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陌上菜提取物对A549肺癌小鼠移植瘤影响的实验研究



全 文 :中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2012;3(4)·30·
陌上菜Lindernia procumbens(Krock.) Phileox又称
母草,属于玄参科母草属一年生草本植物,主要分
布于东北、华东、中南及西南等地[1~2]。传统中医将
由陌上菜组成的方剂用于抗炎、消肿、止痛。民间
中医用该药组成方剂治疗肝癌、肺癌、淋巴瘤显示
了较好疗效。基于目前对陌上菜在癌症治疗研究方
面还是空白,本课题组对陌上菜开展了抗肿瘤作用
药效学研究,为临床用药提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1 .1 试验药物 陌上菜由本院生药所研究员舒
光明采集并鉴定;注射用盐酸柔比多星(阿霉素
ADM),规格,100mg/瓶,批号,0710E1,国药准
字,H44024359,由深圳万乐药业有限公司提供。
1.1.2 实验动物 BALB/c-nu小鼠,SPF级,体重
15~22g,♀,由四川大学实验动物中心提供,合格
证号: SCXK(川)-9-2006。
1.1.3 细胞株 A549肺癌细胞株由四川大学华西科
技园免疫移植实验室提供,贴壁生长于含10%小
牛血清、100U�mL-1青霉素、100 μg�mL-1链霉素的
RPMI-1640培养基中,于37℃、5% CO2的饱和湿度
孵箱中培养,每2~3 d换液传代一次。
1.1.4 仪器 倒置显微镜,Olympus CX41,JA1003型
电子天平,上海郎平仪器仪表有限公司;JY1201D
型电子天平,上海海康电子仪器厂;游标卡尺
(0~150 mm),上海恒量量具有限公司。
1.2 方法[ 3~5]
1.2.1 试验药物制备 陌上菜干燥粉碎成粗粉用75%
的乙醇浸泡1 h,水浴加热回流提取3 h过滤,滤液回
收乙醇至无醇味,与药渣混合用水煎煮2 h过滤,将
滤液浓缩成浸膏即得陌上菜提取物(BSC)。
1.2.2 陌上菜提取物对A549肺癌BALB/c-nu小鼠移
植瘤的影响 将处于对数生长期的A549肺癌细胞
用0.25%的胰蛋白酶消化脱壁后,终止消化,加入
RPMI-1640培养液,吹打细胞制成悬液,1000rpm
离心5 min,Hank’s液洗涤2次,用台盼蓝染色法计
数活细胞数。将细胞接种于BALB/c-nu小鼠左前腋
窝皮下0.2 mL/只(约含细胞数1×107个),待肿瘤
长大1cm×1cm×1cm时作为种鼠供实验用。无菌剥离
种鼠肿瘤,用Hanks液冲洗3次,清除血污、脂肪及
坏死组织,将肿瘤剪切成1mm×1mm×1mm碎块,
潘嘉,刘洁,于娅,何光星,陈幸
[摘要] 目的:探讨陌上菜(BSC)提取物对A549肺癌小鼠移植瘤的影响。方法:建立A549肺癌小鼠移植瘤模型,
观察BSC对A549肺癌小鼠移植性肿瘤的体积、瘤重、抑瘤率、体重的影响。结果:BSC对A549肺癌的生长有明显抑制作
用,抑瘤率大于40%;与阴性组比较,对A549肺癌BALB/c-nu小鼠体重无任何影响。结论:BSC可抑制A549肺癌的生长。
[关键词] 陌上菜;A549肺癌
[中图分类号] R 285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-926X(2012)04-010-02
Experimental study of extractions of Lindernia procumbens (Krock.) Phileox on A549 lung cancer mice transplantable
tumor /PAN Jia, LIU Jie, YU Ya,HE Guang-xin,CHEN Xing //(Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences,Chengdu 610041)
[Abstract] Objective: To explore the effects of BSC on A549 lung cancer transplantable tumor in model animals. Method:
A549 lung cancer mouse xenograft model was established and the infl uence of BSC on A549 lung cancer in mice transplanted
tumor volume, tumor weight, inhibition rate, body weight were observed. Result: BSC could inhibit the growth of A549 lung
cancer signifi cantly, and the inhibition rate was over 40%. No statistical difference on body weight of A549 lung cancer BALB/c-nu
mice was found between extractions and control. Conclusion: BSC can inhibt the growth of A549 lung cancer.
