全 文 ：中国园艺文摘 年第 期
云南杨梅中多酚类物质的提取与活性研究
吴文彬 王白娟
昆明冶金高等专科学校环境工程学院 , 云南 昆明 。。。。 云南农业大学基础与信息工程学院 , 云南 昆明
摘 要 以云南富民杨梅为原杆 , 提取其中的多酚类活性物质进行总酚含量测定 , 并进一步研究其抗氧化 、 抑制
亚琦胺能力。试验结果表明 杨梅总酚含量 呢 样品。 自由基法显示 , 杨梅多酚提取物具有一定的
清除 自由墓能力 , 其清除能力与多酚提取物浓度之间存在明显的剂量效应关系 , 随看杨梅多酚提取物浓度的增
大 , 其清除二苯代苦味跳自由基 印的能力增强。在与 , 一二叔丁叁对甲酚 丁的抗氧化性比较中 , 杨梅多酚提
取物的抗氧化性明显要高于合成的抗氧化剂 丁, 当杨梅多酚提取物的浓度 。 时 , 清除在自由基的清除率为
, 同等条件下 , 杨梅多酚提取物清除在自由基的清除率是常用抗氧化剂 丁的 倍 。杨梅中多酚类物质具有
良好的阻断亚琦胺合成能力 , 有一定的清除亚峭胺能力 , 当杨梅多酚提取物含量为。 时 , 清除率最高。
关键词 杨梅 多酚类 抗乳化 亚峭胺
杨梅为杨梅科杨梅属 , 亚热带常绿乔木果树 , 栽培种
又名朱红 福建 、 树梅 台湾 。杨梅原产中国东南各省和云
贵高原 。栽培历史悠久 , 现主要分布在浙江江苏 、 福建 、
云南及广东等地 。杨梅的品种在我国约有四种 , 即杨梅 、
毛杨梅 、细叶杨梅 、矮杨梅 。其中以杨梅分布较广 , 它又
分为野杨梅 、红杨梅 、乌杨梅 、 白杨梅 、早胜杨梅 、杨平
梅等 个类型 。主要优良品种有 革`养种 、 丁`吞梅 、
大`炭梅 、 东`魁杨梅 等
杨梅果实初夏成熟 , 色泽艳丽 , 口味酸甜 , 风味独特 ,
汁液多 , 营养价值高 , 是天然的绿色保健果品 。近代生物
学和医学证明 , 杨梅具有消食 、消暑 、御寒 、止泻 、利尿 、
治痢疾及生津止渴 、 清肠胃 、 除烦愤恶气等多种药用价值 ,
在医学上常用作收敛剂 、 强心剂 、 驱风剂 、 健胃剂 、 胸肺
药 、皮肤药和创伤药等 。杨梅为果中珍品 , 内含丰富的蛋
白质 、铁 、镁 、铜和维生素 、柠檬酸等多种有益成分 。优
质杨梅果肉的含糖量高达 一 , 果酸 一
, 富含纤维素 、矿质元素 、维生素和一定量的蛋白质 、脂
肪 、 果胶及 种对人体有益的氨基酸 , 其果实中钙 、 磷 、 铁
含量要高出其他水果 多倍 。这些营养成分 , 不仅可直接
参与体内糖的代谢和氧化还原过程 , 增强毛细血管的通透
性 , 而且还有降血脂 , 阻止癌细胞在体内生成的功效 。杨
梅除了含有丰富的碳水化合物 、蛋白质 、氨基酸 、有机酸 、
矿物质 、 维生素外 , 还含有丰富的多酚类化合物 , 主要有
原花色素和类黄酮等间。杨梅果汁具有较强的清除自由基的
能力 , 能显著地抑制亚硝酸钠和 一甲基节胺的致突变作
用 , 具有潜在的抗肿瘤作用 。杨梅核仁含有维生素 , 是
医学上常用的抗癌药物 。杨梅核仁提取液对胃癌细胞有杀
伤抑制作用。杨梅多酚的抗氧化作用能维持生物膜的稳定
第一作者简介 吴文彬 一 , 女 , 助教 主要从事食品工程
研究 。
通讯作者 王白娟 , 讲师 。 ·
性 , 可保护小白鼠由核辐射引起的有形血细胞减少 , 并可
