全 文 ：19 8 5年 广 、 西 农 学 院 学 报 第 ` I期
灵香草细菌性软腐病发生流行
规 律 的 研 究 `
陈育新 凌 勇料 戴肇英 _薛振南 曹先知
摘 要
灵香草细菌性软腐病 ( 万: 留了: l’a ca o t。阳朋 。 a r. 二。 t。。 : “ ) 是一种毁
灭性病 害 , 在广西大瑞山 区 的金 秀县和 大苗 山 区 的融水县均有发生 . 每 当 条件
适合时 , 常迅速 芙延成 灾 , 病株腐烂 全林死亡 , 严重影响 灵 香草的 产 量 和 质
量 。
作者 自1 9 82 年 7 月至 19 84 年 1 月 , 在金秀县进行 了野外定点调 查及室内试
验观察 。 结 果表明 , 灵香草细菌性软腐病一年四季均可 发生 , 但 以 灵香草开花
前后流行速度最快 , 是病害发 生流行的高峰期 , 果期病害流行速度最慢 , 为低
峰期 。
细菌性软腐病是 由伤 口侵 入 , 尤 以壳针抱造 成 1的微伤 关 系 更大 , 两者复合 侵
染率和病情严重程度均显著地 高于 纯病原细菌的侵 染率和危害程度 。 影响病害
发 生流行速度 的主要 因子是品种抗病性 、 菌 源数量和 气侯条件 。 从方程 的分析
结果表明 : 当 旬平均 气温 > 15 `C , 旬平均相对 湿度 > 90 肠 , 初始 病指 ) 30 时 ,
病害将会迅速 蔓延 , 流行 成 灾 。
一 、 材 抖 和 方 法
1
、 病害调查
( l ) 调 查方法 : 在金秀县 4 公里九源 冲灵香 草栽植地固定 30 一 1 0 0枝 , 每 5一 10 天
* 先后参加 本项调查观察 的清金秀县 l二迹运!、 莫刺` 、 龙 锐 、 闭 应豪 、 赵志和和覃宝芝同志 。 参 加部
份工作的有龚志坚 、 金 荣 、 覃保球 和冯工娟 同志 。
承蒙 {了感通 ! , 授 、 郭可 展副教 , 、 李超扬 讲师对 , 文 的 :、 一导和 , 助 , 特 此* 、 、 、 。
* * 在金秀县 农业 局工作 。
扔
观察记录一次 。 记录方法是以枝为单位 , 记录其总叶片数 、 病叶数 、 水溃状十分明显的
病叶数 、 烂顶程度等。 由于香草细菌性软腐病在适宜的条件下发展很快 , 所以定点观察
的地块要经常补足 , 在同一时段内一般选择有代表性的 l 一 2 地块进 行定点观察 。
( 2 ) 灵香草软腐病分级标准 (以枝为单位 )
0 级 : 无病 。
l 级 : 叶片发病率在 1 / 5 以下 , 不腐烂 、 不穿孔 。
2 级 : 叶片发病率在 1 / 3 以下 , 并有腐烂 、 穿孔 。
3 级 : 叶片发病率在 1 / 2 以下 , 并有腐烂 、 穿孔 。
4 级 : 叶片发病率在 r / 2 以 上 , 大部分叶片腐烂 、 穿孔 . 或植株开始烂
顶 。
2
、 气象资料 : 来 自 4 公里九源 2中香草地气象观测场 。
3
、 室内外试 验
( 1 ) 发病最低温度的测定 : 用 24 ~ 4 8小时菌龄的灵香草软腐病菌种 , 每文加入无
菌水 5 ~ 7 m 娇咭成细菌悬浮液 ; 将采回的新鲜健康香草截成 2 一 3公分长的小段 , 然后
用 6 孔针板将细苗悬浮液中的病原细菌针刺接到香草离体的茎什和叶片土 , 汀段茎秆针
一处 ( 6 孔 ) , 叶片针两处 ( 每处 6 孔 ) , 然后装入干净的培养皿 中 l(勺放 二日争滤纸和
无菌水使滤纸泥润为度 ) , 同时一用针刺不接种的香草作对 {’联, 置于冰箱内 。 八冰箱内安置
温度于卜, 记录温度 。 冰箱外常温下也有接种和不 接种的对照皿 。 接 吞卜后 祠天观察一次发
病 情况 , 连续观察 4 次 。
