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红药提取物对小鼠镇痛作用的研究



全 文 :·研究论文 ·
[ 基金项目] 国家民委基金资助项目(编号:05ZY08);中央民族大学 985资助项目(编号:cun985-3-3);国家自然科学基金资助项目(编号:
30600849) [ 作者简介] 覃筱燕 ,女 ,副教授 ,硕士生导师 ,电话:010-88413262 , E-mail:bjqin xiaoyan@yah oo.com.cn
红药提取物对小鼠镇痛作用的研究
覃筱燕 ,唐丽 ,云妙英 ,严莉 ,蓝蓉 (中央民族大学生命与环境科学学院 ,北京 100081)
[ 摘要]  目的:观察红药提取物的镇痛作用 , 为临床用药提供实验依据。方法:采用热板法 、小鼠扭体法观察红药提取物的镇
痛作用。结果:在 55 ℃热板实验中 , 红药的乙醇提取物和红药的乙醇提取物的正丁醇部位可明显提高小鼠的痛阈 , 并且对腹
腔注射醋酸引起的疼痛反应有显著的抑制作用 ,使小鼠扭体反应次数明显减少。结论:红药的乙醇提取物和红药的乙醇提取
物的正丁醇部位具有显著的镇痛作用。
[ 关键词]  红药提取物;镇痛作用;小鼠
[中图分类号] R96  [ 文献标识码] A  [ 文章编号] 1001-5213(2008)13-1051-02
Study on the analgesic effect of extract of Chirita longgangensis var.hongyao in mice
QIN Xiao-yan , TANG Li , YUN M iao-ying ,YAN Li , LAN Rong(Co lleg e of Life & Environmental Science , Cen-
tral Univ ersity fo r Nationalities , Beijing 100081 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investig ate the analg esic effect of Chirita longgangensis var.hongyao ex tr act to pr ovide experi-
mental basis fo r clinical medication.METHODS Ho t plate te st , writhing in mice was observed after the ext ract o f Chirita
longgangensis var.hongyao w as g iv en and analgesic effect of the ex tract of Chirita longgangensis va r.hongyao w as present.
RESULTS During the ho t plate test with 55 ℃, the ethano l ex tract o f Chirita longgangensis var.hongyao , and ethano l ex-
tract of butanol site could increase the pain thresho ld in mice , and inhibite intr aperitoneal injection of acetic acid-induced pain
response , decr ease w rithing frequency significantly.CONCLUSION  The ethano l ex tract o f Chirita long gangensis var.
hongyao and the butanol ext ract of the ethano l ex tract have significant analgesic effect.
KEY WORDS:ex tract of Chirita longgangensis va r.hongyao;analg esic effect;mice
