免费文献传递   相关文献

鸡脚参醇提物药理活性研究



全 文 :     天然产物研究与开发       
           NATU RAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT  2003 Vo1.15 No.3
 
 
 
 
  收稿日期:2003-01-08   修回日期:2003-02-27
鸡脚参醇提物药理活性研究
罗 禹 丁立生 田 军 吴凤锷*
(中科院成都生物研究所 四川 成都 610041)
摘 要 对鸡脚参醇提物进行了抗炎 、止咳作用的研究。结果表明其活性部位对大鼠蛋清性足肿胀 、小
鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用 ,有抑制毛细血管通透性作用的趋势。 可延长二氧化硫引起的小白鼠咳
嗽的潜伏期。鸡脚参醇提物的急性毒性较小 ,抗炎 、止咳作用明显。
关键词 鸡脚参;醇提物;抗炎;止咳;药理活性
  鸡脚参(OrthoslPhon wufenioiides)为唇形科鸡
脚参属植物 ,其根部入药 ,味甘 、辛 ,性平 。有清肺润
燥 ,益阴敛汗 ,祛风除湿 ,镇痛化积 ,接骨生肌的功
能。用于消化不良 ,食积 ,蛔虫病 ,风湿痛 ,虚弱头
晕 ,虚汗 , 咳嗽。并配方治骨折及脉管炎[ 1] 。主要
分布在西南地区 ,有一定资源储量 ,且该植物易于人
工繁殖 ,可大量栽培 。
鸡脚参干粉采用 95%乙醇加热(回流)提取 ,提
取液回收乙醇后经大孔吸附树脂吸附 ,用水将糖等
极性化合物及无机盐等充分洗净后 ,再以 95%乙醇
洗脱 ,回收溶剂后干燥得活性部位样品(OW),其中
二萜活性成分含量大于 50%。
1 材料
动物:昆明种小鼠 ,封闭群 30 代以上 ,一级标
准 ,川实管质(95)85 号 , 四川抗菌素研究所供;SD
大鼠 ,封闭群 30代以上 ,一级标准 ,川实管质(95)92
号 ,四川抗菌素研究所供;白色豚鼠 ,英国种 ,一级标
准 ,川实动管质第 99-11 号 ,四川省实验动物专委
会养殖场。昆明种小白鼠(云动管 9712号),普通
级 ,雌雄各半 ,体重 20.0(2.0g ,由昆明动物所提供。
药品试剂:息斯敏:西安杨森制药有限公司出
品 ,批号:9711185。地塞米松(DEX)磷酸钠注射液:
江苏兴化制药厂提供 ,批号:97091031 。阿斯匹林
(Aspirin)肠溶片:西北第二合成药厂提供 , 批号:
9811017。卵白蛋白:中国医科大学血研所产 ,批号:
970700。百白破疫苗:卫生部成都生物制品研究所
供 ,批号:971011。依文思兰:Tluka 进口分装 ,上海
化学试剂采购供应站经销 ,批号:82-11-02 。二甲
苯由西安化学试剂厂提供 ,批号:961107。新鲜鸡蛋
清生理盐水溶液由实验室临时配制 。急支糖浆
(ABS):四川太极集团出品 , NaCl 、NaOH 等为国产
分析纯剂。
仪器:足容积测定仪 、直径打孔器。751-分光
光度仪(上海光学仪器厂)。
2 方法与结果
2.1 鸡脚参活性部位的灌服急性毒性实验[ 2]
鸡脚参醇活性部位经灌胃给药测定急性毒性 ,
结果显示小鼠的最大耐受量 5.6 g/kg/日 ,约为成人
临床日用量的 140倍。表明鸡脚参活性部位在临床
常用治疗剂量时是安全的。
2.2 鸡脚参活性部位的抗炎活性实验[ 3]
2.2.1 鸡脚参对大鼠蛋清性足肿胀的影响
大鼠 50只(全为雄性),体重 150 ~ 200 g ,随机
分为 5组 , ig 给药连续 5天 ,在大鼠足容积测定仪上
测量各鼠右后爪容积 ,药前两次测量的平均值作为
正常足容积 。右后脚趾皮下进针至踝关节皮下注入
10%新鲜鸡蛋清生理盐水溶液 0.1 ml/只致炎 ,同
时 ig 给药或等容量生理盐水 1次 ,致炎后 30 , 60 ,
120 ,180 min逐只测足容积 ,计算足肿胀度和足肿
胀抑制百分率 ,结果见表 1。
结论:鸡脚参大 、中剂量组对抑制大鼠蛋清性足
肿胀有明显作用。鸡脚参大剂量组在 60 min , 180
min有显著性差异(P <0.05),在 120min时有非常
显著性差异(P <0.01),中剂量组在 120 min 时有
非常显著性差异(P <0.01),能明显抑制大鼠蛋清
性足肿胀。
216
DOI :10.16333/j.1001-6880.2003.03.010
表 1 鸡脚参对大鼠蛋清性足肿胀的影响(X±SD)
Table 1 Effect of OW on paw edema by egg white in rats
组别
Groups
数量
(只)
n
剂量
Dose
(g/ kg)
正常足容积
Normal cubage
of paw (ml)
致炎后不同时间(min)大鼠足容积净增值(m l)
Rat s paw edema in dif ferent t ime(ml)
30min 60min 120min 180min
生理盐水 NS 10 1.0±0.05 0.63±0.28 0.52±0.26 0.54±0.21 0.39±0.21
地塞米松 DEX 10 5 mg/ kg 1.0±0.13 0.3±0.21* 0.21±0.15* 0.0±0.09** 0.0±0.08**