( 2 ) 营芥 )戈份测定
在灵补 汽每个不 同生育期测定营养成份 2 一 4 次 , 每次取健 { 六汗枝 , 每 病发病香
草若干枝 (一般在上午未施肥的香草地 取样 ) , 从顶叶算起第 5 亏娜 卜下四个节 的茎秆 ,
榨取其汁液进行测定 。
( 3 ) 病害流行速度观察
从野外取巨}健株 , 分栽于 6 个杯 I巾, 取 4 个 }拭自香草按香 一草状冉岁州有 〔接种方法同
( l) 〕 。 另 2 杯作对照 。 然后用浸过水的薄膜袋套上保湿 , 每陷 6 尹补小 !l寸记录一次 ,
每 次观察后喷一次清水 , 并将袋套上保湿 , 使香草 始终保持在饱和涅度下 (相对湿度为
1 0 0肠 ) 。 一 _一
( 4) 复合侵染观察 六 厂 , _ { 、
① 香草叶斑病的保湿观察 : . 从香草地取回叶斑病病叶 , 散张置于消毒过的培养皿
内可二净的滤纸或脱脂
病斑中有壳针抱属分
丰朴 ;蛋饱子保湿观察
,
: 每天统计一次出现水渍状的病斑数和镜检水渍状
和分生胞子器的病斑数 。
② 两种病的接种试验 :
个处理 , 每个处理 4 个重复 。
取确实无病的健康香草 20 盆作试验 ( 中叶种 ) , 试验分 5
壳针抱抱 子悬浮液的制作: 选病斑组织 (最好是新鲜 的 ) 若干个 , 劣碎置于培养皿
中加适量无菌水 , 分生抱子即从分生抱子器中溢出 , 用显微 镜检查泡子敏达 30 个以上 /视
野 , 在室温下 ( 16 ~ 20 ℃ ) 放置 24 小时左右 , 镜检袍子萌 发率达 8 肠以上就可接种 。 若
抱子萌发量太少 , 可再放 置一些时间 。
香草软腐细菌悬浮液的制作 : 选用培养 2 4一 48 小时的纯细菌培养物 , 每支斜面菌种
加无菌水 5 一 7 m l , 将菌苔洗下溶于水中 , 若 喷 雾接种 可加无菌水 30 m l 。
处理 卜 纯壳针抱接种 .o 取一半壳针抱袍子悬浮液加入 2 0 p p m 农用链霉素 , 以 抑
制自然病叶 ,扫的细菌 (软腐细斌 ) , 可得到以壳针抱病原真菌为主 川抱子悬浮液 。
处理 I : . 纯壳针饱 十细菌接种 。 在自然病叶制成的另一半壳针袍袍子悬浮液中加入
细菌悬浮液 , 以补充自然病斑组织 中的病原细菌数量 。
处理 l : 不针刺接纯培养细菌 。
处理 W : 针刺接纯培养细菌 。
处理 V : 对 z照 ( C K ) 。
接种方 法 : 处理 I 、 I 两项是将病组织展开与接种株的叶面相接触 , 并用吸管分别
吸取链霉素液和清水滴于 I 和 I 上 , 以叶面有水膜但又不形成水滴流下为 宜 。 处理 l 用
喷雾法或涂抹法 。 处理 砰 、 V 两项用针刺法 , 但处理 V不 能用细菌悬浮液而应 用无菌水
代替 。
各处理接种后 , 马 .上用湿过水的薄膜袋套袋保湿 , 娜次观察记录后必须 喷 一 次 清
水 , 并将薄膜袋套上保湿 。
二 、 观 察 结 果
、 病害流行情况
根据 1 98 2年 7 月 8 日一 1 9 8 4年 1 1月 30 日两年多的系统观察和面上的药剂防 治对照区
的调查材料 , 计算出不同时间里灵香草细菌性软腐病流行速率 (见表 1 ) 。 并以句流行
速率绘成图 (一 ) 。
图 (一 ) 灵香草细菌性软腐病和灵香草生长量年内变化情况
表 1
1 98 2年 7 月 S B 一 1 9a 4年1 1月 30 日灵香草细菌性软腐病
流行速率和灵香草生长盆表
合
娜·综时段 流 行
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长 量
综 合 1 8 4 9年
