全 文 ：基金项目:韶关市科技计划项目 (2014CX /K288);广东省科技计划项目 (2013B020311013)。
作者简介:何小英，主管药师，从事医院药学工作。E － mail:hexiaoying1007@ 163. com
芒毛苣苔醇提取物体外抗氧化活性研究
何小英1 郭惠兰1 黄艳萍2
1． 广东省翁源县人民医院，广东 翁源 512600;2． 广东食品药品职业学院，广东 广州 510520
【摘 要】 目的:测定芒毛苣苔醇提物的体外抗氧化活性。方法:采用 DPPH、ABTS和羟基 (·OH)氧化自由基清除试验对芒毛苣
苔乙醇提取物的体外抗氧化活性进行研究。结果:芒毛苣苔乙醇提取物具有较强的清除 DPPH、ABTS 和·OH 氧化自由基能力。结论:芒
毛苣苔具有较好的抗氧化活性。
【关键词】 芒毛苣苔;抗氧化;活性
【中图分类号】Ｒ285. 5 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2016)09 － 0033 － 02
Study on in Vitro Antioxidant Activities of Ethanol Extract from Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC
HE Xiaoying1 GUO Huilan1 HUANG Yanping2
1． Wengyuan People’ s Hospital，Guangdong ，Wengyuan 512600 China;
2． Guangdong Food and Drug vocational college，Guangzhou 510520，China
Abstract:Objective To study in vitro antioxidant activity of ethanol extract from Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC． Meth-
odsAntioxidant and ree radical scavenging activities of ethanol extract of Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC． were determined by
DPPH and ABTS and ·OH radical scavenging assay． Ｒesults The ethanol extract of Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC． showed
significant DPPH and ABTS radical scavenging activities． Conclusion Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC． show significant antiox-
idant
Key words:Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC．;antioxidant;activity
芒毛苣苔是苦苣苔科植物芒毛苣苔 Aeschynanthus bracte-
atus Wall ex A DC． 的地上部分，又名石榕、大叶榕藤、石
壁风、牛奶树。主要分布于西藏、云南、广西、广东、台
湾、四川等地，生于山谷林中或溪边石上，海拔 300 ～ 1300
米。芒毛苣苔性平，味甘、淡［1 － 2］，广东、广西民间用于
治疗用于风湿骨痛、跌打损伤、肾虚、慢性肝炎等症［3］。
但目前尚未芒毛苣苔的药理活性的报道。研究采用体外试
验法对芒毛苣苔的抗氧化活性进行研究，为探索芒毛苣苔
的生理活性机制及进一步开发其药用价值提供实验基础。
1 仪器与材料
1. 1 仪器 FA2204B电子天平 (上海精科天美科学仪器有
限公司);DG5033A 型酶标仪 (上海精密仪器仪表有限公
司);Finnpipette精密单通道加样器 (赛默飞世尔科技公
司)。
1. 2 试剂 1，1 －二苯基 － 2 －三硝基苯肼 (DPPH，上海
源叶生物科技有限公司)、2，2 －联氮 －二 (3 －乙基 －苯
