全 文 ：第 27卷增刊
2007年 10月
林　产　化　学　与　工　业
ChemistryandIndustryofForestProducts
Vol.27Supplement
Oct.2007
研究 报 告
毛杨梅树皮提取物抗氧化及清除
自由基活性初步研究
　　收稿日期:2007-06-20
　　基金项目:国家科技支撑计划资助项目(2006BAD18B0403)
　　作者简介:陈笳鸿(1949-),男 ,广东广州人 ,研究员 ,从事植物资源化学利用研究;E-mail:chen-jiahong@ 163.com。
CHENJia-hong　　
陈笳鸿 , 汪咏梅 , 吴冬梅 , 吴在嵩
(中国林业科学研究院林产化学工业研究所;国家林业局林产化学工程
重点开放性实验室 , 江苏 南京 210042)
摘　要:　毛杨梅树皮提取物中的主要成分为局部棓酰化的聚原翠雀定 , 具有比原花青定抗氧化
活性更强的化学结构特征。本研究以水为提取剂 , 通过强化提取 、絮凝沉降 、溶剂萃取 、吸附分离
等手段从树皮中提取分离得到产物 , 并经花色素反应定性和 IR谱图鉴别。用凝胶渗透色谱法
(GPC)和蒸汽渗透压法(VPO)测定产物的相对分子质量(Mr)及其分布 , 产物中 95%以上组分的数均相对分子质量
(Mn)为 1 705(相当于聚合度 4～ 5),其余组分的 Mn为 798。用化学法测定目标产物分子中 C-3的棓酰化度为 38%。
生物活性功能测定结果表明 ,目标产物能明显抑制油脂过氧化;络合 Fe2+金属离子能力为 181mg/g;1mg目标产物对 1,
1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基的清除速率为 0.23mg/min, 清除率为 92%(试验浓度:产物与 DPPH质量比为 1∶1.
8),强于马尾松树皮原花色素试样。初步研究结果表明 ,毛杨梅树皮提取物可望进一步开发成为新型天然抗氧化及自由
基清除剂。
关键词:　毛杨梅;原花色素;原翠雀定;抗氧化;清除自由基
中图分类号:TQ91　　　　　　文献标识码:A　　　　　　文章编号:0253-2417(2007)S0-0001-07
PreliminaryStudyonAntioxidativeandRadical-scavengingActivitiesof
ExtractsfromMyricaesculentaBuch.-Ham.Bark
CHENJia-hong, WANGYong-mei, WUDong-mei, WUZai-song
(InstituteofChemicalIndustryofForestProducts, CAF;KeyandOpenLab.on
ForestChemicalEngineering, SFA, Nanjing210042, China)
Abstract:MyricaesculentaBuch.-Ham.isaspeciesofperennialtreedistributingwidelyinSouthernChina.Majorcomponents
ofextractsfromM.esculentabarkarepartiallygaloylatedpolymericprodelphinidins.Basedonthefeatureofchemicalstructure,
anti-oxidationactivitiesofprodelphinidinsarestrongercomparedwithprocyanidins.Extractsfromthebarkwereobtainedby
intensifiedextractionwithwaterfolowedbyseparationandpurification.Theextractsareproanthocyanidinsidentifiedbyanthocy-
anidinreactionandIR-spectra.Number-averagemolecularweight(Mn)oftheextractsarerespectively1 705 (95%)and798
(5%)determinedbyGPCandVPO.GaloylationdegreeatC-3 ofthemoleculeweredeterminedas38%.Bio-activitydeter-
minationshowedthattheextractscouldevidentlyinhibitlipidperoxidation, complexmetalions(e.g., Fe2+, 181mg/g)and
scavengefreeradical(e.g., DPPH, scavengingspeed0.23 mg/minfor1mgtargetextracts;scavengingrate92%, whilemass
ratioofextracttoDPPH 1∶1.8).Resultsindicatedthattheextractswouldbehopefullydevelopedasanewtypeofnatural
antioxidantandradical-scavengingagent.