  红药是苦苣苔科唇柱苣苔属植物红药(Chirita
longgangensis W.T.Wang var.hongyao S.Z.Huang)
的全草 ,为壮医常用药材。本种系我国特有 ,主产广
西西南部。全草入药 ,微甘 ,涩 ,平 ,具有温补养血 、消
肿止痛 、活血补血的功效 ,临床多用于月经不调 、身体
虚弱 、贫血及跌打骨折[ 1-2] 。经检索尚未见关于红药
的药理作用的报道。因此本课题选择红药为研究对
象 ,根据该药材的临床功效 ,拟对其在镇痛药理作用
方面进行初步的实验性研究 ,以期为进一步筛选其镇
痛作用的活性部位及活性成分提供依据 ,为红药的临
床开发应用 ,质量控制提供科学依据。
1 材料和方法
1.1 实验药物及其制备
1.1.1 来源及鉴定 红药采自于广西南宁市武鸣
县甘圩乡石灰岩山上 ,由广西中医院李飞主任医生
鉴定为苦苣苔科唇柱苣苔属植物红药的茎。
1.1.2 提取 取干燥的红药粗粉1.9 kg , 6倍量乙
醇加热回流提取 4次 ,每次 4 h。滤过 ,滤液浓缩 ,得
初膏约 300 g 。拌柱层析硅胶 ,上硅胶柱(100 ~ 200
目),依次用醋酸乙酯 、正丁醇和甲醇洗脱 ,各部分所
得浸膏依次为25.5 ,110 ,100 g 。
1.2 实验动物 昆明种小鼠 ,雌性 ,体质量(20±2)
g ,由北京大学医学部动物研究中心提供 ,普通鼠料
常规喂养 。
1.3 主要仪器及试剂 旋转蒸发仪(上海振捷实验设
备有限公司);乙醇 、醋酸乙酯 、正丁醇和甲醇均为分析
醇(北京化学试剂公司);阿司匹林(湖南南光药业有限
公司 ,用纯化水配制成 10 g·L-1);延胡索乙素(上海君
创生物科技有限公司 ,用纯化水制成 3 g·L-1)。
本实验室提取物:1 号药物为红药的乙醇提取
物;2号药物为红药的乙醇提取物的甲醇部位;3号
药物为红药的乙醇提取物的醋酸乙酯部位;4号药
物为红药的乙醇提取物的正丁醇部位 。根据镇痛的
有效剂量不同 , 4 种药物用纯化水配制成的质量浓
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度分别为 46 ,1.8 ,3.8 ,7.5 g·L-1 。
1.4 实验方法
1.4.1 小鼠热板法[ 3]  将恒温水浴箱加热到(55±
0.5)℃,铝锅的底部接触水面 ,加热后作为热刺激
源 ,以舔后足作为“疼痛”反应指标。将筛选出的合
格雌性小鼠[体质量(20±2)g ,痛阈值在 5 ~ 30 s之
间]随机分为 6 组 ,每组 10 只 ,分别灌胃生理盐水
(空白对照组)、延胡索乙素水溶液(阳性对照组 ,
0.2 mL/10 g ,每毫升溶液含延胡索乙素0.3 g)、1 ,
2 ,3 , 4 号药物 0.2 mL/10 g 。测定给药后 30 , 60 ,
120 min痛阈值。
1.4.2 小鼠扭体法[ 3]  小鼠 60只 , ♀,体质量20 g
左右 ,随机分为 6组 ,每组 10 只:空白对照组以生理
盐水按0.4 mL/只 ,qd ,连续 5 d;药物组分 4组:1 ,2 ,
3 ,4号药物按0.4 mL/只 ,qd ,连续 5 d;阳性对照组用
阿司匹林溶液(10 g·L-1)0.4 mL/只。末次给药后 30
min ,逐只腹腔注射0.6%醋酸0.1 mL/10 g(体质量),
观察注射后小鼠出现第 1次扭体反应的时间及 15
min内的扭体次数 ,并进行组间统计学处理。
2 结果
2.1 小鼠热板法测定小鼠的痛阈值 用秒表记录
自投入热板至出现舔后足的潜伏期时间(s)作为该
鼠的痛阈值。
表 1 小鼠痛阈值的变化( x±s , n=10)
Tab 1 Change of mouse pain thr esho ld( x ±s , n=10)
组别 给药前 给药后痛阈值
30 min 60 min 120 min
空白对照组 19.9±1.7 23.5±1.4 23.3±1.5 20.5±1.3
阳性对照组 20.0±2.0 38.0±1.5ac 52.3±3.2ac 42.4±2.5ac
1号药物 20.4±2.3 39.5±2.9ac 53.3±2.7ac 45.6±3.1ac
2号药物 20.8±1.9 23.2±1.9 22.0±2.0 20.4±1.9
