全 文 ：中国药房 2015年第26卷第6期 China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 6
低了磷酸用量，分别考察了甲醇-磷酸水溶液、乙腈-磷酸水溶
液等流动相体系，经过优化对比后采用0.1％磷酸水溶液-甲醇
作为流动相获得了良好的分离效果，峰纯度经液相色谱-串联
质谱（LC-MS/MS）检验为单一峰[12]。
目前，莽草酸主要是从中药八角茴香中提取，其莽草酸含
量最高达 9.88％～10.91％ [13]，但八角茴香价格十分昂贵。而
雪松的松针和嫩枝易得，再生速度快，且可持续利用。由本研
究结果可知，雪松的松针和嫩枝所含的莽草酸较高，具有较高
的开发价值。
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（收稿日期：2014-06-10 修回日期：2014-09-13）
（编辑：孙 冰）
Δ基金项目：贵州省科技计划课题（No.黔科合SY字〔2011〕3086）
＊硕士研究生。研究方向：天然药物化学。E-mail：527795639
@qq.com
# 通信作者：教授，博士。研究方向：天然药物化学。E-mail：
cchen_qing@sina.com
UV法测定贵州产香薷和野草香药材中总黄酮的含量Δ
高 健＊，王 静，陈 青 #（贵州大学化学与化工学院化学系，贵阳 550025）
中图分类号 R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2015）06-0805-03
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2015.06.29
摘 要 目的：建立测定贵州产香薷和野草香药材中总黄酮的含量测定方法。方法：采用紫外-可见分光光度法，以芦丁为对照
品，在482 nm波长处对两种香薷属植物中的总黄酮进行含量测定。结果：芦丁的质量浓度在0.02～0.1 mg/ml范围内与吸光度值
呈良好的线性关系；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2％；平均加样回收率为97.55％，RSD为0.66％（n＝6）。香薷和野草香
的花、茎叶及根中总黄酮的含量分别为0.704、0.438、0.247 mg/g和0.901、0.476、0.352 mg/g。结论：该方法操作简便、准确，重复性
和稳定性良好，适用于香薷属植物总黄酮的含量测定。
关键词 香薷；野草香；总黄酮；提取；紫外-可见分光光度法；含量测定
Determination of Total Flavonoids Contents in Elsholtzia ciliata and cypriani Produced in Guizhou by UV
GAO Jian，WANG Jing，CHEN Qing（Dept. of Chemistry，College of Chemistry and Chemical Engineering，Gui-
zhou University，Guiyang 550025，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish a method for the determination of total flavonoids content in Elsholtzia ciliata and
Elsholtzia cypriani produced in Guizhou. METHODS：The total flavonoids contents in two Elsholtzia plants were determined by UV
at 482 nm with the reference of rutinum. RESULTS：The concentration of rutinum had a good linear relationship with absorbance
in the range of 0.02-0.1 mg/ml. The RSDs of precision，stability and repeatability test were less than 2％；the average sample recov-
ery were 97.55％，RSD were 0.66％（n＝6）.The contents of total flavonoids in the flowers，stem leaf and root of E. ciliata and E.
cypriani were 0.704，0.438，0.247 mg/g and 0.901，0.476，0.352 mg/g. CONCLUSIONS：This method is simple and accurate and
has good repeatability and stability. It is applicable for the determination of total flavonoids contents in Elsholtzia plants.
KEYWORDS Elsholtzia ciliata；Elsholtzia cypriani；Total flavonoids；Extract；UV；Content determination
􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛􀤛
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China Pharmacy 2015 Vol. 26 No. 6 中国药房 2015年第26卷第6期
香薷Elsholtzia ciliata为香薷属多年生草本植物，常生于
山坡、林内、路旁及沙滩河岸边。香薷全草可作药用，性味辛、
微温，具有发汗解暑、行水散湿、温胃调中之功效，主治夏月感
寒饮冷、头痛发热、恶寒无汗、胸痞腹痛、呕吐腹泻、水肿、脚气
等症[1]。据文献报道，香薷中主要含有 5-羟基-7，4′-二甲氧基
双氢黄酮、5-羟基-6，7-二甲氧基双氢黄酮及美五针松双氢黄
酮等黄酮类化合物 [2]，但关于其生物活性的研究甚少。野草
香E. cypriani也为香薷属植物，分布于云南、贵州等地 [3]。野
草香具有清热解毒、解表等功效，可用于治疗感冒、疔疮、鼻
渊、喉鹅等；其花果提取的挥发油——木姜花油有特殊的清香
气，民间常作为食品香料，关于其化学成分的文献报道仅见挥
发油[4]。挥发油和黄酮通常被认为是香薷属植物药理作用的
物质基础 [5]。香薷属植物具有的消炎、止痛作用，主要是由
黄酮类化合物和挥发油中的苯甲醇、芳樟醇等所产生 [6-7]。
此外，黄酮类化合物作为一种功能成分，还具有其他许多有益
的生物学活性，如治疗心脑血管系统、消化系统呼吸系统疾病
及抗癌、抗病毒、抗菌、提高机体免疫力、消除自由基、抗氧化、
抗衰老等作用[8-9]。贵州省香薷及野草香资源丰富，目前对两
种植物的黄酮类化学成分及生物活性的研究尚不充分。为
此，笔者参考相关文献[10-15]，采用紫外-可见分光光度（UV）法对
香薷属植物中的总黄酮进行了含量测定，以期为进一步开发
利用香薷和野草香资源提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器
WFZ UV-2000型 UV计（上海尤尼柯仪器有限公司）；
TP-114型电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；
FZ102型微型植物试样粉碎机（北京市永明医疗仪器厂）。
1.2 试剂
芦丁对照品（上海晶纯生化科技股份有限公司，批号：
B1411073，纯度＞98％）；试剂均为分析纯。
1.3 药材
香薷与野草香均于2013年10月采集于贵州省贵阳地区，
经贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为香薷E. ciliata和野草香E.
