全 文 ：书江西农业学报 2014，26(6):56 ～ 58
Acta Agriculturae Jiangxi
云南越桔花粉活力测定与花粉保存
杨洪涛，李 燕，杨燕林，和志娇，王朝文，黄杏娥，和加卫*
收稿日期:2013 － 12 － 30
基金项目:农业部公益性行业科技项目(201103037);农业部成果转化项目(2012GB2F300414)。
作者简介:杨洪涛(1982─)，女，云南丽江人，助理研究员，主要从事小浆果方面的研究。* 通讯作者:和加卫。
(云南省农业科学院 高山经济植物研究所，云南 丽江 674100)
摘 要:用不同浓度蔗糖、硼酸对云南越桔花粉进行离体培养后统计其萌发率，结果表明: 云南越桔花粉最适宜的离体
培养基为 15%蔗糖 + 0． 1%硼酸 + 1%琼脂，花粉萌发最好，萌发率高达 78． 26%。此外，4 ℃恒温、避光条件下贮藏了不同
时间的花粉，在适宜培养基中的离体培养萌发率试验表明: 云南越桔花粉现采的活力最高，花粉的贮藏时间以不超过 1 个
月为宜。
关键词:云南越桔; 花粉; 花粉活力; 贮藏时间
中图分类号:Q944． 42 文献标志码:A 文章编号:1001 － 8581( 2014) 06 － 0056 － 03
Vitality Determination and Preservation of Pollens in Vaccinium duclouxii
YANG Hong － tao，LI Yan，YANG Yan － lin，HE Zhi － jiao，WANG Chao － wen，HUANG Xing － e，HE Jia － wei*
( Institute of Alpine Economic Plants，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Lijiang 674100，China)
Abstract: Different concentrations of sucrose and boric acid were used for the isolated culture of pollens in Vaccinium du-
clouxii，and the germination rate of the pollens in vitro was statistically analyzed． The results indicated that the optimum culture me-
dium for Vaccinium duclouxii pollens in vitro was 15% sucrose + 0． 1% boric acid + 1% agar，and the germination rate of the pol-
lens in this culture medium was the highest，reaching 78． 26% ． In addition，the isolated Vaccinium duclouxii pollens which have
been preserved under the conditions of constant temperature 4 ℃ and darkness for a different time were cultivated on suitable culture
medium，and their germination rate was tested． The experimental results showed that the fresh － collected pollens had the highest vi-
tality，and the storage time for the pollens should not be longer than one month．
Key words: Vaccinium duclouxii; Pollen; Vitality; Storage time
蓝莓属于杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vacciniace-
ae)植物［1］，又称越桔、蓝浆果，其果实富含花青苷、低
糖、低脂肪，且抗氧化能力强，是原产于北美的一种小
浆果。20 世纪 80 年代中后期引入我国，许多蓝莓研究
者对其进行了大量的引种驯化和品种适应性筛选等工
作。近 20 年来，我国的蓝莓产业发展迅速，但是由于
品种几乎都是从国外引进，引种后存在生长适应性和
品种退化的问题，因此培育适宜中国本土栽培的新品
种是推动我国蓝莓产业发展的重要途径。
我国拥有丰富的野生蓝莓植物资源，特别是云南
分布的种类约占全国的一半。云南越桔(Vaccinium du-
clouxii (Levl．)Hand． － Mazz．)又名大花乌饭树，为多
年生落叶或常绿灌木或小灌木树种，生于山坡灌丛或
山地常绿阔叶林下，是西南地区特有种，仅分布于云南
和四川［2 － 3］。与现在人工栽培的蓝莓是同科同属的植
物。目前国内外对云南越桔花粉的研究都处于空白，
由于栽培品种和云南越桔的花期间隔较长，因此可以
利用花粉贮藏进行杂交育种或解决花期不遇的问题，
对生产栽培中人工辅助授粉花粉的选择以及授粉时间
的确定提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 供试材料 2012 年 5 月采集丽江贵峰的云南越
桔的花，剥取花药，呈薄层平摊于硫酸纸盒中，置于室
内阴干 1 ～ 2 d，使其自然散粉待花粉完全散出后备用。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 花粉活力测定培养基的筛选 采用离体培养
发芽法测定花粉活力，培养基中蔗糖与硼酸浓度采用
随机区组设计，蔗糖浓度分别为 5%、10%、15%、20%，
硼酸浓度分别为 0． 01%、0． 05%、0． 10%，共 12 个处
理，每个处理 3 次重复。配制各处理培养基的过程中，
分别添加去离子水及硼酸，定容加入蔗糖、琼脂后分别
加热至透明状，倾倒于载玻片上，呈一厚 1 ～ 2 mm的均
