全 文 ：— 31 —现代中药研究与实践2015年第29卷第3期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.3
基金项目：河北省高等学校科学技术研究项目（Z 2013006）
作者简介：马金萍（1970-），女，主管药师，研究方向：中药临床药学研究。E-mail: mjpyxiang@163.com
剪刀股醇提物对小鼠脑缺血再灌注损伤后心肌组织中SOD
和 GSH-PX 含量的影响
马金萍
（张家口市沙岭子医院 药剂科，河北 张家口 075000）
摘　要：目的　研究剪刀股醇提物对脑缺血再灌注小鼠心肌组织中 SOD和 GHS-PX 含量的影响。方
法　采用改进的Himori 法制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型，手术后 48 h 将清醒的、活动正常的小鼠随机
分为假手术组（进行手术，但不进行脑缺血再灌注）、对照组（即脑缺血再灌注组）、剪刀股醇提物高剂量
组、中剂量组和低剂量组，高、中、低剂量组于缺血前 30 min 分别灌胃给予剪刀股醇提物 10.0，1.0，0.1
mg·kg-1 体重；假手术组与对照组于缺血前 30 min 分别灌胃给予等体积溶剂。测定小鼠心肌组织中超氧化
物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GHS-PX) 含量。结果　剪刀股醇提物可明显提高脑缺血再灌注小
鼠心肌组织中 SOD 和 GHS-PX 的含量（P < 0.01）。结论　剪刀股醇提物可显著提高脑缺血再灌注损伤心
肌组织中 SOD和 GSH-PX活力。
关键词：剪刀股；醇提物；脑缺血再灌注；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽过氧化物酶
中图分类号： R-331 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)03-31-03
doi:10.13728/j.1673-6427.2015.03.011
Effects of Alcohol Extract of Ixeris debilis A. Gray on SOD and GSH-PX in Hearts of
Mice of Cerebral Ischemia Reperfusion Injury
MA Jin-ping
(Department of Pharmacy, Shalingzi Hospital, Zhangjiakou 075000, China)
Abstract: Objective To study the effects of alcohol extract of Ixeris debilis A. Gray on the content of SOD
and GSH-PX in hearts of mice after cerebral ischemia reperfusion injury. Methods By improved Himori method,
cerebral ischemia reperfusion injury model of mice was produced 48h after the Surgery, the mice those were in
conscious and normal in psychological activities were randomly divided into 5 groups: sham-operated group ( to
operate but not do cerebral ischemia reperfusion ), control group (to operate and do cerebral ischemia reperfusion),
alcohol extract of Ixeris Debilis A.Gray groups(10.0, 1.0, 0.1 mg·kg-1 ). The level of SOD and GSH-PX in hearts
of the mice were measured. Results Alcohol extract of Ixeris debilis A.Gray can improve the contents of mice
heart SOD and GHS-PX（P < 0.01）after cerebral ischemia reperfusion . Conclusion Alcohol extract of Ixeris
debilis A.Gray can improve SOD and GHS-PX activities in heart of mice after cerebral ischemia reperfusion .
Key words: Ixeris debilis A.Gray; alcohol extract; cerebral ischemia reperfusion; SOD; GSH-PX
