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青羊参的生药学研究



全 文 :青羊参的生药学研究
Studies on Pharmacological of Radix Cynanchi Otophyll i
曹继华 Cao Jihua,曹伶俐 Cao Ling li ,王正益Wang Zhengyi ,朱琳歌 Zhu Linge
河南中医学院药学院 ,河南 郑州 450008
Department of Pharmacy , Henan Co llege of T raditional Chinese Medicine , Zhengzhou , Henan , China , 450008
摘要:目的:青羊参为萝摩科鹅绒藤属(Cynanchum)植物青羊参(Radix Cynanchi O tophy11i)的干燥根 , 是云南省的地方性药材 ,
本文对青羊参进行了生药学研究 ,找出鉴别生药青羊参的有效方法。方法:野外采集结合查阅文献 、作显微及理化鉴别研究。
结果:对青羊参进行了较系统的生药学研究 , 找出了生药的外观性状 、根的横切面与粉末的显微特征和理化鉴别方法 ,并绘制
了青羊参根横切面详图及简图和显微照像粉末特征图。结论:本项研究对青羊参的真伪鉴别 、开发利用 、制定药材质量标准 ,
提供了科学依据。
Abstract:Objective:The traditional Chinese medicine Radix Cynanchi O tophlli is AS-CI epiadaceae of cynachum o tophy lli linn.I t
used be painted at yunnan province.In this dissertation , pharmacognosy on Cynanchum otophyllum Schneid w as studied.To provide
an available pharmacognostical identification methods o f the Cynanchum o t otophllum Schneid.Methods:Studies were carried out on
the mo rphological identificaltion , microscopic identification and chemical identification after the rootstock w ere collected from boon-
docks.Results:Microscopic characteristics of Cynanchum otophyllum Schneid were studied , The mo rphological character , microscop-
ic character , the phy sical and chemical identification methods were found.The micrographs of its root , pow der , transaction were
drawn.Conclution:To provide a scientific basis for the identification and rational clinical use and the establishment of the quality
standard of Cynanchum otophyllum Schnied.
关键词:青羊参;本草考证;生药学;研究
Key words:Radix Cynanchi Otophylli;Herbalogical study;Pharmacognosy;Studies