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(续上表 )
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注 : 生长量材料来自金秀县 灵香草生物特性观察小组 。 ·
引用冬防点对照区材料 ,
△ 引用广西农学院实习生的调查材料 ,
。 因喷药 , 剔除 ,
/ 缺测 。
从表 l 和图 (一 )可知 : 香草软腐病一年四季都可以发生 , 每当春季香草生长高峰后一
段时间 , 细菌性软腐病进入流行高峰期 , 尤以 4 月上 、 中旬开花前后发病最烈 。 结果中
期病害流行速度开始减慢 , 以 6 月份流行速度最慢 , 为低峰期 。
2
、 气 象资料
1 9 8 3年和 1 9 8 4年主要气象要素见表 2 , 细菌性软腐病水渍状症状十 分明显的气象要
素 (以旬平均计 ) 见表 3 。
表 2 1 9 8 3一 1 9 8 4年月气温 、 湿度综合简表
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表 3 灵香草细菌性软腐病水洗状症状十分明显的气象要素表
.
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3
、 室内试验结果
( 1 ) 室内试验表明香 草状离病发病的最低温度为 S C 左丫
( 2 ) 香草营养成份测定结果见表 4 和图 (二 ) 。
表 4 健康香草各生育期的营养成份测定结果 表 ( 单位 : p p m )
营养 . .
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图 (二 ) 灵香草软腐病和香 一草健株体内氮磷比的季节性变化
( 3) 在室内平均气温 2 1毛 , 相对湿度 1 0 肠的情况下 , 香草软腐病 6 个小 1牙寸即可
发病 , 从发病到死亡仅需 6 天 , 比在自然条件下发病速度快 6 一 1 1倍 。
( 4 ) 自然病叶保湿观察结果 : 在室内气 温 23 ℃左右 , 相对湿度 1 0 肠的条件下 ,
香草叶斑病的部分病斑 15 个小时即可出现水渍状病斑 。 保湿后第 5 天 , 在 3阳个病斑中 ,
呈水渍状 的有 35 3个 , 占93 .8 8肠 。 抽 查 72 个水渍状病斑 , 有菌丝和抱子器的有 59 个 , 其
中可见 S劝 ot , l’a l那 l’m ac hl’ a 分生抱子和分生袍子器的有 5 0个 , 占真菌病斑 的8 4 . 7 5肠 。
以 x , = 5 0 , x Z = 2 2 , n , = 72 , n Z 二 7 2进行假设测验 :
丝72一、一八 x , _ _ _多皿 二 。 . 6 9 4 4p ! 已 一五, 一 7 2 P Z =
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结果表明 , 香草叶斑病 的 S eP t o1 2’a 、 月sc oc ky la 真菌和细菌性软腐病 的复合侵染 率
极显著地高于纯病原细菌的侵染率 。
( 5 ) 人工接种试验结果 : 不针刺接细菌和对照均不发病 , 针刺接细菌的发病早 ,
病情发展快 , 交叉接种和纯壳针抱接种 的 1 ~ 2天后发病 , 但发病后病情发展有明显不
同 (见表 5 ) 。
表 5霖不、 开始发病时间
出现水渍状时间
开始腐烂穿孔时间
两种病接种结果简表
V ( C K )
纯壳针抱 壳 + 细 不针刺接细菌 } 针刺接细菌 { 针刺接无菌水
有二没
2 天
没有
没有
1天
3天