匀薄层。待其冷却后在培养基背面用毛刷弹撒适量的
花粉，在避光、恒温 25 ℃和湿润的条件下进行培养，48
h后在显微镜下观察、记录并统计花粉萌发率，筛选出
花粉萌发率最高的培养基作为后续贮藏后花粉活力的
测定培养基配方。
1． 2． 2 花粉贮藏 将备用花粉置于密封袋内，袋内同
时加入硅胶干燥剂，放入 4 ℃的恒温、避光下贮藏，每
组处理 3 次重复，于贮藏后的 1 ～ 10 d内的每天和每隔
1 个月后定期采用 1． 2． 1 筛选出的最佳培养基进行花
粉活力测定。
1． 3 数据统计 在 40 × 10 倍光学显微镜下统计视野
内的花粉总数和发芽花粉数后，计算花粉萌发率，花粉
萌发以其花粉管长度超过花粉直径为标准。每处理观
察 6 个视野，萌发率的计算公式如下:
萌发率 /% = (萌发的花粉数 /观察花粉总数)
×100%
所得数据的差异显著性采用 DPS 11． 50 软件进行
Duncan检验进行分析。
2 结果与分析
2． 1 花粉离体培养基的筛选 当培养基中蔗糖浓度
一定时，花粉活力随添加硼酸浓度梯度的改变而呈规
律性变化，随着硼酸浓度的增加，花粉萌发率也依次增
加，且花粉萌发率在 1%和 5%水平上的差异都显著。
当培养基中硼酸浓度一定时，花粉萌发率先随蔗糖浓
度的增加而增加，到蔗糖浓度为 15%时达到最高值，而
后当蔗糖浓度为 20%时花粉萌发率又下降(表 1)。各
处理中以 15%蔗糖 +0． 1%硼酸 +1%琼脂培养基的花
粉萌发最好，萌发率高达 78． 26%，因此，可选择此培养
基用于其贮藏期间活力的测定。
表 1 不同浓度蔗糖、硼酸处理云南越桔
花粉离体萌发率比较
蔗糖浓
度 /%
硼酸浓
度 /%
花粉萌发
率 /%
差异显著水平
5% 1%
5． 00 0． 01 2． 79 i H
0． 05 18． 64 e E
0． 10 30． 46 d D
10． 00 0． 01 4． 82 h H
0． 05 15． 93 f F
0． 10 59． 12 b B
15． 00 0． 01 8． 20 g G
0． 05 18． 61 e E
0． 10 78． 26 a A
20． 00 0． 01 7． 10 g G
0． 05 17． 51 ef EF
0． 10 36． 50 c C
注:同列大、小写字母分别表示在 1%、5%水平上的差异显著性，
字母相同则不显著，不同则显著。
2． 2 贮藏时间对花粉活力的影响 由图 1 表明，花粉
萌发率随着贮藏时间的增加而下降，前 9 d的花粉萌发
率下降得比较平缓，第 10 天以后开始急速下降，到 1
个月时则降为 30． 20%，到第 9 个月时降为 0%。结果
表明，云南越桔花粉现采的活力最高;在干燥、4 ℃恒温
避光的条件下，贮藏的云南越桔花粉活力的保持时间
为 8 个月，因此花粉的贮藏时间最好不要超过 1 个月。
图 1 云南越桔花粉不同贮藏时间的萌发率
3 结论与讨论
3． 1 不同浓度蔗糖、硼酸对花粉离体萌发的影响 蔗
糖是花粉萌发的养分补给和能量来源，不同种类甚至
不同品种植物的花粉离体培养对其培养基的要求是不
同的，通过查询文献资料得知，朱顶红、扁桃、野生樱桃
李、新疆野苹果和杨树的花粉离体培养最适宜的蔗糖
浓度分别为 5%、10%、15%、15%和 20%［4 － 7］，而不同
品种的杏花粉离体培养最适宜的浓度为 2%［8］、5%、
10%［9］不等。而本试验中云南越桔的花粉离体培养最
适宜的蔗糖浓度为 15%。这可能是由于花粉萌发时细
胞壁内外渗透压适宜才能生长有关，细胞内渗透压低
于细胞外时会造成细胞内水分外渗，高于细胞外则造
成细胞过分膨胀，都不利于花粉细胞生长。而不同植
物、品种的花粉细胞中内含物含量不同，则会导致细胞
壁内液体浓度不同，因此，需达到花粉适宜生长的渗透
压则需要不同的蔗糖浓度。
本试验中，随着离体培养基中蔗糖浓度的增加，云
南越桔花粉萌发率总体呈升高趋势，蔗糖浓度为 15%
时达到最高，而 20%时则下降。适量硼酸是花粉萌发
所必需，当蔗糖浓度一定时，随硼酸浓度升高花粉活力
依次升高，而是否更高浓度硼酸处理的花粉萌发效果
更好，有待进一步研究。
3． 2 不同贮藏时间对花粉活力的影响 植物的花粉
活力和寿命除了与自身的生理结构、萌发时的外因，即
适宜的水、氧气、温度和光照等条件有关外;贮藏后花
粉的萌发率还与贮藏时的外界环境条件，即温、湿度和
光照等有关。如刺五加(Eleutherococcus senticosus)花粉
活力可保持 4 d［10］;锦带花(Weigela florida)开花 6 d
后，仍有 15． 38%的花粉具有活力［11］;茄(Solanum mel-
ongena)的花粉在夏季只能存活 1 d，在冬季则能维持 3
d［12］。银杏(Ginkgo biloba)花粉在低温干燥条件下，花
粉活力可维持 1 个月［13］。对云南越桔花粉来说，前 9 d
的花粉活力较高，在 60%以上，第 10 天以后开始急速
下降。利用这一特点，可采集开花后前 9 d的花粉进行
人工授粉，以提高结实率，为越桔的杂交育种提供参考
756 期 杨洪涛等:云南越桔花粉活力测定与花粉保存
依据。本次试验只在干燥、4 ℃恒温避光的条件下贮藏
花粉，对其他贮藏条件未做深入的研究，以后还需进一
步的研究。
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( 责任编辑:曾小军
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗
)
( 上接第 55 页)
3． 2 槟榔采集部位及时期 根据试验结果，作为中药
采集时，成熟种果的胚乳应是重点利用部位，这与传统
的做法一致。在实际生产中，制作槟榔花茶的原料主
要是未开放的雄花花蕾，小花梗这一部位未得到重视。
根据本试验结果，从槟榔碱的角度考虑，小花梗是不应
被舍弃的，它的槟榔碱含量与雄花没有显著差异。
从取材时期上看，制作花茶等产品时，雌花未开放
的花序是最佳选择。为了减少与槟榔果产量的竞争，
建议采用秋季之后无雌花或雌花不能正常发育为果实
的花序作为花茶等产品的原料。
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