中图分类号 CLC number:R284.1  文献标识码 Document code:A  文章编号 Article ID:1672-6839(2007)03-0029-03
  青羊参为萝摩科鹅绒藤属植物青羊参(Cynanchi Oto-
phylli Suhneid.)的干燥根 , 甘 、辛 、温。 入肝 、脾 、肾三经。 有
小毒。能祛风镇痉 、解毒止痛 、补益肝肾。用于风湿骨痛 , 腰
肌劳损 , 体虚神衰 , 小儿疳积 , 癫痫 , 狂犬咬伤等证[ 1] 。始载
于《植物名实图考》 , 谓:“青羊参生云南山中 , 似何首乌。 根
长 ,开五瓣小白花 , 成攒 , 摘枝有白汁” [ 2] 。是云南地方常用
药材。现代药理研究表明:青羊参的氯仿提取物对大鼠听源
性惊厥具有对抗作用;但能加强苯巴比妥钠和苯妥英钠的抗
小鼠超强电休克惊厥效应;对小鼠回避性条件反射有抑制作
用。青羊参中等剂量可使部分家鼠大脑皮质电图出现异样 ,
大剂量可引起部分家鼠典型性阵挛性惊厥[ 3] 。但对硫酸亚
铁引起的慢性癫痫模型家鼠有治疗作用 , 并能使异常的大脑
皮质电图恢复正常。 青羊参总苷可升高小鼠脑突触体中
GABA含量 , 抑制大脑 GDH 、谷氨酰胺酶及门冬酰胺酶活
性[ 4] 。临床药理学对青羊参的抗癫痫作用的机理探讨认为:
青羊参控制癫痫发作机理不同于苯巴比妥对大脑的抑制作
用 ,而是其对中枢神经的特殊兴奋作用的结果。根据药理作
用和临床的探讨 , 说明青羊参既有中枢兴奋作用又能抗惊
厥[ 5] 。现代化学研究表明青羊参主要含 C21甾体苷及其苷元
告达庭(caudatin), 青羊参苷元(qingyangshengenin), 洋地黄毒
糖(dig itoxo se),青羊参苷(otophylloside)A、B、罗他明(喙牛奶
菜碱 rostratamine),棕榈酸甲酯(Palmitic acid methyl ester),β
-谷甾醇(β-sitosterol), 香草酸(vanillic acid)[ 6] 。目前认为
青羊参有效成分是从根部提取出来的甾体酯苷类成分 ,治疗
各型癫痫均有较好疗效 , 尤其对大发作为佳 , 总有效率为
80.56%[ 7] 。
本文在总结其他药学工作者对青羊参的研究基础上进
行了品种整理和质量研究 ,对其进行了本草考证 、基源鉴定 、
性状鉴定 、显微鉴定 、化学成分 、理化鉴定与药理实验等系列
研究。本文对和青羊参同属的三种易混淆植物进行了生药
形态的对比区分;并绘制了青羊参的粉末显微图和根显微详
图;同时对青羊参所含有效成分进行了理化试验。通过系列
研究可进一步为鉴定其真伪并澄清混乱用药现象及将青羊
参资源进一步开发和利用 , 制定药材质量标准提供科学依
据。
1 试验仪器与材料
分析天平 ,上海第二天平仪器厂。 UV-260 紫外分光光
度计 , 上海科艺光学仪器厂。显微摄影仪 XSA-S、X-2 型
双目生物显微镜 20×※2000×(中国机械进出口公司济南医
用光学仪器厂)。显微量尺 、描绘目镜(10×), 北京第三光学
仪器厂。 SHZ-D 循环式真空泵 , 河南英峪豫华仪器厂等。
试验材料青羊参为采自云南省曲靖郊区山上 , 经河南中医学
院中药鉴定教研室曹继华教授鉴定为萝摩科鹅绒藤属(Cy-
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No.3 May 2007          
河 南 中 医 学 院 学 报
JOURNAL OF HENAN UNIVERSIT Y OF CHINESEMEDIC INE
          第 22卷 总第 130 期
Vol.22 Serial No.130
DOI :10.16368/j.issn.1674-8999.2007.03.014