Keywords:MyricaesculentaBuch.-Ham.;proanthocyanidins;prodelphinidins;antioxidation;freeradical-scavenging
2　 林　产　化　学　与　工　业 第 27卷
毛杨梅(MyricaesculentaBuch.-Ham.),有文献又称大树杨梅 [ 1] ,杨梅科杨梅属 ,多年生常绿乔木 ,
产于我国四川中部以西 、贵州西部及南部 、广东西北部 、广西和云南[ 2] 。毛杨梅树皮富含聚原花色素
(polymericproanthocyanidins)。根据分子结构单元的不同 ,原花色素分为原花青定(procyanidin)类 、原
翠雀定(prodelphindin)类 、原菲瑟定(profisetinidin)类等 。毛杨梅树皮提取物属原翠雀定类原花色素 ,其
主要成分为局部棓酰化的聚原翠雀定(polymericprodelphinidins),这在植物中不多见 ,因为在植物体中
原翠雀定多与原花青定伴生共存[ 3-5] 。植物原花色素是具有多种生理活性的黄烷醇类多酚化合物 ,其
应用于基础研究和开发利用研究已经成为当前国内外天然化合物研究领域的热点。研究表明 ,低聚原
花色素(oligomericproanthocyanidins, OPCs)具有很强的抗氧化生物活性 ,能清除人体内有害的自由
基 [ 6-8] ,如国外有人从法国海岸松树皮和其它松属树皮中提取的碧萝芷(pycnogenol)、从葡萄籽和皮中
提取的原花青素(grapenol)等 。近年来 ,国内也有厂家生产葡萄籽 、皮和松树皮提取物 ,作为天然保健品
进入市场[ 9-10] 。国内外的研究开发工作主要集中在原花青定类型的植物原花色素 ,对从毛杨梅树皮等
植物原料提取原翠雀定类型的植物原花色素及其生物活性功能的研究尚未见有报道 。
本研究以水为提取剂 ,通过强化提取 、絮凝沉降 、溶剂萃取 、吸附分离等手段 ,从毛杨梅树皮中提取
分离获得以原翠雀定为主体的生物活性物质;测定了毛杨梅树皮提取物相对分子质量及其分布和分子
中 C-3的棓酰化度;初步研究了产物的抗氧化活性 、络合金属离子能力和清除自由基能力 。研究结果
为毛杨梅树皮提取物进一步开发新型天然抗氧化及自由基清除剂打下基础 。
1　实 验
1.1　材料与仪器
主要材料:毛杨梅树皮由广西武鸣栲胶厂提供 ,风干 ,用植物粉碎机粉碎(过 2mm筛板);筛去灰土
和碎屑;按 LY/T1083-1993方法测定 ,含单宁 27.2%,水分 14%。壳聚糖 、乙酸 、乙酸乙酯 、乙醇 、醋
酐 、吡啶 、四氢呋喃 、铬皮粉 、硫酸亚铁铵均为国产分析纯试剂;标准样品:棓儿茶素-3-O-棓酸酯 ,上海
有思生物技术有限公司制备;AB-8型大孔吸附树脂 ,南开大学化工厂生产。亚麻油;Span80,浙江省温
州清明化工厂生产;1, 1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基 , Sigma公司 。马尾松树皮原花色素 ,有效成
分≥85%;水(一级水)。
主要仪器:KH-200 DB型数控超声波清洗机 ,昆山禾创超声仪器有限公司;层析柱:玻璃 , 内径
29mm,长 500mm(AB-8型大孔吸附树脂 ,装柱体积(BV)为 210mL);SENCO-R型旋转真空蒸发器 ,上