有效防治辐射引起的各种出血症 。类黄酮 是
植物重要的一类次生代谢产物 , 它以结合态 黄酮普 或自由
态 黄酮普元 形式存在于水果 、蔬菜 、豆类和茶叶等许多食
源性植物中 。据统计 , 美国人每天类黄酮的摄入量大于
人 , 荷兰人为 人 , 主要来源为茶 、
洋葱 、水果 。类黄酮的抗氧化机制包括去除自
由基及活性氧分子 利用鳌合能力抑制金属离子 , 与蛋白
质形成复合物 , 还原氧化的维生素 或维生素 以显示加乘
效果 。类黄酮可以经由鳌合方式连结 个或 个铜原子而抑
制含铜酶 , 如抗坏血酸氧化酶 、 多酚氧化酶等阎, 不同类型
的果蔬含有其特殊的类黄酮 花青素是一种水溶性色素 ,
与糖类形成糖普 。 等探讨了 种花青素的抗氧化活性
发现 叮 一一 活性最高 , 约为
维生素 的 倍 , 最低 幻。近年来对作为多酚
的花青素对健康可能带来的好处的关注越来越集中 。西方
人常吃诸如此类的食物 , 具有清除自由基的抗氧化活性 ,
可使胃壁不受自由基引起的伤害 同时 〔 可与蛋
白质紧密结合而具保护胃壁的功能叫。将来花青素的这种特
性在功能食品和保健食品中有可能得到日益应用 。花青素
为人体带来多种益处 。从根本上讲 , 花青素是一种强有
力的抗氧化剂 , 它能够保护人体免受一种叫做 自由基的
有害物质的损伤 。花青素还能够增强血管弹性 , 改善循
环系统和增进皮肤 的光滑 度 , 抑制炎症和过敏 , 改善关
节的柔韧性。
由于植物中多酚化合物均有较强的药理作用 , 因此本
试验针对杨梅中的多酚化合物进行提取测定 , 研究其总酚
含量与抗氧化性 、 清除亚硝胺的关系。
材料与方法
材料
云南富民杨梅 。
样液的制备
取 份杨梅果肉 , 用研钵捣烂 , 加人 乙醇
溶液 , 倒入锥形瓶 , 再用 乙醇溶液清洗研钵两次 ,
一 一
C H !NE SE H OR T !CU LT UR E A BS TRA CT S
清洗液倒人原来的锥形瓶 。将锥形瓶用橡胶塞封口 , 放入
恒温振荡器中 , 在 ℃恒温振荡浸提 。 后 , 将提取液
和渣用离心机离心 , 以 , 离心 。再将上清
液倒入烧杯封口 , 冰箱保存 。沉淀用 乙醇溶液再
以 ℃恒温振荡浸提 。将第 次浸提液和渣抽滤 , 滤液以
, 离心巧 。两次上清液合并。
将合并的提取液用旋转蒸发仪蒸发掉部分乙醇 , 再将
提取液用 乙醇溶液定容于 容量瓶中 , 配制成
的果蔬提取液 , 冰箱保存 , 待用 。
总酚含量的测定
标准曲线绘制 ` 分别精确吸取 、 耐 、
、 而 、 的没食子酸标淮液置于一系列
容量瓶中 , 加水稀释至 , 各加 一酚试
剂 , 溶液 , 加水稀释至刻度 , 摇匀 , 室温放
置 , 在分光光度计上测定 处的吸光度 。以浓度
为横坐标 , 以其吸光度值为纵坐标 , 绘制成标谁工作曲线 。
用一系列不同浓度的没食子酸按上述条件处理 , 测定吸光
值 , 可得浓度与吸光值 的曲线 。得线性回归方程为 “
, 相关系数为 。
杨梅总酚含量测定 吸取 制备好的杨梅
提取液 , 稀释 倍 , 取 作待测液 , 按作标准曲
线的方法进行测定 。计算总酚含量 , 平行测定 次 , 取平
均值。
总酚含量 稀释倍数 、
上式中 , 原提取液体积
将所测定溶液的吸光度带入曲线方程计算出