剪刀股Ixeris debilis A.Gray 是菊科苦荬菜属植物剪
刀股全草，别名鸭舌草、鹅公英。具有清热凉血，利
尿消肿的功效，全国各地均有分布。用于肺热咳嗽，
喉痛，口腔溃疡，急性结膜炎，阑尾炎，水肿，小便
不利；外用治乳腺炎，疮疖肿毒，皮肤瘙痒 [1]。目前，
对剪刀股活性研究报道较少。国内仅见文献 [2] 报道剪
刀股提取物可对抗烟碱引起的致癌作用。本文对剪刀
股醇提物对脑缺血再灌注小鼠心肌组织中谷胱甘肽过
氧化物酶（GSH-PX）活力及超氧化物歧化酶（SOD）
活力的影响进行研究，为剪刀股的开发利用提供依据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　实验动物　　昆明种小鼠，雌雄兼用，体重
25 ~ 30 g，由河北北方学院动物室提供。全部小鼠随
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机分组，自由摄食，饮水。适应环境一周后用于实验。
1.1.2　仪器　　UV-2100 紫外可见分光光度计（上
海光学仪器制造厂），FSH-2 内切式组织可调高速匀
浆器（江苏大地自动化仪器厂），分析天平 DT-100（北
京光学仪器厂），旋涡混匀器WH-861（北京科尔德
科贸有限公司）
1.1.3　药品和试剂　　剪刀股采自河北省张家口
市，由于河北北方学院中医学院赵恒诚教授鉴定为剪
刀股Ixeris debilis A.Gray 全草。65%乙醇回流提取，
得浓度为每毫升含药材 1 g 的供试品溶液；谷胱甘肽
过氧化物酶活力测试盒及超氧化物歧化酶活力测试
盒均由南京建成生物工程研究所提供；其他试剂均为
国产分析纯试剂；实验用水为三重蒸馏水。
1.2　实验方法
1.2.1　小鼠脑缺血再灌注模型的制备　　参照Himori
法 [3]，取小鼠称重，3.5% 水合氯醛 10 ml·kg-1 体重，
ip 麻醉，仰卧固定于手术台上。用平镊子提取小鼠
颈前部皮肤，自胸骨柄到下颌骨间行 5 ~ 8 mm 正中
纵向切口，于两下颌腺之间，钝性分开看到气管上的
肌群，从气管上方正中将肌群分开。分离左、右两侧
颈总动脉。分离后用浸泡过液体石蜡的黑色手术线
穿过左、右二侧颈总动脉，尽量恢复两侧颈总动脉
到原位，在气管上方轻轻将刚才的黑色手术线打一
松的反手结，结的松紧以不压迫气管为宜。在每侧
颈总动脉的上方的黑线上穿过一条用浸泡过液体石
蜡白色手术线，然后分别打结紧系于黑色手术线上，
按 Himori 法埋线，缝合切口上的皮肤。术后将小白
鼠分别放于笼子中饲养。
1.2.2　实验分组　　手术后48 h将清醒的、活动正常的
小鼠随机分为5组，分别为假手术组（进行手术，但不
进行脑缺血再灌注）、对照组（即脑缺血再灌注组）、剪
刀股醇提物高、中、低剂量组（于缺血前1 h 分别灌胃
给予剪刀股醇提物10.0、1.0、0.1 ml·kg-1 体重）；假手
术组与对照组于缺血前1 h 分别灌胃给予等体积溶剂。
1.2.3　心肌组织匀浆的制备　　于缺血后 1 h，小鼠
快速断头，迅速取心肌，除去心肌膜，用 4℃生理
盐水 (NS) 冲洗，滤纸吸干，置于 1 ml 离心管内，并
于 -40℃冷冻贮存。实验时取出心肌组织，称重，放
在玻璃匀浆器皿中，加适量生理盐水，匀浆，转速
10 000 ~ 15 000 r·min-1，匀浆时间为 10 s / 次，间隙
30 s，连续 3 ~ 5 次。制成 10%心肌匀浆。将匀浆以
4 000 r·min-1，离心 15 min，取适量上清液为供试液。
1.2.4　 GSH-PX活力测定　　采用DTNB比色法 [4]，以
GSH-PX试剂盒测定小鼠心肌组织中GSH-PX活力。规
定为每毫克蛋白质，每分钟扣除非酶促反应的作用，
使反应体系中GSH浓度降低 1μmoL·L-1 为一个酶活
力单位。根据公式计算小鼠心肌组织中GSH-PX活力
公式： 心肌组织GSH-PX活力 =[（非酶管OD值 -
酶管 OD 值）/（标准管 OD 值 - 空白管 OD 值）]×
标准液浓度（20μmoL·L-1）×稀释倍数 / 反应时间
（5 min）/ 蛋白含量
1.2.6　SOD 活力测定　　采用羟胺法 [5]，以 SOD 试
剂盒测定小鼠心肌组织匀浆 SOD 活性测定。规定每
毫克组织蛋白在 1 ml 反应液中 SOD抑制率达 50%时
所对应的 SOD量为一个 SOD 活力单位（U）。根据公
式计算小鼠心肌组织中 SOD活力。
公式： 组织匀浆中 SOD 活力 (U/mgprot)=[（对照
管吸光度-测定管吸光度）/对照管吸光度 ]/50%×（反
应液总体积 / 取样量）/ 组织中蛋白含量。
1.3　统计学处理
应用 spss17.0 统计软件进行数据处理，以均值
±标准差（X±S）表示。并进行方差分析，数据资
料用 t 检验。
2　结果
2.1　剪刀股醇提液对小鼠脑缺血再灌注心肌组织
SOD含量的影响
结果表明，和假手术组比较，模型对照组小鼠心
肌组织SOD明显降低（P < 0.01）；和模型对照组相比，
剪刀股醇提液高剂量组（10 mg·kg-1 体重）小鼠脑缺