鸡脚参 OW 10 0.8 1.0±0.16 0.50±0.15 0.31±0.18* 0.1±0.21** 0.18±0.18*
鸡脚参 OW 9 0.4 1.1±0.08 0.47±0.21 0.37±0.25 0.2±0.18** 0.32±0.17
鸡脚参 OW 10 0.2 1.0±0.08 0.55±0.14 0.45±0.27 0.45±0.27 0.42±0.24
  注:与生理盐水组比较 , *P<0.05;**P<0.01。
2.2.2 鸡脚参对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
取小鼠50只 ,雌雄兼用 ,体重 22 ~ 25 g ,按体重
分为 5组 , ig 给药或等容积生理盐水 ,每天 1次连续
5天 ,地塞米松 5 mg/kg ip两次 ,末次给药后 30 min
于小鼠右耳前后两面涂二甲苯 30 ul致炎 ,致炎后
40min处死 ,剪下两耳 ,用 8 mm 直径打孔器在同一
部位打下圆耳片 ,称重各鼠耳肿胀度(mg),结果如
表 2。
表 2 鸡脚参对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
Table 2 Effect of OW on ear edema by p-Xylene in mice
组别
Groups
数量(只)
n
剂量
Dose(g/ kg)
耳肿胀程度(mg)
Ear edema(mg)
生理盐水 NS 10 13.1±2.1
地塞米松 DEX 10 5mg/ kg(ip两次) 8.2±2.9**
鸡 脚参 OW 10 0.4 8.7±3.0**
鸡 脚参 OW 10 0.2 9.8±2.6*
鸡 脚参 OW 10 0.1 10.4±2.7*
  注:与生理盐水组比较 , *P<0.05;**P<0.01。
结论:鸡脚参各治疗组对小鼠耳肿胀均有明显
抑制作用 ,中剂量组和小剂量组与生理盐水组有显
著性差异(P <0.05),大剂量组与生理盐水组比较
有非常显著性差异(P <0.01)。
2.2.3 鸡脚参对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
取小鼠50只 ,体重 18 ~ 22 g ,雌雄各半 ,按体重
性别随机分为 5组 ,每日 ig 给药 1 次连续 5天 ,末
次药后 1小时各鼠 iv 0.1 ml/10 g 2%伊文斯兰溶
液 ,同时 ip 0.6%醋酸溶液 0.2 ml/只 ,20 min 后处
死小鼠 ,用 5 ml蒸馏水冲洗小鼠腹腔 ,收集冲洗液 ,
离心 ,取上清液于 600 nm 处比色测定光密度值 。
结果如表 3。
结论:各剂量组对小鼠毛细血管通透性无显著
性差异 ,但有抑制作用趋势。
2.2.4 结论
鸡脚参大 、中剂量组对大鼠蛋清性足肿胀有明
显的抑制作用 ,在 120 min时效果最强 ,与生理盐水
对照组有非常显著性差异(P <0.01),大剂量组在
60 min 时开始显效 , 持续到 180 min 。鸡脚参大 、
中 、小剂量组对小鼠耳廓肿胀均有明显抑制作用 ,大
剂量组效果最好。鸡脚参对小鼠毛细血管通透性实
验 ,与生理盐水组比较虽然无显著性差异 ,但有抑制
毛细血管通透性作用的趋势 ,实验结果表明 ,鸡脚参
具明显抗炎作用。
表 3 鸡脚参对小鼠毛细血管通透性的影响
Table 3 Effect of OW on blood capillary permeability in mice
组别
Groups
数量
(只)
n
剂量(g/ kg)
Dose(g/ kg)
比色测定光密度值
Light density f rom
colorimet ric determinat ion
生理盐水 NS 9 0.705±0.188
阿斯匹林 Aspirin 9 0.2 0.461±0.215*
鸡脚参 OW 9 1 0.533±0.218
鸡脚参 OW 9 0.5 0.569±0.1849
鸡脚参 OW 9 0.25 0.591±0.248
  注:与生理盐水组比较 , *P<0.05。
2.3 鸡脚参活性部位的止咳药理作用的研究
2.3.1 二氧化硫致咳法[ 4] :
用侧口烧瓶装亚硫酸氢钠 ,烧瓶塞上装一滴定
管 ,内放满浓硫酸 ,打开滴定管上的活塞 ,让浓硫酸
滴下 ,即可在瓶内产生二氧化硫气体 。烧瓶的侧口
用橡皮管连接到球胆 ,二氧化硫气体产生后 ,即可储
于球胆中 ,用止血钳夹紧待用。引咳前 ,将小白鼠随
机分为五组 ,每组 15只 ,雌雄均有 ,并按以下方式分
别给药:[ 1]空白对照组给予生理盐水;[ 2]阳性对照
组按每只 0.016 ml/g(B.W)的量灌胃急支糖浆;
[ 3]鸡脚参样品灌胃 I 、II组[ 0.12 mg/g(B.W)、0.2
mg/g(B.W);[ 4]鸡脚参样品腹腔注射组[ 0.2 mg/g
(B.W)] 。然后于给药后 1 hr、3 hr和7 hr将小白鼠
逐一放入广口瓶中 ,通入二氧化硫 5 ml ,观察小白
鼠咳嗽的潜伏期 ,并对其进行比较。
2.3.2 止咳作用
由表 4可以看出 ,鸡脚参样品和止咳糖浆都具
有一定的止咳作用(P 值<0.05)。鸡脚参样品的止
