全 文 ：　2009 , 35(4):138-139 P lant Protection
收稿日期:　2008-11-19　　　修订日期:　2009-02-16基金项目:　科技部科技基础性工作专项(2006FY111000);西南大学博士后基金(207001)资助项目＊通讯作者 E-mail:ch angyong@h otmail.com
从葎草中检出复合侵染的多种病毒
青　玲1 , 2 , 　杨水英1 , 　孙现超1 , 　王进军1 , 　周常勇1 , 2＊
(1.西南大学植物保护学院 , 植物病害生物学重庆市高校级重点实验室 , 重庆　400716;
2.中国农业科学院柑橘研究所 , 重庆　400712)
摘要　采用抗原直接包被酶联免疫吸附测定法(ELISA)对采自重庆近郊的 34 个葎草样品进行了主要病毒种类的
检测。其中马铃薯 Y 病毒(Potato virus Y , PVY)的侵染最普遍 ,其阳性检出率达 44.12%;马铃薯 X 病毒(Potato
v irus X , PVX)的阳性检出率最低 ,仅为 26.47%, 其余 5种病毒 , 烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus , TMV)、黄瓜
花叶病毒(Cucumber mosaic v irus , CMV)、番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus , ToMV)、芜菁花叶病毒(Turnip
mosaic v irus , TuMV)及蚕豆萎蔫病毒 2 号(Broad bean wilt v irus 2 , BBWV-2)的阳性检出率均为 35.29%。葎草
样品受多种病毒的复合侵染现象非常严重 , 15 个阳性样品中病毒复合侵染率为 80%, 其中 75%的样品检测到 7 种
病毒复合侵染。
关键词　葎草;　病毒;　复合侵染;　检测
中图分类号:　S 432.41　　文献标识码:　A　　DOI:　10.3969/ j.issn.0529-1542.2009.04.032
Detection of several co-infected viruses in Humulus scandens
Qing Ling 1 , 2 , 　Yang Shuiying 1 , 　Sun Xianchao1 , 　Wang Jinjun1 , 　Zhou Changyong1 , 2
(1.Chongqing Key Laboratory of Plant Disease Biolog y , College of Plant Protection ,
Southwest Univ ersity , Chongqing　400716 , China;
2.Research Institute o f Citrus , Chinese Academy of Agricultural Sciences , Chongqing　400712 , China)
Abstract　Thir ty four sam ples o f Humulus scandens w ith vira l symptoms co llected from the outskir ts o f Chongqing
we re tested fo r main virus type s by using antig en direct co ated ELISA.Seven kinds of viruses , including Tobacco
mosaic v irus (TMV), Cucumber mosaic virus (CM V), Tomato mosaic v irus (ToMV), Turnip mosaic v irus
(TuM V), B road bean w ilt v irus 2(BBWV-2), Potato virus X (PVX)and Potato virus Y (PVY), w ere detected in
15 samples.The infection ra te o f PVX w as the low est(26.47%), while the infection r ate of PVY w as the highest
(44.12%).Five o ther kinds o f v ir uses w ere detected fr om 35.29% of the samples.Eighty percent o f the 15 positive
samples w ere co-infected with mo re than two viruses and about 75% o f co-infections w ere caused by mix tur e of the
above-mentioned seven kinds o f viruses.