3号药物 19.5±2.2 24.2±2.0 23.2±1.9 20.2±2.2
4号药物 20.4±2.1 38.8±2.2bc 51.3±3.2ac 44.0±2.8ac
注:与空白对照组比较 , aP <0.01 , bP <0.05;与给药前比较 , c P <
0.01
  由表 1可知 ,延胡索乙素 、1号药物 、4号药物与
给药前和空白对照组相比较 ,能显著地提高小鼠痛
阈值(P <0.01),而 2号药物和 3 号药物在提高小
鼠痛阈值方面无影响 ,与空白对照组相比差异无显
著性(P>0.05)。结果表明:1号药物和 4号药物可
明显提高小鼠痛阈 ,并维持 2 h以上 ,对热致痛具有
显著拮抗作用。
2.2 小鼠扭体法测定红药的镇痛效果 见表 2。
  由表 2可知 ,1号药物 、4 号药物和阿司匹林组
与空白对照组相比较 ,能显著性地提高醋酸所致小
鼠第 1次扭体反应潜伏期和显著性减少醋酸所致小
鼠 15 min内的扭体次数(P <0.01),而 2 号药物和
3号药物组可不同程度地减少醋酸所致小鼠扭体次
数 ,但与空白对照组相比较差异无显著性(P >
0.05)。结果表明:1号药物和 4 号药物对醋酸诱发
小鼠疼痛具有明显抑制作用 。
表 2 药物对小鼠扭体反应的影响( x±s , n=10)
Tab 2 The inf luence of medicine on the body response of
mouse( x±s , n=10)
组别 质量浓度/ g·L-1
第 1次扭体反应潜伏期
/min
15 min内扭体
/次数
空白对照组 - 2.5±0.4 33.3±2.4
1号药物 46 4.0±1.6a 12.2±8.7a
2号药物 1.8 2.8±0.8 28.7±4.2
3号药物 3.8 2.9±1.0 29.3±6.9
4号药物 7.5 3.9±1.3a 15.2±7.2a
阳性对照组 10 4.1±1.4a 9.8±6.8a
注:与空白对照组比较 , aP<0.01
3 讨论
本研究采用镇痛药理实验常用的热板法和小鼠
扭体法两种疼痛模型对红药乙醇提取物和经柱层析
后各种部位药物的镇痛活性进行了比较性研究 。前
期先用乙醇提取红药得到红药的乙醇提取物(1号
药物),拌柱层析硅胶 ,上硅胶柱(100 ~ 200 目),再
分别用醋酸乙酯 、正丁醇和甲醇洗脱 ,得到 3种洗脱
液 ,分别为红药的乙醇提取物的甲醇部位(2 号药
物)、红药的乙醇提取物的醋酸乙酯部位(3 号药
物)、红药的乙醇提取物的正丁醇部位(4号药物)。
从实验结果来看 , 1号药物和 4号药物能显著性地
提高小鼠痛阈 、显著性地提高醋酸所致小鼠第 1次
扭体反应潜伏期和减少醋酸所致小鼠 15 min 内的
扭体次数 ,说明了 1号药物和 4号药物对热致痛和
醋酸诱发小鼠疼痛具有显著拮抗作用 ,进一步说明
了红药具有消肿止痛的临床治疗功效 。其中 1号药
物为红药的乙醇提取物 , 4号药物为红药的乙醇提
取物的正丁醇部位 ,由此可见 , 4号药物与红药的乙
醇提取物作用相似 。这样可以推断出 4号药物即红
药的乙醇提取物的正丁醇部位为红药止痛的有效部
位 ,因而可以探索用 4号药物来代替全药的作用。
综上所述 ,红药有显著的镇痛作用 ,其镇痛作用的活
性成分存在于红药的乙醇提取物的正丁醇部位 ,这为
进一步提取分离红药的镇痛活性部位或成分提供了
实验依据 ,其镇痛作用活性成分正在进一步研究中。
参考文献:
[ 1]  中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(69)[ M] .北
京:科学出版社 , 1990:125-581.
[ 2]  奇岭 ,罗达尚.中国少数民族传统医药大系[ M] .赤峰:内蒙古
科学技术出版社 ,2000:532.
[ 3]  徐叔云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学[ M] .3版.北京:人民
卫生出版社 , 2002:882-887.
[收稿日期] 2007-06-25
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