4 天
不发病 不发病
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` 天内 … 没 有
… , .…二 L ……号_杏_ 二 ,…, .…件二汽_
三 、 发生流行因素的剖析
、 灵香草细菌性软腐病流行速度与菌源及气象条件的关系
使用简单可编程序 电子计算器 C A S I 0 xf 一 3 6 0 P (或 xf 一1 8 o )P 对 1 9 8 4 年 2 月
10 日一 4 月 15 日 13 组数据 (表 6 ) 进行逐步回归 分析 , 在上述六个因子中以候平均气温
x ,为主要因子 , 可建立最优回归方程 :
y = 一 0 。 0 5 1 3 + 0 . 0 0 7 3 x , 〔 F = 1 0 。 4 4二 〕
因为表 6 中候平均相对湿度 > 90 呱的组数有 n 组 , 占全部组数 ( 13 组 ) 的 8 4 . 62 帕 ,
所以 2 月上旬~ 4 月 中旬 ( 84 年 ) 这段时间的相对湿度 已能满足 灵香草细菌性软腐病的
发生流行需要 , 但不能进入方程 。
为了综合更多的因子 , 可利用表 7 材料 , 采用指标交叉法对此病的发生趋势进行预
测 :
y为预报量 , 令 y 多于 0 . 0 2为 1 , y ( 0 . 0 2为 0 ,
x ,为旬平均气温 , x , ) 15 ℃为 1 , 盆 : < 15 ℃为 O ,
X Z为旬平均相对 湿度 , x Z ) 90 肠为 1 , x : < 90 肠为 。 ,
x 3为旬降雨量 , x 。 少 4 0。 : n为 x , x 。 < 4 0二 m为 。 ,
表 6 灵香草细菌性软腐病流行速度与气象条件的关系 1 98 4年
时 间 流行速率 r平均气温 降 雨 s enl 地温
( 月 、 日 ) y(℃ )x : X 6量 ( r n
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5
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一 4 。 1 5
1 7
表 7 预报 t和预报因子观案数值表 (以旬计 )
时 1 9 3 8年
、 间要 \3 月 4月 5月
素 \ \上 中 下 上 中 下 上 中 下
y 一 0。 3 0一 0。 1 0一 0。 0 4 0。 09 6 0。 7 0 4 0。 1 5 6 0。 3 0 2 0。 5 0 4 0。 0 2 2
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6 2
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1
x ` 为旬降雨天数 , x ` ) 6 天为 I , x ` < 6 天为 。 ,
x 。为旬 日照时数 , x 。 ) 1 0为 l , x s < 1 0为 0 ;
x 。为初始病指 , x 。 ) 30 为 1 , x 。 < 30 为 0 ;
xl 丸 , xl xs , ` ” . ” 从 x 。为相应两 因子间的交互作用 。
根据各预报因子的系数及交互作用系数 , 求得回归预测式
y = 0
。
1 4 0 6 x
l + 0
。
1 1 4 3 x
: + 0
。
0 2 6 0 x
3 + 0
。
0 1 3 5 x
` + 0 。 0 4 8 2 x 5 + 0
。
0 9 7 4 x
。 +
0
。
1 4 0 6 x : X
: + 0
。
0 0 4 3 x
1 X 3 + 0
。
