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古钩藤水提液对小鼠血脂影响相关药理实验研究



全 文 :收稿日期:2012-12-13; 修订日期:2013-05-24
基金项目:国家中医药管理局“十一五”中医药重点学科;
广西壮族自治区教育厅自治区级教学团队(桂教高教[2010]
101 号)
作者简介:张兴燊(1963-) ,男(汉族) ,广西南宁人,现任广西中医药大学
副教授,硕士研究生导师,学士学位,主要从事民族医药和中药药效学研
究工作.
古钩藤水提液对小鼠血脂影响相关药理实验研究
张兴燊1,张 壮2,周雨晴1
(1.广西中医药大学,广西 南宁 530001; 2.南宁市第二人民医院,广西 南宁 530003)
摘要:目的 研究古钩藤水提液对高脂模型小鼠血脂的影响。方法 采用水提法制备古钩藤水提液。取 60 只小鼠随机分
成空白对照组,高脂模型组,古钩藤水提液高、中、低剂量组和辛伐他汀阳性对照组。除空白对照组外,其他组灌服脂肪
乳剂建立高血脂症模型,造模 5 天后,上午对空白对照组和高脂模型组给予等体积的生理盐水,阳性对照组给予辛伐他
汀,古钩藤水提液按 30,15,7. 5g /kg剂量灌胃给药,下午除空白对照组外,其他组均灌服脂肪乳剂,连续灌胃 10 天后,测
定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL - C)。结果 古钩藤水提液各组与高脂模型组比较:古钩藤水
提液各组均能降低高脂血症小鼠的 TC、TG(P < 0. 01) ;并能显著升高 HDL - C(P < 0. 01)。结论 古钩藤水提液具有调节
血脂的作用。
关键词:古钩藤; 古钩藤水提液; 高血脂
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2013. 10. 018
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2013)10-2356-02
Pharmacological experimental research of aquatic extractant from Cryptolepis buchananii
on the fat lipids of mice
ZHANG Xing-shen1,ZHANG Zhuang2,ZHOU Yu-qin1
(1. Guangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanning 530001,China;2. Second People' s Hospital
of Nanning,530003,China)
Abstract:Objective To study the effect of aquatic extractant from Cryptolepis buchananii Roem. et Schult. on the fat lipids of
mice.Methods Nanning 60 mice were obtached and then randomly divided into control group,model group,aquatic extractant
from Cryptolepis buchananii,medium and low dose group,and positive group. Except to the control group,the other groups were
fed hyperlipidemia fat emulsion to be the modeling,five days later,the morning of the blank control group and model group were
an equal volume of saline,positive control group received simvastain,water extract of Cryptolepis buchananii by 30,15 ,7. 5g /kg
dose administered intragastricauy,in the afternoon,other than the control group,other groups were fed with fat emulsion,ig 10
d,the determination of serum total cholesterol (TC) ,triglycerides (TG) ,high - density lipoprotein cholesterol gall (HDL - C).
Results water extract of Cryptolepis buchananii model of each group compared with high lipid:water extract of Cryptolepis bucha-
nanii in each group could decrease the TC,TG,(P < 0. 01)and can significantly increased HDL - C (P < 0. 01). Conclusion
Water extract of Cryptolepis buchananii could regulate the blood lipid particles.