Key words　H umulus scandens;　virus;　co-infection;　detection
　　葎草[ Humulus scandens (Lour.)Merr.] ,别
名拉拉藤(秧 、蔓)、五爪龙 、勒草 、锯子草 、降龙草或
牵牛藤 ,为桑科葎草属一年生或多年生蔓性草本 ,除
新疆和青海外 ,我国各地均有分布[ 1] 。因具有较强
的攀缘性和生命力 ,且含有多种营养物质和化学成
分 ,葎草在畜禽饲料 、医疗保健 、水土保持 、生态绿
化 、工业原料制造及蜂蜜加工等方面有着重要的开
发利用价值[ 2-3] 。但由于葎草抗逆性强 ,对生态环
境适应范围广 ,蔓延发展快 , 极易形成群落 ,近年来
在许多省市已发展成为恶性杂草[ 4-5] 。笔者在进行
重庆市外来有害生物入侵的调查中发现 ,重庆部分
地区的葎草呈现花叶和黄化等植物病毒病的典型症
状 ,而国内外未见病毒侵染葎草的报道。本研究采
用抗原直接包被 ELISA 法对采自重庆近郊的葎草
样品进行了针对多种作物常见病毒的检测 ,以期为
评价葎草在作物病毒病的传播及流行中的潜在作用
35 卷第 4 期 青玲等:从葎草中检出复合侵染的多种病毒
提供科学依据。
1　材料与方法
1.1　病毒样品
2007-2008年从重庆北碚和九龙坡区共采集
34个葎草样品 ,样品主要表现花叶 、叶脉黄化 、叶肉
黄化及叶缘黄化等症状。
1.2　标准抗原及抗体
黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus , CMV)、
番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus , ToMV)、芜菁花
叶病毒(Turnip mosaic virus , TuMV)及蚕豆萎蔫病
毒2号(Broad bean wilt v irus , BBWV-2)等 4种病毒
相应的抗原及单抗由浙江大学周雪平教授惠赠 ,烟草
花叶病毒(Tobacco mosaic virus , TMV)、马铃薯 Y病
毒(Potato v irus Y , PVY)和马铃薯 X病毒(Potato vi-
rus X , PVX)等 3种病毒相应的抗原及多抗由本实验
室分离 、制备和保存 ,碱性磷酸酶标记的羊抗鼠 IgG
和羊抗兔 IgG购自美国 Promega公司。
1.3　病毒检测方法
参考青玲等的间接 ELISA 法[ 6]进行病毒检测。
2　结果与分析
2.1　侵染葎草的主要病毒种类检测
将葎草样品分别针对供试病毒特异性抗体进行
ELISA 检测 , 结果表明 , 34 个样品中共检测到
CMV 、TMV 、 ToMV 、 TuMV 、BBWV-2 、PVY 和
PVX等 7种病毒。其中 PVY 的侵染最普遍 ,共有
15个葎草样品检测到 PV Y , 其阳性检出率达
44.12%;PVX的阳性检出率最低 ,仅为 26.47%,且
所有样品均采自重庆市北碚区;其余 5 种病毒
CMV 、TMV 、ToMV 、TuMV 及 BBWV-2 的阳性样
品均为 12个 ,检出率为 35.29%。34个葎草样品中
共有 15 个样品检测呈阳性 ,阳性率为 44.12%,另
有采自北碚区的 19个样品未受 7 种供试病毒的侵
染(表 1)。
表 1　侵染葎草的主要病毒种类检测
采集地 样品数量 病毒检出率/ %
CMV T MV ToM V TuMV BBWV-2 PVY PVX
北碚 32 31.25 31.25 31.25 31.25 31.25 40.63 28.13
九龙坡 2 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00
合计或平均 34 35.29 35.29 35.29 35.29 35.29 44.12 26.47
2.2　病毒复合侵染分析
对检测结果进一步分析发现 ,葎草样品受多种
病毒的复合侵染现象非常严重(图 1)。在 15 个阳
性样品中仅发现 3个样品受单一病毒的侵染 ,毒原
均为 PVY ,且这 3个样品均采自西南大学校园。另
12个葎草样品均受多种病毒复合侵染 ,其中有 3个
样品检测到 CMV 、TMV 、ToMV 、TuMV 、BBWV-2
及 PV Y等 6种病毒的复合侵染 ,另有 9个样品检测
到全部 7种病毒的侵染 ,占检测阳性样品的 60%。
在阳性样品中未发现其他病毒复合侵染类型 。
图 1　病毒检测呈阳性的葎草样品中的病毒侵染类型
3　讨论
PVY 、PVX 、 TMV 、CMV 、ToMV 、 TuMV 和
BBWV-2是引起烟草及多种蔬菜作物病毒病的主要