海申生科技有限公司;FD-1型冷冻干燥机 ,日本 EYELA公司;Nicolet-FT-IR550型红外光谱仪 ,美国;
Waters244型凝胶色谱仪 ,美国 Waters公司;蒸汽压渗透计 VPO,德国 Krauer公司;UV/VISLambda-6
型紫外 /可见分光光度计 ,美国 PerkinElmer公司 。
1.2　产物制备方法
1.2.1　水提取　多罐连续提取:共 4组 ,每罐加入毛杨梅树皮 50g。首罐加入清水 500mL浸提 ,提取
液依次转入下一罐 ,每罐分别提取和出液 5次 。收集末罐提取液进行后处理。提取温度 80℃,每次提
取 40min。超声波强化浸提:在烧杯中加入 120g毛杨梅树皮粉末和 840mL水进行超声波强化提取 ,收
集浸提液进行后处理 。超声波频率 40kHz,超声波功率 200W,提取温度 60℃,提取时间 60min。
1.2.2　絮凝沉降　将 1.2.1节提取液用旋转蒸发器在真空度约 0.09MPa下浓缩至约 5°Be′。加入
1%的壳聚糖-乙酸溶液作为絮凝剂(壳聚糖用量为树皮原料质量的 0.05%)。充分搅拌后于 5℃冰
箱中静置沉降 48h,取上层清液 ,一部分继续进行后处理 ,一部分直接进行冷冻干燥得产物 Ⅰ 。产物 Ⅰ
用以测定评价毛杨梅树皮提取物的得率。
1.2.3　溶剂萃取　用乙酸乙酯对 1.2.2节清液进行萃取 ,分为溶剂相和水相 。水相继续进行大孔树脂
吸附分离。溶剂相用水充分洗涤后用旋转蒸发器减压蒸除乙酸乙酯并回溶于适量水 ,再冷冻干燥得产
物 Ⅱ。产物 Ⅱ用以测定该部分的数均相对分子质量(Mn)。
1.2.4　吸附分离　分别将 1.2.2节清液和 1.2.3节溶剂萃取后水相的总固物的质量分数调至约
增刊 陈笳鸿 ,等:毛杨梅树皮提取物抗氧化及清除自由基活性初步研究 3　
4.5%,常温下通过层析柱进行大孔树脂吸附分离 。操作程序:正向走液 ,每次上柱液量 1.7BV,时间
1h;水洗 ,水量 2.5BV,时间 1h;70%乙醇洗脱 ,乙醇量 1.25BV,时间 1h。分别收集洗脱液。
对 1.2.2节清液吸附分离处理后收集的洗脱液 ,用旋转蒸发器减压蒸除乙醇 ,再冷冻干燥得产物 Ⅲ
(包含产物Ⅱ和产物Ⅳ的成分)。产物 Ⅲ为本研究的目标产物 ,用以有效成分的定性 、定量分析 ,棓酰化
度和生物活性功能的测定评价 。
对 1.2.3节溶剂萃取后的水相吸附分离处理后收集的洗脱液 ,用旋转蒸发器减压蒸除乙醇 ,再冷冻
干燥得产物Ⅳ。产物Ⅳ用以测定该部分的相对分子质量(Mr)和多分散性。
1.3　有效成分定性鉴别方法
根据 Poter提出的花色素反应方法 , 按比例将产物试样的甲醇溶液与正丁醇-盐酸(95∶5,体积比)、
2%硫酸铁铵 、 2mol/L盐酸溶液混合 ,在 95℃下反应 40min。生成深红色花色素 ,表明产物为原花色
素 。红外光谱鉴别:对目标产物和作为参照物的棓儿茶素-3-O-棓酸酯标准样品分别作红外谱图 ,并进
行比较和鉴别。
1.4　有效成分定量分析方法
按 LY/T1082-1993(皮粉法)进行。
1.5　相对分子质量(Mr)及其分布测定
1.5.1　产物 Ⅱ　用醋酐 /吡啶法将产物 Ⅱ试样乙酰化;将乙酰化产物溶于四氢呋喃 ,滤除极少量不溶
