著差异 (P < 0. 05) ,而对雌性果蝇平
均寿命的影响不明显 ,浓度为 10μg /m l和 40μg /ml的总皂甙对果
蝇寿命的影响也不明显 ;其中 40μg /ml的总皂甙对雌性果蝇的平
均寿命反而稍微缩短。 具体结果见表 2。
表 2 垂序商陆总皂甙对果蝇寿命的影响       d
实验分组 半数死亡时间雌 雄
平均寿命
雌 雄
最高寿命
雌 雄
对照组 43 39. 5 40. 75± 10. 65 38. 71± 9. 94 51. 5 50. 5
10μg /m l组 43 42 40. 95± 9. 06 39. 65± 9. 72 52. 5 51 
25μg /m l组 44. 5 42. 5 39. 65± 9. 72 41. 47±10. 62# * 53  53 
40μg /m l组 36. 5 42 37. 70± 10. 25 39. 75±10. 10 51. 5 52 
  #  小样本 t检验 P < 0. 05  *  时序检验 P < 0. 05
3 小结与讨论
3. 1 徐华元 [3]曾报道商陆制剂临床用于治疗急性肝炎 GPT升高
者及迁肝、慢肝多例 ,获得满意的降酶效果。我们的实验结果表明:
垂序商陆水煎剂对用 CCl4所致小鼠急性肝损伤的高 GPT和
GO T有降低作用 ,血清 GPT和 GOT的降低水平与给药剂量呈依
赖关系 ,与 CCl4损伤组比较 ,有非常显著的差异 , 0. 4 g /ml剂量组
可使 GPT和 GOT指标恢复至正常水平 ,效果接近齐墩果酸阳性
药物组 ,可见垂序商陆根水煎剂对小鼠肝损伤具有一定的保护作
用。
3. 2 现代药理研究表明 ,传统中医所说的扶正培本作用与提高机
体免疫能力有关。 而商陆皂甙和多糖均具有较强的免疫活性作
用 [4, 5] ,经炮制加工的商陆也有一定的补益作用。 杨嗣坤 [4]等报道
浓度为 20μg /ml的商陆总皂甙能体外诱生免疫干扰素 ,和本实验
所得的延长果蝇寿命的浓度 25μg /ml相接近 ;浓度为 40μg /m l时
反而有缩短雌性果蝇寿命的趋势 ( 0. 05 < P < 0. 1) ,提示该浓度可
能对雌性果蝇产生一定的副作用。
参考文献:
[ 1 ] 魏· 吴普等述 ,清· 孙星衍等辑 .神农本草经 [M ] .北京:人民卫生出
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[ 2 ] 宓鹤鸣 ,李承祜 ,苏中武 .刺人参抗衰老作用的实验研究 [ J ].中草药 ,
1987, 18( 8)∶ 25
[ 3] 徐华元 .中药商陆降转氨酶 [ J] .辽宁中医杂志 , 1986, ( 3)∶ 30
[4 ] 杨嗣坤 ,郑玲莉 ,徐志工 ,等 .两种商陆体外诱生免疫干扰素的作用
[ J] .第二军医大学学报 , 1986, 7( 4)∶ 258
[ 5 ] 张俊平 ,钱定华 ,郑钦岳 .商陆多糖Ⅰ 对小鼠巨噬细胞毒作用及诱生
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时珍国医国药 2000年第 11卷第 6期 LISHIZHEN M EDICINE AND M A TERIA M EDICA RESEA RCH 2000 V OL. 11 NO. 6