0 5 4 1 x 1 X 一 + 0
。
0 3 4 4 x
: x 。 + 0 。 1 0 8 2 x 一X 。 +
0
。
0 3 4 2 X
: X s + 0
。
0 2 4 3 X : X
` + 0
。
0 1 3 2 X
2 X 5 + 0
。
0 6 9 2 X : x
。 + 0 。 0 1 9 6x 3 x 一 +
0
。
0 1 0 5 x
3 x 。 + 0 。 0 2 6 0 x s x 。 + 0 。 0 0 4 9 x ` x s + 0 。 0 0 9 6 X ` X a + 0。 0 0 6 9 X o x 。
预报方程中各项数值的大小反映预报因子或交又项与预报量之间的关系 。 系数值越
18
大 , 该预报 因子或交叉项与预报量的关系越密切 , 反之 , 相关性较差 。
从方程的分析结果表明: 旬平均气温 x , 和旬平均气温与旬平均相对湿度的交互作用
x Z是影响香草软腐病流行速度的主要因子 , 居第一位 ( ’ : a * = 。 . 1 4 0 6 , a , 2 = 0 . 1 4 0 6) ;
相对湿度 x : 和平均温度与初始病指的交互作用 x : 。是影响香草软腐病流行的重要 因 子 ,
居第二位 a( : = o . 1 1 4 3 a , 。 = O。 1 0 82 ) , 初始病指 x 。在影响香草软腐病流行上也比 较
重要 , 居第三位 a( 。 = 0 . 0 9 7 4) 。 可以认为平均气温 、 相对湿度 、 初始病指以及它们之
间的交互作用是影响香草软腐病发生和流行的主导 因子 。 当旬平均气温 > 15 ℃ , 旬平均
相对湿度 > 90 肠 , 初始病指 > 30 时 , 灵香草细菌性软腐病将会迅速蔓延 , 流行成灾 。 从
表 2 可知金秀县香草地 4 ~ 10 月份的温湿度都适合 灵香草细菌性软腐病的发生和流行 。
在适合灵香草细菌 性软腐病发生的气候条件下 , 其决定病害流行的因素应是菌源的
多少和植株本身的抗性程度 。 实际上 , 栽种无病种苗的地方 , 一般很少发病 , 即使头一
年发病 , 流行速度也很慢 。 如 1 9 8 2年秋种植的地块四 , 由于种苗从社员刘绍先提供的无
病苗 , 所以 1 9 8 3年 3 ~ 8 月份该地的灵香草发病很轻 , 3 一 4 月份的流行速度平均只有
。 . 0 0 o 5( 初始病指为。 . 5 0) 。 比同期地块三的平均流行速度 0 . 0 2 1 2 (初始病指为 1 7 . 5 0)
慢 4 2 . 4倍 。 可见种植无病苗是防治病害的一项根本性的措施 。
2
、 灵香草细菌性软腐病 的季节性变化及其他因素分析
全生育期中 , 病害的流行速度以开花前后和开花期间为最快 , 而以果期 , 尤其是结
果中期的 6 月份流行最慢 , 见图 (二 ) 。
灵香草健康株不同生育期 N / P 比值的变化与病害流行速度有一定的关系 (见表 8) 。
1 9 8 3~ 1 9 . 4年不同生育期香草健株 N / P比值与员香草细菌
表 8 性软腐病流行速率 r 的关系
生育期 …流、: 速率 ( r , …健株 N / P 比值 } 预 报 方 程— …一 -一 一一 ~兰一— }一一 ~一一 2生一` 一一一一 !——分枝期 … “ · 0 2 5 2 … “ · 2 0 0 0 …一— 一…一卫迎丝 一一 ~ …-一卫三丝 - 一 }, , { ” · 0 0 6 7 ! ” · l o o 0 )二一一二二 {-一一旦竺望旦一一匕一卫些丝一一一 { y “ 一 。 ’ 。’ 7。` + 。 · 3。。 , ` x{ “ · 0 3 0 3 } ” · 1 6 0 0 } ( F = 1 1 · 8 2 8 . ’ )花 期 ` 0 。 0 3 0 3 } 0 。 2 6 6 7 !一— } 卫望翌兰 -一…一 卫胜燮生一 一 - }} ” · “ 3 6 7 … o · 12 6 2 …果 期 … ” · 0 0 9 4 : ” · 1 1 4 3 ’… 一 ” · 0 0 2 2 ` ” · 1 0 7 4 ’