物 ,蒸除溶剂后即得纯乙酰化产物 ,以此为试样用蒸汽渗透压法(VPO)测定 Mn。测定条件:柱温 37℃;
溶剂:氯仿;灵敏度 1/4;读数时间 3s;标准物质:联苯甲酰(重结晶)。
1.5.2　产物Ⅳ　按 1.5.1节方法将产物Ⅳ试样乙酰化后 ,用凝胶渗透色谱法(GPC)测定 Mr及其分
布 。测定条件:检测器为 RI;标准物为聚苯乙烯;溶剂用四氢呋喃;色谱柱:10、 50、 100、 1 000nm,
μ-styragel四柱串联;标准方程:lgM=9.635 4-0.193 Ve。
1.6　棓酰化度测定
按 1.5.1节方法将目标产物乙酰化后 ,将乙酰化产物在氮气保护下进行水解 ,用紫外分光光度法
(λ=263nm,以标准没食子酸为参照物)测定水解液中没食子酸含量(Gx)。按原翠雀定分子中 C环
C-3羟基全部棓酰化计算其没食子酸总量(G100%),通过测定值与计算值的比值 Gx/G100%计算产物的棓
酰化度(%)。
1.7　生物活性功能测定
1.7.1　抑制油脂过氧化功能的测定　采用烘箱法测定 。以亚麻油为底物 ,加入目标产物乙醇溶液 ,加
入量为底物的 0.04%作为抗氧化剂 ,再加入适量 Span80,振荡混合使其充分乳化。置于(60±2)℃烘
箱内 ,每隔 24h取样一次 ,用碘量法测定过氧化值(POV,以 meq/kg底物计)。同时进行亚麻油空白试
验进行比较 。
1.7.2　对金属离子络合能力的测定　以对脂质过氧化起催化作用的金属离子为试验对象(以 Fe2+为
例),目标产物与 Fe2+生成有色络合物 ,用紫外分光光度法于 584nm波长下测定其吸光度。
配制质量浓度约 1g/L的目标产物水溶液和质量浓度约 0.2g/L的 Fe2+试液(硫酸亚铁铵)。在每
份 5mL的目标产物溶液中分别加入 0、 1.0、 1.5、 2.0、 2.5、 3.0、 3.5、 4.0、 4.5和 5.0mL的 Fe2+试液 ,
再用水定容至 10mL,分别测定吸光度 。当 Fe2+试验液量增加至吸光度保持恒定时 ,表示目标产物对
Fe2+的络合已达到饱和。由此计算金属离子络合能力。
1.7.3　清除自由基能力的测定　以一种稳定的 DPPH自由基为标准物 ,用紫外分光光度法测定[ 11] 。
取 5mL质量浓度为 0.025g/L的 DPPH乙醇溶液 ,加入 1mL质量浓度为 0.07g/L的产物试样乙醇溶
液 ,跟踪测定 517nm处吸光度 ,每隔 1min测定一次 。由于 DPPH自由基被清除导致吸光度持续下降。
直至吸光度保持恒定不变 。按下式计算产物对 DPPH自由基的清除率(R):
R=(A0 -Ax)/A0 ×100%
式中:A0— DPPH乙醇溶液的初始吸光度值;Ax—加入产物试样乙醇溶液之后 DPPH乙醇溶液的恒定吸
4　 林　产　化　学　与　工　业 第 27卷
光度值 。
2　结果与讨论
2.1　不同提取分离方法的效果比较
分别采用多罐连续提取与超声波强化提取进行试验 ,两种方法的试验结果见表 1。
表 1　不同提取方法的结果比较
Table1　Comparisonofresultsbydiferentextractionmethods
提取分离方法
extractionmethods
原料量 1)/g
material
水料比(mL∶g)
water∶material
温度 /℃
temp.