血再灌注后心肌组织SOD显著增加（P < 0.01）。（见表1）
2.2　剪刀股醇提液对小鼠脑缺血再灌注心肌组织
GSH-PX 含量的影响
结果表明，和假手术组比较，模型对照组小鼠心
肌组织 GSH-PX 明显降低（P < 0.01）；和模型对照组
相比，剪刀股醇提液高剂量组（10 mg·kg-1 体重）
小鼠脑缺血再灌注后心肌组织 GSH-PX 显著增加（P
< 0.01）。（见表 1）
表1. 剪刀股醇提液对小鼠脑缺血再灌注心肌组织GSH-PX及SOD含量的影响
Tab.1 Effects of Alcohol extraction of Ixeris debilis A.Gray on GSH-PX and
SOD in hearts of mice after cerebral ischemia reperfusion (X±s) (n = 10)
分组 剂量（mg·kg-1）
GSH-PX
(U·mg-1 prot)
SOD
(U·mg-1 prot)
假手术组 16.77±1.10 504.58±4.02
对照组 8.11±0.75** 365.08±3.01**
剪刀股醇提液高剂量组 10.0 12.87±0.71## 438.93±12.92##
剪刀股醇提液中剂量组 1.0 8.72±0.59 370.11±8.12
剪刀股醇提液低剂量组 0.1 8.67±0.44 365.61±2.67
与假手术组比较，**P < 0.01; 与对照组比较，##P < 0.01
3　讨论与结论
脑缺血后再灌注可挽救濒临死亡的细胞，但是又
（下转第 36 页）
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米须总黄酮剂量的增加，能有效地抑制四氯化碳所致
小鼠血清 ALT 和 AST 的活性上升，即降低血清 ALT
和 AST 的水平，这可能与玉米须黄酮能有效地清除
一些损害细胞的自由基有关。
肝脏中MDA含量及 SOD、CAT 活性的变化则反
映了肝脏受自由基和脂质过氧化损伤程度。MDA 是
脂质过氧化的最终产物，其含量高低可反映膜脂质过
氧化程度的强弱和细胞损伤的程度；SOD 是体内清
除自由基的关键酶，可清除自由基，抑制自由基启动
的脂质过氧化反应；CAT 是组织细胞内重要的抗氧
化物之一，它参与生命活动中的各种代谢反应，并能
清除在代谢过程中产生的各种自由基，CAT 能降解
H2O2 生成 H2O。研究结果显示，玉米须总黄酮（CSF）
能明显降低 CCl4 致肝损伤肝组织中MDA的含量，提
高 SOD 和 CAT 活性，同时，电镜观察结果也表明玉
米须黄酮能够降低肝细胞的损伤。这些结果表明玉米
须总黄酮能够拮抗 CCl4 诱发的肝细胞自由基和脂质
过氧化损伤，对四氯化碳肝损伤起到明显的保护作
用，其作用力与联苯双酯接近。因此，玉米须总黄酮
具有很好的开发利用价值和临床应用前景。
参考文献
[1] 　赵文竹 . 玉米须多糖纯化工艺的研究 [J]. 食品工业科技 , 2010, 28(1):
72- 75.
[2]　王　磊 , 刘秀凤 , 邱芳萍 , 等 . 微波辅助提取玉米须多糖及其组成的研
究 [J] . 食品与生物技术学报 , 2009, 28(1): 72- 75.
[3]　纪丽莲 . 玉米须提取物对食品腐败菌及致病菌抑制作用 [J]. 生命科学研
究 , 2001, 5(1): 68-70.
[4]　Orhan I E, Sener B, Musharraf S G. Antioxidant and hepatoprotective activity
appraisal of four selected Fumaria species and their total phenol and flavonoid
quantities [J]. Exp Toxicol Pathol, 2012, 64: 205-209.
[5]　Lin H M, Tseng H C, Wang C J, et al . Hepatoprotective effects of Solanum
nigrum Linn extract against CCl4-induced oxidative damage in rats [J]. Chem-
Biol Interact, 2008, 171: 283-293.
[6]　Roome T, Dar A, Ali S, et al . A study on antioxidant, free radical scavenging,
anti-inflammatory and hepatoprotective actions of Aegiceras corniculatum
(stem) extracts [J]. J Ethnopharmacol, 2008, 118: 514-521.
[7]　Pari L, Suresh. A Effect of grape leaf extract on alcohol induced oxidative
stress in rats [J]. Food Chem Toxicol, 2008, 47: 1627-1634.