咳作用与给药方式 、剂量 、观察时间有一定关系 。鸡
2172003 Vo1.15 No.3 罗 禹等:鸡脚参醇提物药理活性研究          
脚参样品和急支糖浆都表现为给药 3小时后效果最
好;其中腹腔注射鸡脚参样品 3小时的止咳率与急
支糖浆作用 7小时止咳率相近 ,表明该药对止咳确
有疗效 。
表 4 鸡脚参活性部位的止咳作用
Table 4 Effect of OW on relieving cough
组别 Groups 空白(1)Blank 急支 ABS 鸡脚参提取物 OW
方式 Way 口服/腹注
Orally/ Inject ion 口服 Orally 口服 Orally 口服 Orally 腹注 Inject ion
剂量 Dose 16 ml/Kg 16 ml/Kg 120mg/Kg 200 mg/Kg 200 mg/Kg
动物数量(只)n 5 15 15 15 15
1hr
3hr
7hr
潜伏期(S)
Latent period
止咳率(%)
Rate of relieving
潜伏期(S)
Latent period
止咳率(%)
Rate of relieving
潜伏期(S)
Latent period
止咳率(%)
Rate of relieving
潜伏期
Laten t period
25.75±3.86
止咳率
Rate of relieving
0
35.25±6.70 23.33±3.06 27.68±3.20 32.67±7.66
36.89 0 8.19 26.87
44.50±12.69* 27.12±3.42 29.40±1.67 39.31±8.92*
72.82 5.32 14.17 52.66
39.61±9.43* 30.01±12.08 36.35±10.08 33.83±6.84
53.83 16.50 41.17 31.38
注:(1)空白对照数据是三个时间的口服和腹注的实验值平均的结果 ,因为各值差异不大。 *表明给药组与对照的组相比 , P<0.05。
止咳率=[(样品潜伏期—对照潜伏期)/对照潜伏期] ×100
3 讨论
由以上实验看采用乙醇提取和大孔树脂吸附工
艺制备鸡脚参有效部位是可行的 ,活性二萜成分的
含量大于 50%。药理实验结果表明 ,鸡脚参活性部
位的急性毒性较小 ,并具明显抗炎作用 ,止咳效果明
显。建议以它作为止咳药 ,最好能与其它药一起配
成复方药 ,充分利用它止咳的良好效果 。
参考文献
1  丁志遵等.新华本草纲要.上海:上海科学技术出版社 ,
1988.453
2  徐淑云 , 卞如濂 ,陈 修.药理实验方法学.北京:人民卫
生出版社 , 1982
3  李仪奎主编.中药药理实验方法学.上海:上海科学技术
出版社 , 1991.300~ 302
4  陈 奇.中药药理实验.贵州:贵州人民出版社 , 1988.
155 ~ 156;158~ 159
PHARMACOLOGICAL ACTIVITES OF ETHANOL ABSTRACT
FROM ORTHOSIPHON WUFENIOIIDE
LUO Yu ,DING Li-sheng , TIAN Jun ,WU Feng-e*
(Chengdu Institute of Biology , Chinese Academy of Sciences , Chengdu 610041 , China)
Abstract The anti-inf lammatory and antitussive action of ethanol abst ract from OrthoslPhon wufenioiide has
been studied.The experiments showed that the ethanol abst ract of OrthoslPhon wu fenioiide has inhibitory ef-
fects on mice s ear edema and rat s ankle swelling , and tended to reduced blood capillary permeability.The ex-
periments also showed that the ethanol abst ract of OrthoslPhon wufenioiide could prolong the latent period of
rat coughing caused by sulfur dioxide.The ethanol abstract f rom OrthoslPhon wu fenioiide has low acute toxicity
and has signif icant anti-inflammato ry and antitussive action.
Key words OrthoslPhon wu fenioiide;ethanol abstract;anti-inflammato ry action;anti tussive action;pharmaco-
logical activi ties
218          天然产物研究与开发 2003 Vo1.15 No.3