时间 /min
time
次数
times
产物质量 2)/g
output
得率 /%
yield
多罐连续提取
continuousextractionwithsetofjars 50×5 10∶1 80 40×5 5 45.10 21
超声波强化提取
ultrasonicextraction 120 　7∶1 60 60 1 19.13 19
1)气干计 airdryed;2)提取液经过絮凝沉降后清液中的产物质量 outputfromclearliquidlayerofextractionsolutiontreatedbysedimentation
通过比较系统的筛选试验 ,设定了相应的提取条件 。从提取效果看 ,多组连续提取与超声波强化提
取两种方法的平均提取得率都在 20%左右(以产物Ⅰ中总固物质量与投入树皮原料绝干质量的比值
表示)。超声波强化提取法的明显特点是省时 。
不同分离方法处理效果:按 1.4节方法 ,测得产物Ⅰ和目标产物中有效成分的质量分数平均值分别
为 63%和 88%。由此可看出 ,产物 Ⅰ经大孔吸附树脂分离后得到的目标产物 ,纯度提高近 40%。此
外 ,测得絮凝沉降处理后的清液用乙酸乙酯萃取获得的部分(产物 Ⅱ)只占清液中固物质量的 4.7%,
提取物中大部分的有效成分(产物Ⅳ)存在于溶剂萃取处理后的水相中 。
当前 ,研究者普遍认为低聚体原花色素具有较强的生物活性功能 ,但对低聚体和多聚体的界定标准
并没有一致的说法 ,有文献认为二聚体 ～六聚体为低聚体 [ 3, 5] ,也有文献认为二聚体 ～八聚体为低聚
体 [ 10] 。本研究的目标产物为产物 Ⅲ ,选用水为提取剂的目的就是试图获得水溶性的低聚原花色素。将
目标产物经过溶剂萃取分离为聚合度不等的两部分 ,分别测得二者的聚合度在 2 ～ 5的范围内(见 2.3
节),表明水作为提取剂可以得到预期的低聚原花色素 。此外 ,以水作为提取剂还有制备成本低和操作
安全的特点 。
图 1　目标产物的红外谱图
Fig.1　IR-spectrumofthetargetextract
2.2　产物有效成分鉴别
对目标产物采用花色素反应方法进行有效成分
定性分析 ,生成深红色的花色素 ,表明产物为原花色
素 。目标产物的红外谱图见图 1。将目标产物的红
外谱图与作为参照物的棓儿茶素-3-O-棓酸酯标准
样品的红外谱图相比 ,可看出二者有相同的特征吸
收峰:在 1450cm-1附近有属于芳环 C—C伸缩振动;
在 3350cm-1附近有属于酚羟基 O—H伸缩振动;在
1690cm-1附近有属于苯基酯 C O伸缩振动 。表明
目标产物与参照物的棓儿茶素-3-O-棓酸酯具有相
同分子结构特征 。此外 ,目标产物的红外谱图中 ,在
1236cm-1处有属于仲醇羟基 C—O伸缩振动吸收 ,
表明目标产物在 C环 C-3仅为局部棓酰化。由此可鉴别目标产物的分子结构符合预期 。
2.3　产物的相对分子质量(Mr)及其分布
为了解产物的 Mr及其分布 ,对从目标产物分离出来的产物Ⅳ和产物Ⅱ进行 GPC和 VPO测定。为
适应测定要求 ,先将两种产物试样进行乙酰化反应 ,得到乙酰化的产物Ⅳ和产物 Ⅱ ,分别作为 GPC和
VPO测定的试样 ,而后换算成原态产物。
增刊 陈笳鸿 ,等:毛杨梅树皮提取物抗氧化及清除自由基活性初步研究 5　
　图 2　产物Ⅳ的 Mr分布图
　Fig.2　DistributionofMrofproductⅣ
2.3.1　产物Ⅳ　产物Ⅳ的 GPC测定值为:重均相对分子
质量(MW)=5 775, Mn=1 705,多分散指数(D)=3.39,