nanchum)植物青羊参(Cynanchum otophyllum Schneid.)的干
燥根。
2 试剂
水合氯醛 ,洛阳化学试剂厂 , 20050115。 稀甘油 , 天津市
医药公司 , 20040201。 乙醇 95%, 北京化学试剂二厂 ,
20050202。石油醚 , 天津市医药公司 , 20050802。乙酸乙醋 ,
上海华彭实业有限公司 , 200401。正丁醇 , 郑州化学试剂三
厂 , 20030615。丙酮 , 广东后歧化工厂 , 20030223。 甲醇 , 天
津市医药公司 , 20040222。冰醋酸 ,北京市化工厂北京试剂 ,
20030630。乙酸 , 北京市化工厂北京试剂 , 20030408。 98%
硫酸 , 开封开化(集团)有限公司试剂厂三丰牌 , 20050109。
纯硅胶 ,中国青岛海洋化工集团公司出品 G60 型薄层层析用
海洋牌 , 20050714。硝酸(优级纯), 洛阳化学试剂厂生产 ,
20060105。
3 植物形态
多年生缠绕草本 ,长 2 ~ 5 m。根具白色乳汁 , 呈长圆柱
形 ,肥大 ,肉质 , 表面褐色 , 具皱纹及极少须根。 有茎痕或残
茎 ,直径 1 ~ 5 cm。外表淡黄色 , 有横皱纹 ,并可见残存横形
皮孔及棕色栓皮。质坚硬断面类白色 , 粉性 , 有鲜黄色孔点
(导管)散列成不连续的二环 ,中心也有孔点散在。
茎纤细 , 圆柱形 , 略扁 , 红紫色 , 绿色或一面紫 , 一
面绿色 , 扭曲 , 具纵纹 , 被毛。单叶对生;叶柄长 0.6 ~
5.2 cm , 上面紫色 , 有槽 , 槽缘被短柔毛 , 下面绿色 , 圆
形;叶片三角状卵形 , 长 2.5~ 9.5 cm , 宽 1 ~ 7.5 cm ,
端长尖 , 基部耳状心形 , 全缘 , 上面绿色 , 疏生短柔毛 ,
下面淡绿色;叶脉凸出 , 脉上疏生短柔毛或光滑无毛 , 基
出5 脉。伞形花序腋生 , 有花 11 ~ 21 朵;花小 , 花萼绿
色 , 边缘紫 , 5 深裂 , 裂片长卵状三角形 , 长不及 2 mm ,
宽不及 1 mm , 外面被微毛 , 基部内面有 5 个腺体;花冠白
色或绿白色 , 5 深裂 , 裂片长卵形 , 长约 3 mm , 宽约
1.2 mm , 顶端钝 , 微带淡紫色 , 边缘具狭膜质 , 背面光
滑 , 内面疏被细柔毛 , 与萼裂片互生;副冠白色 , 上部离
生 , 5 枚 , 卵状矩圆形 , 长约 1.5 mm , 宽约 1 mm , 顶端
钝圆具极浅 3 裂 , 基部连成短筒状与合生雄蕊相连;雄蕊 5
枚 , 花丝连生成管状包被雌蕊 , 花药合生 , 顶端有半圆形
白色薄膜覆盖柱头面 , 花药 2 室 , 每室有一黄色卵形的花
粉块 , 中间以一红色的载粉器相连;雌蕊 1 枚 , 子房上位 ,
由2 分离心皮组成 , 花柱短 , 柱头周围具极小齿缺。
果 2角状 , 成熟时沿一侧开裂。种子多数 , 卵形 , 顶端有
白长毛。见封三图 1。
4 性状鉴别
本品成圆柱形 , 稍弯曲 , 根头部膨大 , 具残留的茎基及茎
残迹突起 ,其上着生横向地下茎;根长 20 ~ 40 cm , 直径1.5 ~
3 cm。外表黄褐色之棕褐色 , 有明显的纵皱纹和纵沟槽 , 具
横行皮孔;表皮脱落处显黄褐色。质硬 ,易折断 , 折断时有粉
尘 ,断面类白色 , 可见淡白色小孔(导管), 散列成不连续的二
环 ,中心亦有小孔散在。气辛香 , 味苦 、微甜。本品注意与易
混品区别。见表 1。
表 1 青羊参及其易混淆品的性状比较
牛皮消 白首乌 隔山消 青羊参
C.au ricutalum C.bungei C.wilfordii C.otophllum
长圆锥形或长纺锥形 , 稍弯曲略成节状 ,表面浅棕色 ,具纵皱纹 , 皮孔横长 , 栓皮脱落处浅黄色 , 具网状纹理。 质 硬 而脆 ,断面平坦 ,类白色 ,粉性 ,黄色放射状纹理 ,气微 ,味微甘而后苦。