总酚的浓度
样品重量
测定杨梅的抗氧化活性 将提取液 置于
具塞比色管中 , 加入 乙醇溶液
, 充分混匀 , 室温静置 , 后用分光光度计
在 下测定其吸光度 式以 乙醇溶液为参比 同时
测定 溶液与 乙醇溶液混合后的吸光度
, 以及 提取液与 乙醇溶液混合后的吸光度
。根据以下公式计算抑制率 。
抑制率 二【一 一
与 乙醇溶液的吸光度
与提取液反应后的吸光度
提取液与 乙醇溶液的吸光度
平行测定 次 , 取其平均值 。抑制率即表明杨梅的抗氧
化活性 。
不同浓度杨梅提取液和 溶液的抗氧化性比较
取不同浓度 浓度分别为 、 、 、 、
、 、 的杨梅提取液及不同浓度 浓度分
别为 、 、 、 、 、 、 的
溶液 , 按 的方法分别测定抗氧化活性 。
亚硝胺合成阻断及其清除的测定
亚稍胺合成阻断率的测定 取 的柠檬酸一磷
酸氢二钠缓冲液 加人到 容量瓶中 , 加人
一玩 的 掖 , 然后加人提取液 , 再加
一 的二甲胺溶液 , 最后将整个反应体系
定容至刻度 , ℃恒温反应 , 用紫外光解法测定
的含量并与不加提取液的 号作对比 , 按以下公式计算阻
断率 。
阻断率二【 户
。 不加提取液的 号的吸光度值
各组样品的吸光度值
紫外光解法 上述 的水溶液加入到 的平
皿中 , 加 溶液 , 于暗室中用紫外分析仪器
照巧 , 紫外灯离液面巧 , 取出后加 对氨基苯磺
酸溶液 耐 , 再加 的 一奈胺溶液 , 放置
巧 , 在波长 下测定吸光度值 。
亚峭胺清除率的测定 在模拟胃液的条件下进行反
应 加入 二 的柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液 一 容量
瓶中 , 再加入 的 溶液 和 提取液 ,
用蒸馏水定容至刻度 , ℃恒温反应 , 然后各吸取 反
应液到 的平皿中 , 加入 质量分数 的对氨基苯磺酸
溶液 , 质量分数 一一奈乙二胺盐酸溶液 ,
摇匀放置巧 后 , 用分光光度计在 处测吸光度值 ,
分别用相应浓度相同用量的浸提剂做空白试验 , 最后根据
亚硝酸钠标准曲线 , 按下面公式计算清除率 。
清除率 办
。不加提取液的 号的吸光度值
各组样品的吸光度值
结果与分析
杨梅多酚提取物中总酚含量的测定
酚类化合物通常存在于可食用和非食用的植物中 , 它
们具有多种生物效应 , 包括抗氧化性 。本次试验按 方法
测得杨梅的总酚含量为
法测定杨梅的抗氧化活性
植物中存在着很多种不同的抗氧化剂 , 很难单独的测定每
一种抗氧化剂的成分 。因此 , 一些方法已经制定出来用于评
价水果或其他植物和动物组织的总抗氧化活性 。通常使用
的方法有清除过氧化氢的能力 、总的自由基吸收潜力 、氧
自由基吸收能力法 、 法。这些是经常用于各类调查的
代表方法 。我们选择 法测定杨梅中的活性物质的抗氧
化活性。
法是 年代提出的 , 最初用于发现食物中的供
氢体 , 后来广泛用于定量测定生物试样 、酚类物质和食品
的抗氧化能力 。 是一种稳定的自由基 , 在 处有
强吸收 。当有自由基清除剂存在时 , 的单电子被配
对而使其颜色变浅 , 在最大吸收波长处的吸光度变小 , 而
且这种颜色变浅的程度与配对电子数呈化学计量关系。因
此 , 利用其试样与 反应性 , 可以检测其清除自由基