cypriani。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品10.0 mg，置于50 ml量瓶中，加65％
的甲醇适量，振摇，并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为 0.2
mg/ml的对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备
精密称取样品粉末3.0 g，置于圆底烧瓶中，加入65％甲醇
50 ml，加热回流提取60 min，减压浓缩后滤过，置于50 ml量瓶
中，用少量 65％甲醇洗涤圆底烧瓶，洗液合并至量瓶中，加
65％甲醇定容至刻度，摇匀，即得。
2.3 最大吸收峰的确定
精密吸取“2.1”项下芦丁对照品溶液1.0 ml，置于10 ml量
瓶中，加65％甲醇至5 ml处，摇匀；精密加入5％亚硝酸钠溶液
0.3 ml，摇匀，放置 6 min；精密加入 10％硝酸铝溶液 0.3 ml，摇
匀，放置 6 min；精密加入 4％氢氧化钠溶液 4 ml，再加 65％甲
醇定容至刻度，摇匀，即得。另取芦丁对照品溶液1.0 ml，置于
10 ml量瓶中，加 65％甲醇稀释至刻度，作为空白对照溶液。
将两种溶液于 400～600 nm波长范围内进行扫描，结果在 482
nm波长处有最大吸收。
2.4 提取方法的选择
2.4.1 提取溶剂的选择 精密称取香薷花粉末 3.0 g，置于圆
底烧瓶中，加入 35 ml甲醇，多次提取至溶剂无色，减压浓缩，
滤过，滤液转移至 50 ml量瓶中，用少量甲醇多次洗涤圆底烧
瓶，洗液合并至量瓶中，加甲醇定容。精密吸取上述溶液各
0.2 ml，分别置于10 ml量瓶中，用移液管移取4.8 ml甲醇加至
5 ml，摇匀；精密加入 5％亚硝酸钠溶液 0.3 ml，摇匀，放置 6
min；精密加入 10％硝酸铝溶液 0.3 ml，摇匀，放置 6 min；再加
入 4％氢氧化钠溶液 4 ml，加甲醇稀释至刻度，摇匀。采用同
样的方法，将提取溶剂分别换成 50％、65％、80％的甲醇和无
水乙醇。分别在482 nm波长处测定其吸光度值，结果见表1。
由表 1可见，65％甲醇提取效率较高，因此本研究最终选择了
65％甲醇作为提取溶剂。
表1 不同提取溶剂对吸光度值的影响
Tab 1 Effect of different extraction solvent on the absor-
bance
吸光度
A1
A2
A3
50％甲醇
0.610
0.614
0.605
65％甲醇
0.626
0.635
0.641
80％甲醇
0.505
0.532
0.524
乙醇
0.430
0.423
0.419
2.4.2 溶剂用量的选择 精密称取香薷花粉末 3.0 g，共 3份，
置于圆底烧瓶中，分别加入 25、50、75 ml 65％甲醇，多次回流
至溶剂无色，减压浓缩，滤过，滤液转移至 50 ml量瓶中，用少
量溶剂洗涤圆底烧瓶，洗液合并至量瓶中，加 65％甲醇定容。
精密吸取上述 3种溶液各 0.2 ml，分别置于 10 ml量瓶中，在
482 nm波长处测定其吸光度值，结果见表2。由表2可见，50、
75 ml 65％甲醇提取效率较高，考虑到节约溶剂用量，本研究
最终将提取溶剂用量定为50 ml。
表2 不同溶剂用量对吸光度值的影响
Tab 2 Effect of different solvent dosage on the absorbance
溶剂用量，ml
25
50
75
称样量，g
3.000 6
3.000 7
3.000 8
吸光度
0.581
0.654
0.656
2.4.3 提取时间的选择 精密称取4份香薷花粉末各3.0 g，置
于圆底烧瓶中，加入65％甲醇50 ml，分别加热回流20、40、60、
80 min，滤过，滤液转移至50 ml量瓶中，用少量65％甲醇洗涤
圆底烧瓶，洗液合并至量瓶中，加65％甲醇定容。精密吸取上
述4种溶液各0.2 ml，分别置于10 ml量瓶中，在482 nm波长处
测定吸光度值，结果见表3。由表3可见，提取60 min时提取效
果较好。
2.5 线性关系考察
精密吸取“2.1”项下对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，分
别置于 10 ml量瓶中，加 65％甲醇至 5 ml处，摇匀；精密加入
5％亚硝酸钠溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min；精密加入10％硝酸
铝溶液 0.3 ml，摇匀，放置 6 min；精密加入 4％氢氧化钠溶液 4