块根不规则团块状 , 葫芦形或梭形 , 表面棕色至 棕褐色 ,凹凸不平 ,皮孔横长 , 栓皮层脱落处浅黄色 , 略具网状纹理。质硬而脆易折断 ,断面平坦 , 类白色粉性 , 有稀疏黄色放射状纹理 ,气微 ,味甘微苦。
长圆柱形 , 稍膨大弯曲 , 多为节状 , 表面土棕色 , 具纵皱纹 , 皮孔横长 , 栓皮脱落处土黄色 , 具细微的网状纹理 ,质硬而脆,易折断 , 断面平坦 , 类白色粉性 , 有黄色放射状纹理,气微 ,味微苦。
圆锥形 , 中部末 端又分出 数根支根 , 表面具皱纹 , 皮孔横长 , 质硬而 脆易折断 , 断面平坦 , 略成粉性 , 黄色放射 状纹理 较 宽。气 微 , 味淡。
5 显微鉴别
5.1 实验方法
药材根茎 、粉末显微特征观察采用石蜡切片和徒手切
片 ,药材的粉末特征观察采用水合氯醛透化法 、硝铬酸解离
法和间苯三酚染色法。绘图采用显微描绘依影绘图。
5.2 根横切面
木栓层由数层长方形木栓细胞组成。皮层较狭窄 ,内侧
的石细胞群断续排列成环。韧皮部较宽阔 , 筛管群明显。形
成层不明显。木质部由导管 、木纤维 、木射线组成 ,导管群排
列不规则 ,木射线宽广 , 薄壁细胞中含淀粉粒及草酸钙簇晶。
见封三图 2、图 3。
5.3 粉末特征
淡黄色 , ①石细胞:黄色 ,类方形 、椭圆形 、多边形及不规
则形 ,长 55~ 160 μm , 宽 36 ~ 96 μm , 孔沟明显 , 并可见增厚
的层纹。 ②草酸钙簇晶:直径 15~ 40 μm , 棱角尖或钝尖。 ③
淀粉粒:单粒卵圆形 、类圆形 、多边形不等 ,大粒可见点状 、裂
隙状的脐点 ,层纹不明显 , 直径 5 ~ 13 μm。复粒由 2、3 、4 及
多粒组成。 ④导管:具缘纹孔 , 纹孔椭圆形 , 排列稍密 , 直径
114 ~ 164 μm;另有网纹导管。⑤木纤维:黄绿色 , 木化 ,常为
断节 , 纹孔明显直径 18 ~ 26 μm。 ⑥木栓细胞:多角形 , 长
55 ~ 105 μm ,宽 39~ 90μm ,淡棕色。见封三彩图 4 ~ 图 9。
6 化学成分
青羊参根主要含 C21甾体苷及其苷元告达庭(caudatin),
青羊参苷元(qingyangshengenin), 洋地黄毒糖(digito xose), 青
羊参 苷(otophylloside)A 、 B、罗 他明(喙 牛奶菜 碱 ros-
tra tamine),棕榈酸甲酯(Palmitic acid methyl ester), β -谷甾
醇(β-sito sterol),香草酸(vanillic acid)等化学成分[ 9] 。青羊
参苷是现在确认抗癫痫的有效成分 , 它对中枢神经系统有特
殊兴奋作用[ 10 ~ 12] 。
7 理化鉴别
7.1 皂苷反应
取本品粗粉 2 g , 加入乙醇 20 ml , 置水浴上加热回流
20 min , 滤过 ,取滤液 2 ml , 置白色蒸发皿中 , 水域上蒸干 , 冷
后 ,加醋酐 2 ml ,溶解残渣 ,再加硫酸 2 滴 , 溶液显紫红色 , 速
转为绿色 ,最后显蓝绿色。
7.2 氨基酸反应
取本品粗粉约 0.1 g , 加 50%乙醇 5 ml ,置水浴上温浸片
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青羊参…Studies on… 曹继华…Cao Jihua…    
第 22 卷 总第 130 期
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刻 ,滤过 ,取滤液 1 ml , 加 0.2%茚三酮试剂 ,置沸水中 , 加热
数分钟 ,溶液呈红紫色。
7.3 生物碱反应
取本品粗粉5 g ,加乙醇 25 ml ,置水浴上回流半小时,滤过 ,