的能力 , 能力的大小用抑制率表示 , 抑制率越大则抗氧化
性越强 。
由图 可知 , 杨梅多酚提取物具有清除 自由基的
能力 , 当杨梅多酚提取物浓度为 时 , 其抑制率为
。在一定浓度范围内杨梅多酚提取物的浓度增大 ,
其清除 自由基的能力增强 , 当杨梅多酚提取物浓度
一 一
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阅
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浓度
图 不同浓度杨梅多酚提取液对 的抑制率
高于 血时 , 清除自由基能力减弱 , 可能是由于存在
其他干扰物质 , 有待于进一步研究。
抗氧化活性比较
二丁基经基甲苯 是广泛用于食品的合成抗氧化
剂 , 易溶于油脂 , 不溶于水 , 是一种白色结晶固体 , 属
于酚类抗氧化剂 , 具有微弱的酚味 。 属于经基酚 , 它
与自由基作用后产生具有中等程度的共辘离域自由基中间
体 , 即较稳定的苯氧自由基来终止链式反应 , 从而起到抗
氧化作用 。抗氧化剂本身产生的自由基越稳定 , 抗氧化效
果越好 。
有些酚类有利于健康或它们本身潜在的抗氧化性对消
费者来说是重要的 , 尤其当这些化合物大量存在于食品之
中时 。天然抗氧化剂如维生素 和 一抗坏血酸由于被认为
安全并且很少产生有害反应而被广泛使用 , 但它们的抗氧
化能力低于那些合成的抗氧化剂 , 如 、 与促癌
剂苯巴比妥有相似的效应 , 它可以促进 一乙酞基氨基药诱
导的肝肿瘤 , 是一种较弱的促癌物 。因此 , 有必要用安
全 、经济 、抗氧化活性高的天然抗氧化剂来代替这些合成抗
氧化剂 。
本次试验为进一步了解杨梅的抗氧化活性 , 就一系列
不同浓度的杨梅提取液对 的抑制率进行研究 , 并与
比较 , 用抑制率对浓度作图 , 得抑制率曲线 。
由图 可知 , 杨梅多酚提取物对经自由基有明显清除作
用 。当杨梅多酚提取物的浓度为 时 , 清除经自由
基的清除率为 。同浓度的 清除经自由基的清除
率为 , 同等条件下 , 杨梅多酚提取物清除经自由基
的清除率是常用抗氧化剂 的 倍。任一浓度下的杨
梅对自由基的清除率都比 高一倍多 , 由此可见杨梅具
有较强的的抗氧化性 。随着杨梅多酚提取物浓度的增大 ,
对经自由基的清除率增大 , 抗氧活化活性增强并趋于稳
定。但当浓度高于一定程度时 , 抗氧化性有所减弱 , 或许
以联 】
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杨梅抑制率
勺,抑制串
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浓度
以减
图 杨梅多酚提取液与 盯抗氧化性比较
中国园艺文摘 年第 期
是因为有其他氧化性物质含量增加起了抵制作用 , 这方
面有待进一步研究 。由试验结果可知 , 杨梅明显比合成
抗氧化剂 具有更好的抗氧化效果 , 而且杨梅属于天然
抗氧化物质 , 可以作为一种很好的天然抗氧化活性物质的
提取素材 。
杨梅清除亚硝胺和阻断亚硝胺合成的剂量效应
关系
亚硝胺有 多种化合物 , 不同的亚硝胺可引起不同的
肿瘤 , 主要有食道癌 、鼻咽癌 、胃癌 、膀胧癌等 。 一亚硝
