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星宿菜提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用



全 文 :China Licensed Pharmacist Feb.2013,Vol.10 No.2
合理用药 呵护公众健康
星宿菜(Lysimachia fortuner Maxim.)为报春花
科珍珠菜属植物,又名红根草、红丝毛根,假辣蓼
等 ,以全株入药 ,可清热利湿 、凉血活血 、解毒消
肿,富含黄酮类化合物[1-2]。 作为广西民间常用药
作者简介:陆海鹏,男,主管药师。研究方向:药事管理、药物制剂。通讯作者E-mail:luhaipeng.nanning@gmail.com
星宿菜提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用
陆海鹏 1 陆翠林 2 付远清 3
(1广西民族医院药学部,广西 南宁530001;2广西中医药大学附属瑞康医院,530011;
3北海市卫生学校附属医院药剂科,广西 北海536100)
【摘要】 目的:观察星宿菜水提取物及醇提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:105只小鼠随机分为正常组、
模型组、联苯双酯组、星宿菜水提取物高剂量组、星宿菜水提取物低剂量组、星宿菜醇提取物高剂量组、星宿菜醇提取
物低剂量组,每组15只。小鼠尾静脉注射卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤模型。连续给药12d后,
测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙
二醛(MDA)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果:与模型组相比,星宿菜提取物可显著降低免疫性肝损伤模
型小鼠血清中ALT、AST活性、肝组织MDA含量,升高肝组织SOD、GSH-Px活性(P<0.05);高剂量组效果优于低剂
量组(P<0.05);星宿菜醇提取物效果最佳。结论:星宿菜提取物对小鼠免疫性肝损伤具有保护作用,其机制与抗脂质
过氧化有关。
【关键词】 星宿菜;水提取物;乙醇提取物;免疫性肝损伤
doi:10.3969/j.issn.1672-5433.2013.02.007
Protective Effects of Lysimachia Fortuner Maxim. Extract on Immunological Hepatic Injury in Mice
LuHaipeng1,LuCuilin2,FuYuanqing3(1PharmacyDepartmentofGuangxiNationalHospital,GuangxiNanning530001,
China; 2 Pharmacy Department of the Affiliated Ruikang Hospital of Guangxi Traditional Chinese Medical University,
530011;3PharmacyDepartmentoftheAffiliatedHospitalofBeihaiHealthSchool,GuangxiBe h i536100)
ABSTRACT Objective:TostudytheprotectiveeffectsofbothaqueousandethanolextractsofLysimachia fortuner Max-
im.onimmunologicalhepaticinjuryin mice.Methods: About105 mice were randomlydivided into normalgroup,model
group,bifendate group,high dose and low dose groups ofLysimachia fortuner Maxim. aqueous extracts,and high dose and
low dose groups ofLysimachia fortuner Maxim. ethanol extracts. An immune liver injurymodel was established via mouse
tail vein injection with BCG combined with LPS. The ALT and AST levels in mouse serum and MDA,SOD and GSH-Px
activites in hepatic homogenate were determined.Results: Lysimachia fortuner Maxim. xtracts significantlydecreased the
serumtransaminase activities and the MDA content,and prevented the SOD and GSH-Px activities in hepatic homogenate.
The effectsofhigh dose groupswere betterthan those oflowdose groupsand the ethanol extracts showed the best effects.
Conclusion: Lysimachia fortuner Maxim. extracts showed significant protective effects on immunological hepatic injury in