[8]　Lee K J, Choi J H, Jeong H G. Hepatoprotective and antioxidant effects of the
coffee diterpenes kahweol and cafestol on carbon tetrachloride-induced liver
damage in mice [J]. Food Chem Toxicol, 2007, 45: 2118-2125.
[9]　Hung M Y, Fu T Y C, Shih P H, et al . Du-Zhong (Eucommia ulmoides Oliv.)
leaves inhibits CCl4-induced hepatic damage in rats [J]. Food Chem Toxicol,
2006, 44: 1424-1431.
[10]　Wang T, Sun N L, Zhang W D, et al . Protective effects of dehydrocavidine
on carbon tetrachloride-induced acute hepatotoxicity in rats [J]. J
Ethnopharmacol, 2012, 117: 300-308.
收稿日期：2014-09-22
可加重缺血细胞的损伤，甚至导致细胞的死亡。临床
表现为某些器官功能损伤甚至衰竭，并由此导致连锁
反应，发生多个器官功能损伤甚至衰竭。其中心肝肺
肾胃肠道容易受累，表现为心肌梗死、肝细胞水肿、
体积增大、肺水肿、急性胃黏膜病变、肾功能衰竭及
代谢等系统或器官的损伤，病死率与器官衰竭数目呈
正相关。各器官功能衰竭加重了原有脑部病灶的损
伤，并可使机体各器官进一步受累，形成恶性循环，
甚至导致死亡。因此开展脑缺血再灌注多器官损伤防
治作用的研究，具有重大医学价值和社会意义。
本实验采用改进的 Himori 法制备小鼠短暂性脑
缺血模型，研究剪刀股醇提物对小鼠脑缺血再灌注损
伤后心肌组织中 SOD 和 GSH-PX 含量的影响，探讨
剪刀股醇提物对脑缺血再灌注损伤后多器官损伤防
治作用的机制，为其临床上因脑血管疾病所导致的心
肌损伤的防治提供有力的理论和实验依据。
脑缺血再灌注损伤机制与自由基的生成有关，研
究 [6] 表明氧自由基的生成增加及脂质过氧化是缺血
再灌注心肌组织损伤的重要发病机制。在脑缺血再灌
注过程中，自由基急剧增高可引起生物膜不饱和脂肪
酸发生脂质过氧化，从而损伤细胞膜结构，导致细胞
膜功能障碍。抗氧化酶具有清除氧自由基、抗脂质过
氧化损伤、从而对组织细胞产生保护作用。
SOD 和 GSH-PX 能消除生物体在新陈代谢过程
中产生的有害物质。它们能专一的消除体内有害的自
由基，以解除自由基氧化体内的某些组成成分而造成
的机体损害。如氧中毒、急性炎症、水肿、自身免疫
性疾病、辐射病等疾病都与活性氧的毒性有关。
在实验中发现，脑缺血再灌注后小鼠心肌组织中
SOD 和 GSH-PX 显著降低；剪刀股醇提物使脑缺血
再灌注小鼠心肌组织中 SOD 和 GSH-PX 显著增加。
说明剪刀股醇提物对脑缺血再灌注所致心肌损伤有
一定改善作用。
参考文献
[1]　国家中医药管理局《中华本草》编委会 . 中华本草 [M]. 上海 : 上海科学
技术出版社 , 1999: 881.
[2]　蒲明秋 , 毛飞鹏 . 蚕豆根尖细胞微核试验 -剪刀股对抗烟碱引起遗传物
质损伤的诱变效应 [J]. 中国慢性病预防与控制 , 1995, 15(02): 89.
[3]　王 树 , 张 力 . 脑缺血及脑缺血再灌注损伤动物模型制备方法及评价 [J].
神经药理学报 , 2011, 1(3): 31-40.
[4]　曾春萍 . 桃仁复苏汤对小鼠脑中乙酰胆碱含量、过氧化氢酶及谷胱甘肽
过氧化酶活性的影响 [J] . 现代中药研究与实践 . 2013, 27 (4): 30-31.
[5]　邵邻相 . 灵芝对小鼠 SOD活性、丙二醛和脂褐素含量的影响 [J]. 现代中
药研究与实践 , 2003, 16(4): 42-43.
[6]　朱广旗 , 吴远华 , 曹丽平 . 通窍化栓汤对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织
抗氧自由基的影响 [J]. 中医杂志 , 2013, 54(7): 605-607.
收稿日期：2014-07-02
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