其 Mr分布见图 2。
　　从 D值和图 2可见产物的 Mr分布的多分散性 ,由测
得的 Mn=1 705估算聚合度相当于 4 ～ 5(棓酰化度按
40%计)。
2.3.2　产物 Ⅱ　产物 Ⅱ的 VPO测定值:Mn=798,相当
于二聚体。在乙酸乙酯萃取出的产物中可能会含有其它
植物多酚 ,如栗木鞣花素 、没食子酸 、表棓儿茶素-3-O-棓
酸酯 、表棓儿茶素-3-O-棓酰-表棓儿茶素等[ 3] 。已有研
究 [ 12-13]表明 ,此类多酚都具有抗氧化活性 ,不会产生拮
抗 ,而且能起到一定程度的协同作用。因此本研究未对乙酸乙酯萃取物(产物 Ⅱ)的成分作详细分析。
初步分离的结果可为产物进一步的分离纯化提供参考。
2.4　产物的棓酰化度
据文献报道 [ 14] ,用 13CNMR测定原翠雀定分子中 C-3的棓酰化度约为 40%。本研究利用棓酰基易
于水解而生成游离没食子酸的特点 ,先将目标产物进行水解 ,测定水解产物中没食子酸含量 ,再换算成
目标产物的棓酰化度 。按 1.6节方法两次测定的平均值为 38%,与文献值相符。本研究为测定产物的
棓酰化度提出了一种简便而直观的方法。
2.5　目标产物的生物活性功能
不同类型原花色素分子结构上的差异必然会导致其抗氧化及清除自由基活性强弱的区别。原花青
定类型和原翠雀定类型原花色素的分子结构不同 ,其主要区别在于:前者的分子结构基础单元为儿茶
素 ,其 B环为邻苯二酚 ,而后者的分子结构基础单元为棓儿茶素 ,其 B环为邻苯三酚;毛杨梅树皮提取
的聚原翠雀定 C环的 C-3上存在局部棓酰化(见图 3),棓酰化度约 40%[ 3] 。
图 3　儿茶素 、棓儿茶素及聚原翠雀定的分子结构式
Fig.3　Molecularstructuresofcatechin, gallocatechinandpolymericprodelphinidins
6　 林　产　化　学　与　工　业 第 27卷
上述分子结构中黄烷-3-醇 B环上羟基数和相互位置对其活性起重要作用 ,相邻的酚羟基多则活
性强;C环上羟基的局部棓酰化也使活性增强。由此分析 ,以局部棓酰化的原翠雀定为主要成分的毛杨
梅树皮原花色素与以原花青定为主要成分的松树皮原花色素相比 ,应具有更强的抗氧化 、清除自由基的
生物活性功能。目标产物生物活性功能初步测定结果对此作出了验证 。
2.5.1　抑制油脂过氧化的作用　按 1.7.1节 ,采用烘箱法进行目标产物抑制油脂过氧化性能试验。用
碘量法测定底物的 POV,并与亚麻油空白试样进行比较 ,结果见图 4。亚麻油为三烯型 ,易于氧化 ,用其
为底物易于观察效果 。从图 4可见目标产物对亚麻油有明显的抗氧化作用 ,以 24h的过氧化值进行比
较 ,加入目标产物的亚麻油的过氧化值仅为空白亚麻油的 36%。
图 4　目标产物对亚麻油的抗氧化作用
Fig.4　Antioxidativeefectofthetargetproducton
linseedoil
2.5.2　络合金属离子(Fe2+)的能力　按 1.7.2节 ,对目
标产物进行络合金属离子能力的测定。测定时实际配制
的目标产物质量浓度为 0.999g/L, Fe2+试液质量浓度为
0.241g/L,测定结果见图 5。
由图 5看出 ,当加入 Fe2+试液达到 3.75 mL时 ,吸光
度便保持恒定 ,表明目标产物试样络合金属离子达到饱
和 。据此计算得到目标产物对 Fe2+的络合能力为
181mg/g。
2.5.3　清除自由基的能力　按 1.7.3节 ,测得 DPPH乙
醇溶液的紫外吸光度为 0.547(λ=517nm,以乙醇为参
比);加入 1mL目标产物乙醇溶液后 ,跟踪测定吸光度的