mice.
KEY WORDS Lysimachia fortuner Maxim.;AqueousExtract; thanolExtracts;ImmunologicalLiverInjury
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中国执业药师·
材,虽然相关文献报道较少,其抗炎作用在临床用
药治疗的实践中已经得到证实,本研究采用给小鼠
尾静脉注射卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)建立
小鼠免疫性肝损伤模型,观察星宿菜提取物对小
鼠免疫性肝损伤相关性指标的干预调节作用。
1材料
1.1实验动物
清洁级昆明种小鼠 ,体质量 (20± 2)g,雌雄
兼用,由广西医科大学实验动物中心提供,动物许
可证号:2010A036。
1.2药品与试剂
星宿菜植物采自广西防城、桂林、百色、钦州、
柳州、河池、南宁等地,经鉴定为报春花科珍珠菜
属植物星宿菜,星宿菜水提取物和乙醇提取物的样
品由我院实验室自行制备,水提取物稠膏浓度为
2.16(g生药 /mL),醇提取物稠膏浓度为 3.32(g
生药 /mL),使用时用蒸馏水稀释成相应的浓度 。
BCG(中国生物技术集团公司上海生物制品研究
所 ,批号 :2010100101);大肠杆菌 LPS(Sigma公
司 ,批号:20110210);联苯双酯(广州星群药业股
份有限公司,批号:20101201);丙氨酸氨基转移酶
(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧
化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽过氧化物
酶 (GSH-Px)试剂盒均为南京建成生物工程研究
所产品。
1.3仪器
紫外-可见分光光度计 UV-2550(日本岛津);
HD-F2600plus全自动生化分析仪(泰诺科贸公司),
JY92-2D超声波细胞粉碎机 (宁波新芝科器研究
院),TE214S型万分之一电子天平 (德国 Sartorius
公司)。
2方法
2.1动物分组
清洁级昆明种小鼠 105只,雌雄兼用,随机分
为正常组、模型组、联苯双酯组(0.6 g/kg)、星宿菜
水提取物高剂量组 (20 g/kg)、星宿菜水提取物
低剂量组 (10 g/kg)、星宿菜醇提取物高剂量组
(20 g/kg)、星宿菜醇提取物低剂量组(10 g/kg),共
7组,每组动物 15只。
2.2免疫性肝损伤动物模型的建立及处理[3-4]
造模第 1天除正常组外 ,其余各组小鼠在给
药前均由尾静脉注射 BCG溶液 0.2 mL(用生理
盐水配制 BCG溶液,使每毫升约含 108个活菌 ),
各治疗组按 0.2 mL/10 g的给药体积灌胃小鼠 ,
正常组和模型组给予等体积蒸馏水 ,每天给药 1
次 ,连续给药 12 d,给药期间动物正常饮食及饮
水。12 d后除正常组给予等体积溶媒外,各组小鼠
尾静脉注射LPS7μg/只(0.2mL)。禁食不禁水 12 h
后,摘除眼球后经眼球后静脉丛取血 ,处死小鼠,
取肝脏做相关检测。
2.4检测指标及方法
离心分离小鼠血清,按试剂盒说明用HD-F2600
plus全自动生化分析仪测定 ALT、AST。 小鼠肝脏
生理盐水漂洗后 ,称取 0.4 g,用超声波细胞粉碎
机匀浆,低温离心,制成 10%的肝组织匀浆,按试
剂盒说明测定肝匀浆中 SOD、MDA、GSH-Px活性。
2.5统计学处理
用 SPSS 13.0统计软件分析数据 ,计量资料
以 x±s 表示,组间的比较采用方差分析,两两比较
采用 LSD-t 检验,P < 0.05有统计学意义。
3结果
3.1星宿菜提取物对免疫性肝损伤小鼠血清ALT、
AST的影响
与模型组相比 ,星宿菜水提取物高 、低剂量
组,醇提取物高、低剂量组均能降低免疫性肝损伤
小鼠血清 ALT、AST活性(P < 0.05);在降低 ALT
水平方面,星宿菜醇提取物高剂量组的效果优于星
宿菜水提取物高、低剂量组、星宿菜醇提取物低剂
量组(P<0.05),效果与联苯双酯组相当(P >0.05),
星宿菜水提取物高剂量组优于低剂量组(P<0.05)。
在降低AST水平方面,星宿菜醇提取物高剂量组的
效果和星宿菜水提取物高剂量组、联苯双酯组相当
(P >0.05), 均优于星宿菜水提取物低剂量组、星
宿菜醇提取物低剂量组(P < 0.05)。 结果见表 1。
论著
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合理用药 呵护公众健康
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表 2 星宿菜提取物对小鼠肝组织匀浆 SOD、MDA、GSH-Px 的影响(x±s,n=15)
组别 剂量(g/Kg) SOD(U/mg) MDA(nmol/mg) GSH-Px(U/mg)
正常组 - 166.73±19.20 9.22±2.20 234.23±2 91
模型组 - 71.46±13.27* 22.38±4.16* 158.55±21.27*
联苯双酯组 0.6 131.59±22.58*# 12.80±2.71*# 204.26±34.22*#
星宿菜水提取物 高剂量组 20 126.36±21.96*# 15.77±3.81*#△ 188.03±21.36*#
低剂量组 10 91.82±21.24*#△◇□ 17.94±4.44*#△◇□ 178.49±35.51*#△◇□
星宿菜醇提取物 高剂量组 20 129.44±25.25*# 13.71±2.99*#◇ 196.37±24.13*#
低剂量组 10 99.12±25.24*#△◇□ 16.25±3.15*#△◇□ 186.39±28.74*#◇△