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ml，再加 65％甲醇溶液定容，摇匀。以相应试剂为空白，采用
UV法，在482 nm波长处测定吸光度值。以对照品的质量浓度
为横坐标（x，mg/ml）、吸光度值为纵坐标（y），进行线性回归，
得回归方程 y＝1.598x－0.001 4（r＝0.999 7）。结果表明，芦丁
质量浓度在0.02～0.1 mg/ml范围内与吸光度值呈良好的线性
关系。
2.6 精密度试验
精密量取“2.1”项下芦丁对照品溶液适量，分别配制成质
量浓度为 0.02、0.06、0.1 mg/ml的溶液，在 482 nm波长处测定
吸光度值，连续6次。结果，RSD分别为2.05％、1.91％、1.85％
（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.7 稳定性试验
取“2.2”项下供试品溶液各适量，分别于配制 0、1.0、2.0、
3.0、4.0、5.0 h时在482 nm波长处测定吸光度值，重复6次。结
果，RSD分别为香薷花 1.04％、茎叶 1.03％、根 1.04％，野草香
花 1.03％、茎叶 1.04％、根 1.04％，表明供试品溶液在 5 h内稳
定性良好。
2.8 重复性试验
分别精密称取香薷和野草香的花、茎叶和根的粉末各 3.0
g，各6份，置于圆底烧瓶中，加入65％甲醇50 ml，加热回流60
min，滤过，置于 50 ml量瓶中，加 65％甲醇定容。精密吸取提
取液各 0.2 ml，置于 10 ml量瓶中，在 482 nm波长处测定吸光
度值。结果，RSD分别为香薷花 1.02％、茎叶 1.04％、根
1.01％，野草香1.05％、茎叶1.03％、根1.01％，表明该方法重复
性良好。
2.9 加样回收率试验
精密称取已知含量（0.700 mg/g）的香薷花粉末 1 g，共 6
份，分别精密加入质量浓度为0.13 mg/ml的芦丁对照品溶液5
ml，挥干溶剂，按“2.2”项下方法制备供试品溶液。以相应试剂
为空白，在 482 nm波长处测定吸光度值，计算加样回收率，结
果见表4。
表4 加样回收率试验结果（n＝6）
Tab 4 Results of sample recovery test（n＝6）
称样量，g
1.002 7
1.004 1
1.002 3
1.003 5
1.007 3
1.006 4
样品含
量，mg
0.701 9
0.702 9
0.701 6
0.702 5
0.705 1
0.704 5
加入量，
mg
0.65
0.65
0.65
0.65
0.65
0.65
测得
量，mg
1.333 2
1.330 4
1.339 3
1.335 3
1.341 6
1.343 1
加样回收
率，％
97.12
96.54
98.11
97.35
97.92
98.25
平均加样回
收率，％
97.55
RSD，
％
0.66
2.10 样品含量测定
精密称取香薷和野草香的花、茎叶和根粉末各 3.0 g，按
“2.2”项下方法制备供试品溶液。以相应试剂为空白，在 482
nm波长处测定吸光度值，计算样品含量，结果见表5。
表5 样品含量测定结果（mg/g）
Tab 5 Results of content determination of sample（mg/g）
样品
花
茎叶
根
香薷
0.704
0.438
0.247
野草香
0.901
0.476
0.352
3 讨论
本研究结果表明，两种香薷属植物的花、茎叶和根中都含
有一定量的黄酮类化合物，两种植物中花的总黄酮含量较高，
根中的总黄酮含量较低；此外，野草香不同部位的总黄酮含量
均比香薷相应部位的要高。香薷和野草香均可作为提取黄酮
类化合物的来源。本研究建立的方法操作简便、准确，重复性
和稳定性良好，适用于香薷属植物总黄酮的含量测定。
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（收稿日期：2014-05-16 修回日期：2014-08-26）
（编辑：孙 冰）
表3 不同提取时间对吸光度值的影响
Tab 3 Effect of different extract time on the absorbance
提取时间，min
20
40
60
80
称样量，g
3.000 7
3.000 6
3.000 7
3.000 4
吸光度
0.619
0.631
0.659
0.658
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