滤液分别置于 3支小试管中 ,分别加碘化铋钾显黄白色沉淀;加
碘化钾碘试液显棕红色沉淀;加碘化汞钾试液显黄色沉淀。
7.4 甾体化合物反应
取粉末 10 g 于 250 ml 圆底烧瓶中 , 加 95%的乙醇
100 ml ,于水浴上加热回流 1 h , 稍冷后加蒸馏水 , 使其含醇
量为 70%, 冷至室温 , 过滤 , 滤液用 100 ml 石油醚(60℃~
90℃)分两次萃取后浓缩至 40 ~ 50 ml , 再加 95%的乙醇
50 ml溶解过滤 ,取滤液 2 ml , 置蒸发皿中水浴蒸干 , 残留物
加氯仿 1 ml溶解并移至小试管中 , 沿管壁加入浓硫酸 1 ml ,
氯仿层呈红色 ,硫酸层在紫外灯下有绿色荧光 。
8 小结
从青羊参与易混淆的同属四种植物的植物形态检索表,
并通过对比四种植物标本, 从根的形状 、断面颜色 、木栓层特
征、及茎和叶的特征, 得出其植物形状的差异 ,并列表对比。
对这四种药材进行了显微研究对比 , 从石细胞、淀粉粒 、草酸
钙簇晶 、乳管 、导管五个方面的特征进行对比, 找出了青羊参
与其他植物的主要区别点。对青羊参进行了初步的理化实
验, 得出青羊参的根所含主要有效成分是甾体化合物 , 并得出
青羊参所含化学成分的类型主要是皂苷 、氨基酸、生物碱等。
本项研究对青羊参进行了系列的生药学研究 , 对其来
源 、性状 、显微特征 , 与易混淆品种进行了对比 , 从理化反应
等方面找出了青羊参的真伪鉴别方法 , 为更好的开发利用青
羊参药源与制定药材质量标准提供了科学依据。
参考文献:
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编辑:程延安
收稿日期:2006-12-24
作者简介:曹继华(1943-), 女 ,四川阆中人 , 教授 , 硕士研究
生导师。
(上接第 28 页)
4.2 电泳操作[ 7 ~ 8]
取出样品模子 , 加入电极缓冲液 , 用微量进样器分别吸
取样品液各 2次 , 每次分别为 25 μl , 然后注射到样品槽内的
电极缓冲液之间的界面上。加样后 ,向上槽缓冲液中加 1~ 2
滴溴酚蓝指示剂示踪 , 按正 、负极接通电源 , 电泳开始时 , 电
流控制在 15 mA , 样品进入分离胶后 ,加大到 25 mA 并保持
至电泳结束 ,待示踪指示剂行至末端 1 cm 即结束电泳。
4.3 染色与脱色[ 9]
取出胶板 , 放入考马斯亮蓝 R250 染色液中 , 在 37℃染
色 1 h。染色后 ,用水冲去凝胶表面的染料 , 用脱色液脱色 ,
反复更换洗脱液直至背景清晰为止 ,放在 7%~ 8%的冰乙酸
水溶液中保存。
5 实验结果
根据样品的泳动率(Rf)值 , 聚丙烯酰胺 , 凝胶蛋白电泳
谱带形态 ,位置和着色度程度绘制出电泳图谱 , 以完全涂实 、
划斜线 、划交叉线 、划点点分别代表凝胶上的Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ级
谱带 ,其电泳图谱见封三彩图 1。
6 小结
从聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳图谱可以看出 , 浮小麦与小
麦的电泳图谱差异显著。故可利用聚丙烯酰胺凝胶蛋白电
泳方法鉴别浮小麦与小麦粉末的真伪 , 本项研究为种子类中
药的鉴别提供了新的科学依据。
参考文献:
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编辑:程延安
收稿日期:2006-12-21
作者简介:王正益(1942-), 男 ,四川营山人 , 教授 , 硕士研究
生导师。
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