注:*与正常组比较,P <0.05;#与模型组比较,P <0.05;△与联苯双脂组比较,P<0.05;◇与星宿菜水提取物高剂量组比较,P<0.05;□与星宿菜醇
提取物高剂量组比较,P<0.05
3.2星宿菜对小鼠肝组织匀浆 SOD、MDA、GSH-Px
的影响
模型组小鼠组肝组织匀浆 MDA水平升高,同
时 SOD、GSH-Px水平降低,星宿菜提取物可以显
著降低小鼠肝组织匀浆 MDA的水平并提升SOD、
GSH- Px水平(P < 0.05)。 在提升 SOD水平方面,
星宿菜水提取物及醇提取物高剂量组均优于低剂
量组 (P < 0.05),两者效果相当 (P > 0.05),与联
苯双脂组效果相当(P > 0.05)。 在降低 MDA水平
方面, 星宿菜醇提取物高剂量组效果与联苯双脂
组效果相当(P > 0.05),优于星宿菜水提取物高、
低剂量组、星宿菜醇提取物低剂量组(P < 0.05),
而星宿菜水提取物高剂量组效果优于星宿菜水提
取物低剂量组及星宿菜醇提取物的低剂量组(P <
0.05)。在提升 GSH-Px水平方面,星宿菜醇提取物
高剂量组效果与联苯双脂组相当(P > 0.05),优于
星宿菜水提取物低剂量组及星宿菜醇提取物低剂
量组(P < 0.05),星宿菜水提取物高剂量组效果与
联苯双脂组比较,差别没有统计学意义(P > 0.05),
但效果优于星宿菜水提取物低剂量组及星宿菜醇
提取物低剂量组(P < 0.05)。 结果见表 2。
表 1 星宿菜提取物对小鼠血清 ALT、AST 的影响
(x±s,n=15)
组别
剂量
(g/Kg)
ALT(U/L) AST(U/L)
正常组 - 23.55±7.42 32.94±7.19
模型组 - 56.12±10.31* 65.51±13.78*
联苯双酯组 0.6 33.26±10.90*# 42.29±9.18*#
星宿菜水提取物 高剂量组 20 40.08±6.53*#△□ 46.49±9.62*#
低剂量组 10 46.01±11.57*#△◇□ 55.15±9.08*#△◇□
星宿菜醇提取物 高剂量组 20 32.93±11.55*# 44.33±11.24*#
低剂量组 10 42.16±13.03*#△□ 49.84±12.15*#△
注:*与正常组比较,P<0.05;#与模型组比较,P<0.05;△与联苯双脂
组比较,P<0.05;◇与星宿菜水提取物高剂量组比较,P<0.05;□与星
宿菜醇提取物高剂量组比较,P <0.05
4讨论
星宿菜作为广西民间常用药材 ,其抗炎作用
在临床实践中已经得到证实,亦常配伍用于各种
肝炎的治疗 ,提示星宿菜具有抗肝损伤作用。 本
研究通过建立小鼠免疫性肝损伤模型 ,同时给予
不同剂量星宿菜提取物预防治疗,分析星宿菜提
取物对小鼠血清ALT、AST活性及肝组织匀浆
SOD、MDA、GSH-Px水平的影响 ,旨在通过实验
证实星宿菜抗免疫性肝损伤及抗过氧化脂质作
用,为综合开发利用星宿菜资源提供数据支持。
本研究显示星宿菜水提取物及醇提取物高 、
低剂量均能降低免疫性肝损伤小鼠血清 ALT、AST
含量,降低肝脏 MDA含量 ,提高 SOD及 GSH-Px
含量,高剂量组效果总体优于低剂量组,星宿菜醇
提取物效果最优,证实星宿菜提取物对小鼠免疫
性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗脂质过
氧化及清除自由基有关[5-6]。
山柰酚及槲皮素都是星宿菜的有效成分 ,具
有抗菌、抗炎、抗病毒及镇痛等作用[7-9],付远清等[10]
建立了星宿菜中山柰酚及槲皮素含量的 HPLC测
定方法,本研究初步证实星宿菜提取物对免疫性
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合理用药 呵护公众健康
(上接第 25 页)
肝损伤具有保护作用,在相关研究[11-14]基础上,可
进一步研究星宿菜的急性毒性以及对四氯化碳 、
硫代乙酰胺等化学因素所致肝损伤动物模型的保
护作用,深入揭示其保肝护肝、抗脂质过氧化、自
由基清除模式、抗炎及免疫调节的机制。 此外,由
于星宿菜全株入药,有必要分部位筛选其治疗肝
损伤效果最好的药用部位及最佳剂量。
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究[J].云南中医中药杂志,2010,31(4):50-53.
(收稿日期 :2012-04-13)
频向患者演示特殊制剂的使用方法; 通过手机短
信、 手机中安装的用药软件及时提醒患者用药中
需要注意的事项;又如,在有条件的社区医院、药
店,还可考虑引入移动设备、触摸屏工具等实现医
患互动或患者自助查询信息。 这些形式对于提高
用药咨询质量和服务水平都能起到很好的促进
作用。
3结语
随着社会的发展和医药服务模式的转变 ,人
们对基层药品从业人员提供用药咨询服务的需
求日益增加。 目前我国基层药品从业人员在开展
用药咨询服务中仍存在诸如专业知识不足、 信息
资源缺乏、方式手段单一等问题。而规范的用药咨
询服务不仅可以指导患者合理用药,还可以减少
基层药品从业人员自身的工作风险,改善医患关
系,提高经济效益。 因此,通过系统、长期、形式多
样的岗位教育培训,使基层药品从业人员掌握基
本的药学基础知识 、药事政策法规 ;同时 ,通过
教育培训, 向基层药品从业人员介绍更多的用药
咨询服务技能和工作方法以及丰富、权威的药学
信息服务资源,不失为提高基层药品从业人员用
药咨询服务水平,改善服务质量,帮助患者合理用
药的重要对策。
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(收稿日期 :2012-12-19)
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