Key words:Cryptolepis buchananii; Water extract of Cryptolepis buchananii; Hyperlipidemia
古钩藤又名海上霸王、白叶藤、牛角藤、断肠草等,为萝摩科
植物古钩藤 Cryptolepis buchananii Roem. et Schult 的地上部分。
具有舒筋活络、消肿止痛、解毒等功效,目前用于治疗腰痛、腹痛、
跌打损伤、骨折、痈疮、癣等疾病[1]。分布于广东、广西、云南、贵
州等地。多生于阳坡,攀援于其他树上,目前,治疗高血脂的药物
多为西药,但副作用较多,研究中草药在治疗高血脂这方面的作
用是现代发展的趋势。古钩藤对高血脂的影响在文献上没有详
细的记载。本实验主要通过研究古钩藤水提液的不同剂量对高
脂模型组小鼠血脂的作用,探讨其对小鼠血脂的影响,为临床进
一步对古钩藤开发利用奠定理论基础。
1 材料与仪器
1. 1 动物 昆明种小鼠,雌雄兼用,体质量(20 ± 5 )g,普通级小
鼠,由广西中医药大学实验动物中心提供,合格证号:桂医动字
11004 号。
1. 2 药物和水提液的制备[2] 古钩藤全草采于广西中医药大学
植物园,全草晒干。取古钩藤 200 g加 8 倍水浸泡 2 h,第 1 次煎
煮 2 h,过滤,取滤液;第 2 次再煎煮 1 h,过滤,取滤液,将两次滤
液合并,静置过夜,过滤,滤液加热浓缩为 200 g /200 ml,按需要
配置所需给药浓度。
1. 3 试剂 ① 胆固醇:分析纯,上海蓝季科技发展有限公司,批
号 090140。②去氧胆酸钠:美国 AMRESCO 生产,北京索来宝分
装,批号 20100416。③丙硫氧嘧啶片:(50 mg* 100 片* 1 瓶)上
海朝晖药业有限公司产品,批号 091102。④辛伐他汀片(10 mg
* 10 片* 1 盒) ,哈药集团三精制药股份有限公司产品,批号
090607。⑤猪油,自制。⑥总胆固醇测定试剂盒(COD - CE -
PAP法) ,四川麦克生物科技责任有限公司产品,批号 080721。
⑦甘油三酯测定试剂盒(GPO - PAP法) ,四川麦克生物科技责任
有限公司产品,批号 080721。⑧高密度脂蛋白胆固醇检测试剂
盒(PTA - Mg2 +沉淀法) ,四川麦克生物科技责任有限公司产品,
批号 080721。⑨吐温 - 80(化学纯) ,成都化学试剂厂产品,批号
20101123。
1. 4 仪器 TU - 1901 双光束紫外可见分光光度计:北京普析通
用仪器有限责任公司产品;台式离心机,16K,珠海黑马医学仪器
有限公司产品;电子天平:EL204,梅特勒一托利多仪器(上海)有
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 10
限公司产品;数显恒温水浴锅,HH - 8,国华电器有限公司产品;
移液管;普通天平。
2 方法
2. 1 脂肪乳的配制[3] 将 1 g 丙硫氧嘧啶于乳钵中研细,备用。
取 20 g猪油于 40℃水浴加热融化,置于钵中,加入 10 g胆固醇、1
g丙硫氧嘧啶,充分搅拌,溶解。再徐徐加入 10%的去氧胆酸钠
水溶液 10 ml,并不断搅拌,然后加入 10 ml 吐温 - 80,研磨乳化
均匀,最后加蒸馏水至 100 ml。装入密闭容器中,冷藏,使用时先
于 37℃水域融化。
2. 2 动物分组及试验方法 实验设计选用健康小鼠 60 只[(体
质量(20 ± 5)g,雌雄兼用) ],除空白对照组外,其他组小鼠灌服
脂肪乳剂(0. 2ml /10g) ,造模 5 天后对造模小鼠进行眼眶静脉丛
取血,测定血清总胆固醇(模型组与正常组比较 P ﹤ 0. 01 或 P
﹤ 0. 05)。造模成功后随即将小鼠分为 5 组,分别为:①高脂模
型组;②辛伐他汀阳性对照组;③古钩藤水提液高剂量组(30 g /
kg) ;④古钩藤水提液中剂量组(15g /kg) ;⑤古钩藤水提液低剂
量组(7. 5g /kg)。
每天上午对空白对照组和高脂模型组给予等体积的生理盐
水,阳性对照组给予辛伐他汀(20mg /kg) ,其他组灌胃相应的药
量,给药体积是 20 ml /kg 体质量,每天下午除空白对照组外,其
他组灌胃相应的药量,给药体积是 20ml /kg 体质量,连续 10 d。
末次给药前小鼠禁食不禁水 12 h,末次给药后 2 h小鼠摘眼球取
血,血凝后于 3 500r /min离心 10 min,分离血清,按试剂盒说明测
定血清总胆固醇(TC COD - CE - PAP法)、甘油三酯(TG GPO -