并噻唑 － 6 － 磺酸)二铵盐 (ABTS)、过硫酸钾、无水乙
醇、二甲亚砜 (DMSO)、维生素 C等试剂均为分析纯。
1. 3 材料 芒毛苣苔药材 2013 年采集于广东省翁源县，
经中国科学院华南植物园叶华谷研究员鉴定为苦苣苔科植
物芒毛苣苔 Aeschynanthus bracteatus Wall ex A DC的地上部
分。常温阴干，60℃干燥后，粉碎过 60 目筛备用。
2 方法
2. 1 样品制备 称取芒毛苣苔粗粉 100g，用 80%乙醇加热
回流提取 2 次，每次 2h。合并 2 次提取液，60℃减压浓缩
干燥，得芒毛苣苔药材提取物 14g。
2. 2 清除 DPPH自由基试验［4］ 用无水乙醇作为溶剂，配
制 DPPH溶液，浓度为 0. 45mg /ml 的溶液，置于棕色瓶中
备用。用 DMSO作为溶剂配制芒毛苣苔提取物浓度为 1mg /
ml的贮备液，使用前用 DMSO 稀释。将不同浓度的样品溶
液 0. 1ml置于 96 孔板中，然后再加入 0. 1ml 无水乙醇，再
加入 0. 1ml DPPH溶液，震荡混匀。于 25℃下反应 30min，
于 517nm处测定得样品溶液吸光度 (A1);用无水乙醇代
替样品，依次加入与样品溶液测定相同量的 DPPH 溶液，
其他试剂量不变，测定得空白对照吸光度 (A0);用
0. 1mL 无水乙醇代替 DPPH 溶液加入样品溶液中，测得样
品本底吸光度 (A2)，每个样品 3 个重复，取平均值，以维
生素 C作阳性对照，按下面公式计算芒毛苣苔醇提物的清
除率，并计算 IC50值。
清除率 (%) = ［A0 － (A1 － A2)］ /A0 × 100%
2. 3 清除 ABTS自由基试验［4］ 将 7mmol /L 的 ABTS 溶液
5ml和 140mmol /L的过硫酸钾溶液 88ml 混合，在室温、避
光条件下静置 12h，制成 ABTS贮备液，使用前再用无水乙
醇稀释成工作液，使用期间要求其在 734nm 处的吸光度为
(0. 5 ± 0. 02)。
用 DMSO作为溶剂，配制成芒毛苣苔提取物为 1mg /ml
样品贮备液。使用前用 DMSO 稀释成一系列稀释成不同浓
度的样品溶液。向 96 孔板中分别加入 10μl 上述样品溶液，
然后再加入 90μl无水乙醇，再加入 100μl的 ABTS工作液，
至振荡器上震荡混匀，在 30℃下反应 6min，于 734nm处测
定样品溶液吸光度 (A1)，用无水乙醇替代样品溶液改为
加入其他试剂量不变，测定得空白对照吸光度 (A0);用
100μl无水乙醇代替 ABTS 工作液，测得样品本底吸光度
(A2)，每个样品 3 个重复，取平均值，以维生素 C 作阳性
对照，按上述公式计算芒毛苣苔提取物的清除率，并计算
IC50值。
2. 4 清除羟基自由基 (·OH)试验［5］ 精密量取芒毛苣
苔醇提取物溶液 0. 1ml置于 96 孔板中，依次加入 8. 8mmol /
L H2O2 0. 1ml、9mmol /L FeSO4 0. 1ml、9mol /L 水杨酸 －乙
醇溶液 0. 1ml，于 37℃震荡反应 30min，用无水乙醇替代样
·33·中国民族民间医药 2016年 5月第 25卷第 9期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 9
品溶液改为加入其他试剂量不变，测定得空白对照吸光度
(A0);用 0. 1ml无水乙醇代替水杨酸 －乙醇溶液，测得样
品本底吸光度 (A2)，每个样品 3 个重复，取平均值，以维
生素 C作阳性对照，按上述公式计算芒毛苣苔提取物的清
除率，并计算 IC50值。
2. 5 数据处理 数据采用 SPSS 17. 0 软件进行数据分析，
所有数据均以均数加减标准差表示，用 t检验，P ＜ 0. 05 为
差异有统计学意义。
3 结果
3. 1 芒毛苣苔提取物清除 DPPH自由基能力 由表 1、图 1
可知，芒毛苣苔提取物在 0. 625 ～ 20μg /ml范围内抗氧化活
性随浓度升高而升高，在 1. 25 ～ 10μg /ml 范围内上升趋势
非常明显。芒毛苣苔提取物清除 DPPH自由基 IC50值明显小
于对照维生素 C，说明芒毛苣苔提取物具有良好的清除 DP-
PH自由基能力。
表 1 芒毛苣苔提取物对自由基清除活性 (x ± s，n = 3)
样品
DPPH清除能力