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1 1 9 9
1 9
据8 3年和8 4年对灵香草营养成份进行测定的结果 , 表明在花蕾期由于植株氮磷比值
的升高 , 使之容易感病 。 如 84 年 3 月 2 6日植株 N / P比值最高 , 经过半个月后 (即 84 年 4
月 1 1日 )出现病害流行高峰 。 也就是花蕾后期和开花期间病害流行最快 。 并花后 N / P 比值
开始下降 , 即从 5 月 n 日~ 6 月 25 日N / P 比值一直维持在较低的水平 。 当N / P 比值下降
后半个月左右 , 也就是 6 月份结果 中期病害流行速度减慢 , 为全生育期的流行低峰 。 落
果 期 (一般从 9 月中旬开始到收获前 ) N / P 比值有回升 , 因而病害流行速度又开始加快 ,
有时可在 10 月中旬出现病害流行的小峰 , 见图 (二 ) 。
在实际观察中知道 , 灵香草的大叶种 、 中叶种 、 小叶种和竹叶种四个品种中 , 以竹
叶种比较抗病 , 但产量较低 。 大叶种产量虽高 , 但易感病 。 当地以种植中叶种为主 , 产
量介于大叶种和竹叶种之间 , 抗病 中等 。
四 、 结 果 与 讨 论
灵香草细菌性软腐病在金秀县一年四季均可发病 , 一般以 4 ~ 10 月旬平均 气 温 >
15 ℃ , 旬平均相对 湿度 > 90 肠 , 雨日多 , 日照少的气候条件有利于此病的发生和流行 。
以整个生长季节来说 , 花蕾期可能由于植株游离态氮 ( N H ` 一 N ) 和磷的比值升高 ,
有利于病菌的侵入 。 因此花蕾后期和花期 ( 4 月上中旬 ) 是病害流行的高峰期 。 果期植
株氮 、 磷比值下降其流行速度也开始下降 。 结果 中期 ( 6 月 ) 流行速度最慢 , 为流行低
峰期 。 在其他季节里 , 如果菌源多或偏施和重施 N肥往往也有利病害的发生和流行 。
灵香草细菌性软腐病的病原细菌主要从真募` 尤其是叶斑病的病原真菌一 壳针泡菌所造成的伤口 侵入 , 其次是从人为造成的伤口侵入 。 由于灵香草细菌软腐病和真菌性叶
斑病 (S , , 。汀 a 行:俪。 h i a) 的复合侵染率显著地高于单纯由软腐病的病原细菌侵入率 。
因此 , 林间香草地的软腐病甚至可以长期存在 。 在气候条件不适合时则处于潜伏状态 ,
一旦气候条件适合时 , 病原细菌可以大量的繁殖和重复侵染 , 引起病害的猖厥流行 。
参 考 文 , 献
〔 l 〕 罗达新编 , 1 9 8 2年 , 数理统计 (上 、 下册 ) , 广西农学院 ( 油印本 ) 。
〔 2 〕 罗达新 、 李超扬编 , 1 9 8 3年 , 多元线性回归逐步回归 , 广西农学院 ( 油印本 ) 。
〔 3 〕 陈育新 、 戴肇英等 , 1 9 8 4年 , 灵香草细菌性软腐病的病原鉴定 。 广西农学院学报
( 2 )
: l 一 8 。
〔 4 〕 陈育新 、 薛振南等 , 1 9 8 4年 , 灵香草病害药剂防治试验研究报告 。 广西农学院学
报 ( 2 ) : 9 一 2 5 。
〔 5 〕 华尧楠等编 , 1 9 8 2年 , 农业病虫数理统计预报 , 山东科技出版社 。