PAP法)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL - C PTA - Mg2 +法)水平,采
用半自动生化检测仪进行检测。
动脉硬化指数(AI)=(TC - HDL - C)/HDL - C。
2. 3 数据统计 全部数据均以 珋x ± s表示,采用 Excel2003 进行数
据分析,组间分别采用 t检验法。
3 结果
结果见表 1及图 1 ~3。由表 1可知,古钩藤水提液各组与高血
脂模型组比较,古钩藤水提液各组均能降低 TG(P﹤ 0. 01)和 TC(P
﹤ 0. 01)。古钩藤各组均能升高HDL -C(P﹤ 0. 05或 P <0. 01)。
表 1 古钩藤水提液对实验性小鼠高血脂症血清
总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇水平的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/g·kg - 1
TC
/mmol·L -1
TG
/mmol·L -1
HDL - C
/mmol·L -1
正常对照组 - 1. 97 ± 0. 52 1. 02 ± 0. 34 1. 59 ± 035
高脂模型组 - 3. 07 ± 0. 34△ 4. 2 ± 1. 18△ 1. 01 ± 0. 14△
辛伐他汀组 0. 02 0. 69 ± 0. 17* 0. 9 ± 0. 35* 1. 36 ± 0. 19*
古钩藤高剂量组 30 0. 78 ± 0. 25* 1. 07 ± 0. 44* 1. 55 ± 0. 56**
古钩藤中剂量组 15 0. 78 ± 0. 13* 1. 35 ± 0. 25* 1. 52 ± 0. 52**
古钩藤低剂量组 7. 5 0. 69 ± 0. 21* 1. 11 ± 0. 33* 1. 56 ± 0. 40*
与正常对照组比较,△P <0. 01;与模型组计较,* P <0. 01;**P <0. 05;n =20
图 1 古钩藤对实验性小鼠高脂血症
血清总胆固醇水平的影响(珋x ± s,n = 10)
图 2 古钩藤对实验性小鼠高脂血症
甘油三酯水平的影响(珋x ± s,n = 10)
图 3 古钩藤对实验性小鼠高脂血症高密度脂蛋白胆固醇
4 讨论
近年来,心脑疾病在我国居死亡原因首位,其中高脂血症为
其常见的一病症,表现为血液中胆固醇和(或)甘油三酯水平明
显提高,它是动脉样硬化的重要因素,与高血压、吸烟共同称为心
脑血管疾病的三大危险因素[4]。高脂血症可根据发生异常改变
的血脂成分的不同,分为三种类型:高胆固醇血症、高甘油酯血
症、混合性高脂血症(血中总胆固醇与甘油三酯同时升高者即可
诊断为本病)。目前常用的降血脂药物有如下几类:苯氧芳酸
类、三羟甲基戊二酰 -辅酶 A 还原酶抑制剂、烟酸类、多不饱和
脂肪酸类、泛硫乙胺、藻酸双酯钠(PPS )、其他降血脂药物。如
天然药物类,对降低胆固醇和甘油三酯均有效,且可以升高高密
度脂蛋白,具有综合调节血脂的功效,且副作用小,如银杏类(天
保宁)等等。从天然药物中寻找降血脂有效成分的研究日益受
到重视。中药治疗高血脂症有独特之处,作用温和持久,毒性和
不良反应少,具有综合治疗的作用,可以延缓并发症的发生与发
展。本实验发现古钩藤水提液对高脂模型小鼠血脂有降血脂作
用。实验只是对古钩藤水提液对高血脂的降血脂进行初步分析,
明确了中药古钩藤水提液的降血脂作用,并对相关的中药开发和
临床应用提供线索和理论依据。有关古钩藤降血脂作用的机理
和有效成分有待进一步研究。
参考文献:
[1] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编,下册[M].北京:人民卫
生出版社,1976:170.
[2] 张兴燊,黄 昕,潘能玉.古钩藤水提液对正常小鼠血糖影响的实
验研究[J].时珍国医国药,2010,21(10) :2699.
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的影响[J].中药材,2008,31(3) :410.
[4] 邢 岩,李智慧,田庆伟,等.番茄红素对实验性高血脂小鼠的保护
作用[J].中国食品添加剂,2007,(4) :81.
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 10 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 10 期