病毒种类 ,本研究对采自重庆的 34个葎草样品进行
了针对这 7种病毒特异性血清的 ELISA 检测 ,结果
表明这 7种病毒均可侵染葎草 ,其中 PVY的侵染最
普遍 ,且样品中多种病毒复合侵染现象严重 。鉴于
杂草是植物病毒的重要中间寄主[ 7-10] ,而葎草常生
于沟边 、路旁或农田中 ,因此其极可能成为作物病毒
病的潜在初侵染源及强力传播途径 ,应引起重视。
本研究发现有 19份样品未检测到 7 种供试病
毒 ,但样品病毒病症状明显 ,可能寄主中仍含有其他
病毒种类未被检测出 。近年来已报道在我国多种杂
草上存在双生病毒的侵染[ 9-10] ,且症状常表现为植
株叶片黄化和黄脉 ,本研究未对样品做针对这类病
毒的检测 ,不能排除样品感染双生病毒的可能性 ,具
体病原有待进一步研究。
·139·
　2009 , 35(4):140-142 P lant Protection
收稿日期:　2008-12-05　　　修订日期:　2009-02-16＊致　　谢:　本文承正高级工程师张山林指导 ,谨此致谢。
大栗鳃金龟幼虫空间分布型研究＊
马艳芳 , 　谢宗谋 , 　张永强 , 　郭彦林
(甘肃临夏州森林病虫害防治检疫站 , 　731100)
摘要　通过采用空间分布型统计分析方法对大栗鳃金龟 3 龄幼虫的分布格局进行研究 ,结果表明:大栗鳃金龟 3 龄
幼虫在 0 ～ 10 cm 土壤中呈聚集分布 ,分布的基本单位是个体群 , 为田间调查及防治提供了科学依据。
关键词　大栗鳃金龟;　空间分布型;　聚集度指标;　回归分析法
中图分类号:　S 433.83　　文献标识码:　A　　DOI:　10.3969/ j.issn.0529-1542.2009.04.033
Spatial distribution patterns of Melolontha hip pocastani larvae
Ma Yanfang , 　Xie Zongmou , 　Zhang Yongqiang , 　Guo Yanlin
(L inx ia Management &Quarantine Station of Forest Pests and Diseases , Gansu　731100 , China)
Abstract　The spatial distribution statistical analysis method w as used to study the spatial pa tte rns of the 3rd instars
of Melolontha hippocastani Fabricius.The results indicated that it w as agg regative distribution in the soils o f 0-
10 cm in depth , with a g roup of individuals as a unit.It pro vides the basis fo r field inve stigation and contro l.
Key words 　 Melolontha hip pocastani Fabricius;　 spa tial dist ribution;　 agg regation indexes;　 reg ression
analy sis methods
　　大栗鳃金龟(Melolontha hippocastani Fabrici-
us)属鞘翅目金龟甲科昆虫 ,在甘肃省临夏地区 5年
发生 1代 ,成虫在逢“0”逢“5”年份周期性发生 ,期间
幼虫(蛴螬)在地下为害新造幼林 、苗圃幼苗及牧草
和农作物根系 ,轻者造成生长衰弱 ,枝叶枯黄 ,重者
使幼树 、幼苗及其他植物成片枯死 ,严重影响造林和
育苗的成活率 、保存率 ,对当地的生态植被恢复建设
构成重大威胁。研究大栗鳃金龟幼虫在一定空间内
的扩散分布形式 ,对开展害虫蔓延扩散规律及确定
幼虫最佳防治时期都具有极其重要的意义。2008
年作者在临夏州广河县风转磨梁对大栗鳃金龟 3龄
幼虫空间分布型进行了调查研究 ,现报道如下 。
1　材料与方法
1.1　调查地概况
广河县风转磨梁地处青藏高原与黄土高原的过
渡地带太子山北麓浅山区 ,属沟梁平行相间地貌 ,坡
面完整 ,坡度平缓 ,海拔 2 500 m ,气候寒冷偏湿 ,年
平均气温 5.2 ～ 5.8 ℃,无霜期 100 ～ 133 d;年降水
量 600 ～ 800 mm ,土壤类型主要为黑土和黑钙土。
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