基化合物是一种具有强烈致癌作用的化合物 , 具有致畸作
用的胚胎毒性 。在现已研究的近 种 一亚硝基化合物中
已发现 以上具有致癌性 , 虽然天然存在的 一亚硝基
化合物较少 , 但 一亚硝基化合物的前体物质 硝酸盐或亚
硝酸盐和胺类 广泛存在于食物中以及产生于食物在体内
的代谢中 , 硝酸盐或亚硝酸盐和胺类可以在体内合成亚硝
胺 , 尤其在胃液中更易合成 。因此在 日益关注健康的今
天 , 如何采取有效途径达到清除亚硝酸盐以及阻断亚硝胺
的合成是有效防癌的主要途径洲 。杨梅果汁中含有一定的
抗癌物质 , 具有较强的清除自由基的能力 , 能显著地抑
制亚硝酸钠和 一甲基节胺的致突变作用 , 具有潜在的抗肿
瘤作用。
本次试验在模拟胃液条件 , ℃ 下 , 探讨杨
梅对亚硝胺钠合成阻断及清除能力的剂量效应关系 , 测定
了不同浓度杨梅多酚提取物对亚硝胺的清除率及合成的阻
断率 。
由图 可知 , 杨梅多酚提取物对亚硝胺合成阻断率与杨
梅多酚提取物含量成正相关 , 随着浓度的增加 , 阻断能力增
强 杨梅多酚提取物对亚硝胺清除能力与杨梅含量不成正相
关 , 当杨梅多酚提取物含量为 而时 , 清除率最高 ,
当杨梅多酚提取物含量高于 时 , 对亚硝胺无清除
能力 , 但对亚硝胺合成的阻断能力增强 , 考虑到杨梅本身含
有的亚硝酸盐所产生的吸光度 , 总体而言 , 杨梅可以很好
的阻断亚硝胺合成 , 并且在一定浓度范围内可以很好的清
除亚硝胺 。由此可见 , 杨梅具有一定的抗癌作用 , 是天
然的抗癌果品 , 在营养保健功能上的价值有待进一步挖掘
开拓 。
结语
概括来说 , 在本研究中运用了 法来测定杨梅的抗
氧化性 , 并通过与 抗氧化性的比较 , 肯定了杨梅的抗
氧化功能 。杨梅可以成为天然抗氧化活性物质的提取素材 ,
具有很强的抗氧化性 , 是抗氧化剂的丰富来源。杨梅强烈
的抗氧化活性是其生理功能的基础 , 分离提取杨梅果实中
的抗氧化活性成分 , 将其用于抗衰老保健食品及天然食品
抗氧化剂的研制是大有可为的。 国外已经有人将其用于食
品的天然抗氧化剂 , 这在国内还是一个空白。这项研究的
结果还有益于设计场区单位来从杨梅果实中提取抗氧化剂
和天然甜味剂。在杨梅清除亚硝胺和阻断亚硝胺合成研究
中表明 , 杨梅具有很好的阻断亚硝胺合成能力 , 具有一定
的抗癌防衰老功能 , 可以作为天然的抗癌佳品。杨梅作为
疗效食品或功能性食品及营养食品的添加剂等 , 很容易被
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令一 清除率
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浓度
不同浓度杨梅多酚提取液对亚稍胺的
清除率及合成的阻断率
消费者接受 。杨梅营养价值高 , 是天然的绿色保健食品 。
由于饮食中富含其他植物产物 , 杨梅多酚提取物在提高人
类饮食中的抗氧化剂摄人量可以发挥重要的作用 。杨梅的
开发性工作远远未体现其真正的价值 , 它作为新型食品资
源研究和功能性保健品的开发需要深人地研究 。
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