[Key words] Lindernia procumbens (Krock.) Phileox;A549 lung cancer
陌上菜提取物对A549肺癌小鼠移植瘤影响的实验研究
·药理毒理·
[基金项目] 四川省中医药管理局基本科研业务专项课题
(A-2008N-19)
[作者单位] 四川省中医药科学院,四川 成都 610041
[作者简介] 潘嘉 ,女,副研究员,主要从事中药药理与毒理
研究 Tel:13981876566 Email:panjia028@163.com
[收稿日期] 2012-5-12
中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2012;3(4) ·31·
Hanks液冲洗2次,按比例加入0.9%氯化钠溶液(1
g∶3 mL),再在玻璃匀浆器内研磨,经80~100目
筛网过滤制成单细胞悬液, 用台盼蓝染色法计数活
细胞数并调整细胞浓度(5×106 个/mL)。将制备好
的单细胞悬液接种于BALB/c-nu小鼠左前腋窝皮下
0.2 mL个/只(约含细胞数1×106个)并随机分组,每
组10只。陌上菜提取物(BSC)高、中、低剂量组
(相当于原生药6、3、1.5 g�kg-1)、阳性药(ADM
2 mg�kg-1)、阴性组。于接种后第二日开始灌胃(ig)
给药,ADM组采用静脉(iv)给药,容量为0.2 mL�
10 g-1,阴性组给予等量生理盐水。除阳性组连续给
药5 d,其余各组连续给药10 d。于接种后第6 d开始
测量肿瘤体积(V=0.5×移植瘤长径L×移植瘤最短径
W2),间日一次,绘制肿瘤体积生长曲线,并每周
称重2次。待阴性组平均肿瘤体积约为0.5 cm3,将动
物脱颈椎处死,剖取肿瘤称重并计算抑瘤率。
2 结果
同一时间点,阴性组平均瘤体积均处于各药物
组的上方,表明各药物组的肿瘤体积小于阴性组,
见图1。BSC各剂量可明显抑制A549肺癌细胞的生
长,其瘤体积曲线均在阴性组下方,剂量从低到
高抑瘤率均大于40%;从体积曲线和抑瘤率可知,
BSC对肿瘤细胞的抑制作用无量效关系;和阴性组
比较,阳性药ADM对荷瘤小鼠的体重有明显降低作
用,而BSC却对此无影响,见表1。

图1 BSC对A549肺癌BALB/c-nu小鼠移植性肿瘤体积的影响
Fig 1 Effects of BSC on tumor volumn of A549 lung carcinoma
3 讨论
本实验结果显示陌上菜提取物(BSC)对A549
肺癌的生长有明显抑制作用,抑制率大于40%,
但其抑制作用无量效关系。考察对荷瘤小鼠体重
的影响显示,BSC对BALB/c-nu小鼠体重无影响
(P>0.05),阳性药ADM对体重却有明显的降低作
用。试验期间观察到,BSC高剂量组动物在给药后2
h个别出现拉稀症状,于次日症状消失,除此之外未
发现小鼠任何异常情况。而ADM组小鼠在连续给药
4 d出现食欲降低、体重下降(表1)、精神不振以及
死亡等症状。表明陌上菜提取物在抑制肿瘤的同时
未呈现出类同于阳性组对动物的毒副作用。
表1 BSC对A549肺癌BALB/c-nu小鼠移植性肿瘤的影响(x±s)
Table 1 Effects of BSC on BALB/c-nu mice A549 lung carcinoma tumor weight and inhibitory rate (x±s)
组别 剂量 体重 瘤重 抑制率
(g�kg-1) 给药前 给药后 (g) %
BSC 6 17.58±1.53 20.51±1.53 1.215±0.355** 40.75
BSC 3 17.22±2.06 19.47±1.41 1.079±0.395** 47.39
BSC 1.5 16.58±1.02 19.36±0.94 1.225±0.56** 40.23
ADM 0.002 17.4±0.80 14.78±1.29** 0.730±0.255** 64.38
阴性组 / 17.28±0.99 19.91±1.79 2.05±0.712 —
注:与阴性组比较,**P<0.01
Note:compared with the control, **P<0.01
植物来源的抗肿瘤药物在化学结构方面具有多
样性,同时在作用机制方面也具有多样性。从植物
中寻找作用于各种靶点的抗肿瘤活性物质有巨大
的潜力,寻找这一类植物药成为抗肿瘤药研究热点
[6~7]。由陌上菜组成的方剂目前在临床用于治疗淋巴
瘤、肝癌、肺癌、食管癌有较好的疗效,早期的肿
瘤患者用药后对缩小肿瘤体积,防止肿瘤的扩散恶
化有明显疗效;对中晚期肿瘤患者,用药后对于减
轻由于疾病带来的各种临床症状,改善患者的生活
质量,延长生命周期均有很好的疗效。目前对陌上
菜的研究还处于基础研究阶段,还需我们做进一步
的研究探索其能否对抗更多肿瘤,以及陌上菜的抗
肿瘤作用机制和有效成分的研究等。
[参考文献]
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(责任编辑:陈思敏)