IC50 /μg /ml
ABTS清除能力
IC50 /μg /ml
羟基自由基
(·OH)清除能力
IC50 /μg /ml
芒毛苣苔提取物 4. 05 ± 0. 13* 3. 65 ± 0. 14* 75. 43*
维生素 C 11. 45 ± 0. 29 14. 76 ± 0. 09 117. 65
注:与维生素 C组比较，* P ＜ 0. 05。
3. 2 芒毛苣苔提取物清除 ABTS自由基能力 由表 1、图 2
可知，在 0. 625 ～ 20μg /ml内芒毛苣苔提取物清除 ABTS 自
由基活性能力随浓度升高而升高;在 2. 5 ～ 5μg /ml 范围内
上升趋势非常明显。在 5 ～ 20μg /ml范围内芒毛苣苔提取物
清除 ABTS自由基活性明显高于阳性对照药维生素 C 的活
性。芒毛苣苔提取物清除 ABTS自由基 IC50值明显小于对照
维生素 C，说明芒毛苣苔提取物具有良好的清除 ABTS自由
基能力。
3. 3 芒毛苣苔提取物清除羟基自由基 (·OH)能力 由表
1、图 3可知，芒毛苣苔醇提取物在较低浓度下表现出较强
的清除·OH的能力。其 IC50约为 75. 43μg /ml，当浓度达到
126. 87μg /ml时，对·OH 的清除能力达到最大值。芒毛苣
苔提取物清除·OH自由基 IC50值明显小于对照维生素 C，说
明芒毛苣苔提取物具有良好的清除·OH自由基能力。
4 讨论
苦苣苔科 Gesneriaceae全世界有 150 属 3700 多种，我国
有 58 属 (其中 27 属为中国特产)，约 463 种。芒毛苣苔在
我国主要分布在西藏、贵州、云南、广西、四川及广东省
区的热带及亚热带丘陵地带，云南等省区少数民族间广泛
用于治疗各种炎症、咳喘、疮疖、风湿、骨折、烫伤、蛇
虫咬伤及妇科等疾病，疗效显著［6 － 7］。
正常机体内会应用抗氧化酶体系与代谢合成的非酶体
系化合物来清除与修复自由基，使自由基处于一种动态的
平衡［6］。当防御体系出现故障或者自由基增多时，自由基
产生和清除的平衡就会被破坏，进而导致细胞器的生物学
特征改变，使细胞衰老，引发各种炎症、恶性肿瘤等疾
病［8 － 9］。因此，寻找有效、毒副作用小的自由基清除剂和
抗氧化剂十分必要。研究采用 DPPH自由基、清除 ABTS自
由基的和清除羟基自由基 (·OH)三种体系对芒毛苣苔醇
提取物进行体外抗氧化试验，结果显示，芒毛苣苔药材对
DPPH，ABTS，·OH均具有一定的清除能力，其中对 DP-
PH，ABTS，·OH 的 IC50 分别为 4. 05、3. 65、75. 43 μg /
ml，表明在一定浓度范围内，随着芒毛苣苔醇提物浓度的
增加抗氧化活性增加。
参考文献
［1］ 叶华谷，曾飞燕，叶育石，等． 华南药用植物 ［M］． 武汉:华中科技
大学出版社，2013:357．
［2］ 谢宗万． 全国中草药汇编［M］． 北京:人民卫生出版社，2000:180 －181．
［3］ 白贞芳，王晓琴，肖培根，等． 广西苦苣苔科植物传统药物学调查
［J］． 中药材，2012，(1) :20 － 23．
［4］ 李福明，汪洋，韦敏． 刺梨叶醇提物体外抗氧化活性和 α －葡萄糖苷酶
抑制活性研究 ［J］． 中国现代应用药学，2015，(6) :685 － 688．
［5］ 王有琼，马李一，张重权，等． 微波辅助提取印楝叶多酚及其体外抗氧
化活性研究 ［J］． 中国现代应用药学，2015，(11) :1319 － 1323．
［6］ 李振宇，王印政． 中国苦苣苔科植物 ［M］． 郑州:河南科学技术出版
社，2004
［7］ 韦毅刚，钟树华，文和群． 广西苦苣苔科植物区系和生态特点研究
［J］． 云南植物研究，2004，26 (2):173
［8］ 李兴泰，陈瑞，高明波． 连翘叶水提物保护线粒体及抗衰老研究 ［J］．
食品与生物技术学报，2009，28 (6):840 － 844．
［9］ Wickens A P． Ageing and the free radical theory ［J］． Ｒespir Physiol，
2001，128:379 － 391．
(收稿日期:2016. 03. 09)
·43· 中国民族民间医药 2016年 5月第 25卷第 9期 Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2016，Vol. 25，No. 9