变化 。测得 7min后吸光度稳定在 0.045,表明 DPPH自由
基已经被清除。由此计算得 1mg目标产物对 DPPH自由
基的平均清除速率为 0.23mg/min,清除率为 92%(试验
浓度:产物与 DPPH质量比为 1∶1.8)。
　　　
　　图 5目标产物对 Fe2+离子的络合能力
Fig.5　Complexingabilityofthetargetproduct
toFe2+ion
　　　　　　
　　图 6　目标产物对 DPPH的清除能力
　Fig.6　DPPH-scavengingabilityofthetarget
product
按上述同样条件 ,选择原花青定类型的马尾松树皮原花色素试样作对比试验 。跟踪测定 DPPH乙
醇溶液吸光度的变化 ,测得 26min后吸光度稳定在 0.053。由此计算得 1mg马尾松树皮原花色素试样
对 DPPH自由基的平均清除速率为 0.06mg/min,清除率为 90%。从对比试验结果可见 ,本研究目标产
物的清除自由基活性强于马尾松树皮原花色素试样 ,特别是清除速率为后者的 3.8倍 。
众多研究表明 ,多酚化合物抗氧化及清除自由基活性的强弱与分子中羟基数目和取代位置有
关 [ 9, 12, 15] ,是基于其酚羟基作为 H供体 ,能与自由基结合成共轭稳定的中间体加以清除及阻断自由基
的链式反应 ,相邻的酚羟基多则活性强。毛杨梅树皮原花色素是以局部棓酰化的原翠雀定为主要成分 ,
马尾松树皮原花色素是以原花青定为主要成分 ,二者相比前者拥有较多的酚羟基 ,并具有局部棓酰化结
增刊 陈笳鸿 ,等:毛杨梅树皮提取物抗氧化及清除自由基活性初步研究 7　
构 ,因此具有更强的清除自由基的生物活性功能。本试验结果验证了这一推论。
3　结 论
3.1　通过水提取 、絮凝沉降 、溶剂萃取 、吸附分离等手段 ,从毛杨梅树皮中提取分离原花色素产物。提
取得率约为 20%,目标产物的有效成分质量分数为 88%。
3.2　花色素反应结果表明目标产物属于原花色素;红外光谱鉴别结果表明目标产物的分子结构符合预
期 。
3.3　用 GPC法和 VPO法测定产物的相对分子质量(Mr)及其分布。产物中 95%以上组分的数均相
对分子质量(Mn)为 1 705(相当于聚合度为 4 ～ 5),其余组分的 Mn为 798(相当于聚合度为 2),表明毛
杨梅树皮原花色素属于低聚体范围。
3.4　用化学水解法验证了目标产物含有可水解的棓酰基 ,测得分子中棓酰化度为 38%,与文献值相
符 。
3.5　生物活性功能测定结果表明 ,毛杨梅树皮原花色素能明显抑制油脂过氧化;络合 Fe2+能力为
181mg/g;1mg目标产物对 1, 1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基的清除速率为 0.23mg/min,清除率
为 92%(试验浓度:产物与 DPPH质量比为 1∶1.8),强于马尾松树皮原花色素试样 。
3.6　初步研究结果表明 ,从毛杨梅树皮可提取以局部棓酰化的原翠雀定为主要成分的低聚原花色素 ,
目标产物具有抑制油脂氧化 、清除自由基和去除对脂质氧化有催化作用的金属离子的能力 ,可望进一步
开发成为新型天然抗氧化及自由基清除剂 。由此推论 ,主要成分为棓酰化的聚原翠雀定-聚原花青定
混合物(3∶1)[ 3]的余甘子(Phylanthusemblica)树皮提取物也应具有强生物活性功能 ,作者目前正在开
展相关研究 。
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